雙歧桿菌治療放射性腸炎的腸道菌群變化分析

邵盈，朱飛濱

放射性腸炎是繼發(fā)腹盆腔部腫物放療后最常見的并發(fā)癥之一。90%～95%患者在盆腔放療過程中會出現(xiàn)不同程度的急性放射性腸炎[1]，約50%患者于放療后數(shù)月甚至數(shù)年演變?yōu)槁苑派湫阅c炎[2]，長期出現(xiàn)的慢性放射性腸炎還可伴有吸收不良甚至出現(xiàn)惡液質(zhì)，嚴重影響患者的生活質(zhì)量。隨著現(xiàn)代醫(yī)療事業(yè)發(fā)展，目前可借助放射治療病史及臨床癥狀初步診斷放射性腸炎，最終診斷則采用內(nèi)鏡檢查、糞便脂肪測定及組織病理檢查，最有效的方式是糞便檢查，給予對癥治療利于重建腸道微生態(tài)平衡，達到改善預后的目的[3]。本研究分析雙歧桿菌治療放射性腸炎的腸道菌群變化，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月-2019年4月惠州市中心人民醫(yī)院接收的放射性腸炎患者65例為觀察組，其中男35例，女30例；年齡24～73(48.53±5.26)歲；體質(zhì)量指數(shù)18～25(23.21±5.19)kg/m2。另擇取同期健康體檢者65例為對照組，男34例，女31例；年齡25～76(48.62±5.17)歲；體質(zhì)量指數(shù)19～26(23.54±5.05)kg/m2。2組性別、年齡及體質(zhì)量指數(shù)等一般資料比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究通過《世界醫(yī)學協(xié)會赫爾辛基宣言》相關(guān)要求，患者或家屬知情并簽署知情同意書。

1.2 選擇標準 觀察組納入標準：采用腸鏡、X線及病理檢查確診為放射性腸炎者[4]；具備自主溝通能力；患者具體表現(xiàn)為腹痛腹脹、便秘交替及腸出血等癥狀；既往有明確的腹部放射線損傷病史。排除標準：凝血功能障礙或免疫系統(tǒng)異常者；伴重要臟器功能障礙者；精神障礙或依從性較差者。

1.3 治療方法 觀察組給予雙歧桿菌三聯(lián)活菌腸溶膠囊(晉城海斯制藥有限公司生產(chǎn)，國藥準字S19993065，規(guī)格：210 mg/粒)2～3?？诜刻?次，后期根據(jù)病情恢復程度調(diào)整藥物劑量，持續(xù)用藥2周。

1.4 觀察指標與方法 (1)測定觀察組治療前后雙歧桿菌、腸球菌、乳酸桿菌及大腸桿菌的數(shù)目，并比較2組雙歧桿菌、腸球菌、乳酸桿菌及大腸桿菌的數(shù)目。(2)統(tǒng)計觀察組患者服藥期間不良反應(骨髓抑制、皮疹、神經(jīng)毒性及水腫)發(fā)生情況。

1.5 檢測方法

1.5.1 采集標本：將研究對象自然排出的新鮮糞便3～5 g置于無菌干燥采便盒，將其送往實驗室檢查，確保1 h內(nèi)完成稀釋、接種及培養(yǎng)流程。

1.5.2 稀釋方式：將稱取的成形糞便1 g內(nèi)加入稀釋液1 ml，充分混合均勻后將稀釋液按照10倍稀釋法稀釋糞便至10-7，將其在選擇性培養(yǎng)基上接種[5]。

1.5.3 雙歧桿菌培養(yǎng)基：取粉末59.3 g，向其中加入蒸餾水600 ml，同時加入配套的西紅柿浸出液試劑，121 ℃環(huán)境下高壓滅菌處理15 min，充分混合均勻，待冷卻至55 ℃時傾注無菌平皿，冷卻凝固后放置在-4 ℃冰箱保存。

1.5.4 腸道菌群的分離培養(yǎng)及鑒定：(1)糞便直接涂片檢查：利用無菌竹簽沾取較多的新鮮糞便，將其涂抹在干凈的載玻片上，其涂抹厚度與血液推片具相似性，直徑≤2.0 cm較適宜，室溫下自然干燥后借助酒精燈固定，利用革蘭染色液染色處理較適宜。(2)染色步驟：將結(jié)晶紫染液滴加在載玻片上達到涂片的目的，蓋住糞便涂片作為液體量，等待1 min后將染液傾除，細流水沖洗；滴加脫色液在涂片上等待30 s，細流水沖洗；利用濾紙將多余的水分吸去，室溫環(huán)境下自然干燥后利用顯微鏡觀察，對涂片厚薄及染色情況仔細觀察。(3)選擇、培養(yǎng)并鑒定指標菌：選擇厭氧菌及需氧菌各2種，其中厭氧菌更具代表性的是雙歧桿菌(顯微鏡下厭氧37 ℃恒溫培養(yǎng)71 h，菌落直徑為0.8～2.2 nm，濕潤且凸起，邊緣整齊不透明，呈Y、V字排列且不均勻染色)及乳酸桿菌；需氧菌更具代表性的是腸球菌及大腸桿菌，根據(jù)臨床實際情況完成上述腸道菌群的分離及培養(yǎng)，鑒定菌形后統(tǒng)計菌落數(shù)目[6]。

2 結(jié) 果

2.1 腸道菌群數(shù)目比較 治療前觀察組雙歧桿菌、腸球菌及乳酸桿菌數(shù)目均少于對照組(P<0.05)，治療后雙歧桿菌、腸球菌及乳酸桿菌數(shù)目均多于治療前(P<0.05)，但與對照組比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。觀察組治療前、后大腸桿菌數(shù)目與對照組比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2 觀察組治療期間不良反應 觀察組患者用藥期間出現(xiàn)皮疹2例、神經(jīng)毒性1例、水腫1例，不良反應總發(fā)生率為6.15%(4/65)。

表1 2組腸道菌群數(shù)目比較

3 討 論

研究顯示，盆腔及腹膜等惡性腫瘤患者經(jīng)放射治療后引起的腸道并發(fā)癥是放射性腸炎，以腸道遭受輻射劑量、發(fā)病緩急及時間為基點將該病癥分為急性與慢性放射性腸炎，患者有惡心嘔吐、血樣便及腹瀉等癥狀表現(xiàn)，病因是內(nèi)外照射的放射治療，發(fā)病率與照射劑量及時間有直接聯(lián)系，若未及時接受治療則嚴重損害機體消化系統(tǒng)，影響吸收，病情較重者甚至發(fā)生潰瘍、壞死或穿孔等現(xiàn)象危及生命。

腸道菌群對幫助消化、代謝外源性化學物質(zhì)、維持腸道上皮的正常更新、培育腸道免疫系統(tǒng)均有重要作用[7]。1900年就觀察到腸道菌群會加重放射性腸炎，腹部放療后，腸道菌群的改變在腸道輻射損傷中起重要作用。臨床隨機對照試驗發(fā)現(xiàn)，乳酸菌聯(lián)合雙歧桿菌預防盆腔放療中放射性腹瀉的良好功效。腸道益生菌在放射性腸炎所致的腹瀉的預防和治療中有了良好的應用前景。流行病學調(diào)查和體內(nèi)基礎研究表明，益生菌具有抗腫瘤效應[8]，對腸道輻射損傷的后期并發(fā)癥也起到了預防和治療作用，腸道菌群通過以下方面對人體產(chǎn)生影響：(1)結(jié)構(gòu)方面：腸道菌群對宿主正常的組織學及解剖學結(jié)構(gòu)具有保護作用，在菌群形成屏障，在腸道內(nèi)有生物屏障形成，以營養(yǎng)競爭及占位效應為基點，對條件致病菌的過度生長及外來致病菌的入侵起到抑制作用；(2)腸道發(fā)育及功能方面：腸上皮細胞的翻轉(zhuǎn)、隱窩深度、腸上皮增殖及局部血管生成均有腸道細菌參與，在藥物代謝及胃腸動力等過程中具有重要作用，同時正常的腸道微生物群可代謝產(chǎn)生氨基酸、脂質(zhì)及碳水化合物，刺激腸道淋巴樣組織成熟，且達到防癌目的，具有可行性。研究報道顯示，雙歧三聯(lián)活菌制劑治療放射性腸炎可提高整體療效，主要用于治療腸道菌群失調(diào)引起的急慢性腹瀉及腹脹等，其屬復方制劑，藥物中含有雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌及糞腸球菌，具有作用快及持久等優(yōu)勢，口服用藥后可在整個腸道黏膜表面形成生物屏障，避免致病菌侵襲人體，對有害菌產(chǎn)生內(nèi)毒素發(fā)揮抑制作用，清除腸道內(nèi)致病菌，且維持人體腸道菌群的平衡，促進腸道的生理功能恢復，促進機體消化營養(yǎng)物，并強化自身抵抗力[9]。

造成腸道菌群失調(diào)的原因如下：放射線對宿主腸上皮細胞的表面結(jié)構(gòu)造成直接損傷，導致雙歧桿菌、乳酸桿菌及腸球菌等不能穩(wěn)定至黏蛋白層或上皮細胞表面，患者出現(xiàn)腸蠕動緩慢、淤滯及微絨毛損傷現(xiàn)象，使腸道清除能力明顯降低，與過路菌接觸及黏附，使其在腸黏膜上定植的時間延長，同時放射線會將正常的菌群直接殺滅或抑制，擾亂腸道正常菌群，使機體腸道菌群功能出現(xiàn)紊亂現(xiàn)象，不利于患者病情康復。本研究結(jié)果顯示，觀察組治療前雙歧桿菌、腸球菌及乳酸桿菌的數(shù)量均少于對照組；治療后患者雙歧桿菌、腸球菌及乳酸桿菌較治療前明顯升高；觀察組不良反應總發(fā)生率為6.15%。表明雙歧三聯(lián)活菌制劑治療放射性腸炎有助于腸出血、便秘及腹痛腹瀉等癥狀消退，具有安全性高、療效確切等優(yōu)勢，可調(diào)整腸道菌群失調(diào)，便于獲得良好的治愈疾病效果，本研究與劉永潔等[10]結(jié)果基本相符。

綜上所述，雙歧三聯(lián)活菌制劑治療放射性腸炎對腸道菌群失調(diào)有調(diào)節(jié)作用，可重建宿主微生態(tài)平衡，療效較好，且不良反應較少，值得臨床推廣應用。