崇明“苦草”基源探究

徐 剛，郁愛(ài)萍，陸春勝，張學(xué)博，蘇靜，陳云忠，徐 波，倪學(xué)斌*，衛(wèi) 岳，施大鐘

(1.上海市崇明食品藥品檢驗(yàn)所，上海 202150；2.上海市崇明區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局，上海 202150；3.上海市崇明區(qū)經(jīng)濟(jì)促進(jìn)會(huì)，上海 202150；4.上海崇明苦草實(shí)業(yè)有限公司，上海 202152)

崇明“苦草”是崇明島家喻戶曉、世代相傳的一種藥草，民間將苦草煮雞蛋常作為婦女產(chǎn)后康復(fù)的食療佳品。崇明“苦草”因其味苦而得名“苦草”，且其功效類似益母草，曾被誤認(rèn)為益母草[1]。實(shí)際上，崇明“苦草”與益母草在植物形態(tài)上完全不同。本課題通過(guò)對(duì)崇明“苦草”的民間習(xí)用進(jìn)行考證，了解其使用歷史、使用習(xí)慣和品種狀況，并通過(guò)對(duì)其原植物形態(tài)、性狀進(jìn)行鑒定，利用薄層鑒別與液質(zhì)聯(lián)用分析方法來(lái)探究崇明“苦草”的基源，以期達(dá)到正本清源的目的。

1 崇明“苦草”民間習(xí)用考證

1.1 崇明“苦草”歷史、品種考證

崇明“苦草”最早見(jiàn)于《上海常用中草藥》[2]收載的秋蒿，土名：苦草、野苦草、香苦草，其原植物為菊科黃花蒿ArtemisiaannuaLinn，藥用全草，苦寒，清熱消暑，用于暑熱發(fā)痧、胸悶、腹痛，也可作為清暑飲料；對(duì)瘧疾、疥瘡、風(fēng)疹塊等亦有一定治療功效。崇明習(xí)俗[3-4]為產(chǎn)婦臨產(chǎn)前，家人準(zhǔn)備好蛋、雞、紅糖、苦草，以苦草煮蛋供其產(chǎn)后食用，滋養(yǎng)身體，俗稱“苦草茶蛋”?！犊滴醭缑骺h志》記載有兩種相近藥草：海艾、青蒿[5]?！队赫缑骺h志》記載：“海艾，產(chǎn)婦多用之；青蒿，邑產(chǎn)最佳?！盵6]此后縣志無(wú)海艾之名，但青蒿仍有記載。崇明“苦草”植株較高大，與艾是同屬植物，特征相仿，清代縣志上出現(xiàn)的海艾可能就是今之崇明“苦草”。崇明“苦草”在民間相傳沿用數(shù)百年，但歷代縣志僅在近代才出現(xiàn)苦草之名[3]，崇明“苦草”因苦得名，又用于產(chǎn)婦產(chǎn)后康復(fù)，故崇明“苦草”往往與益母草混為一談[1,4]。

1.2 崇明“苦草”種植、采收與使用習(xí)慣

崇明“苦草”一般春三月播種在田間地頭、房前屋后，9-10月開(kāi)花，11月結(jié)果時(shí)采收，從根部切斷，整枝帶花果葉曬干后捆成小扎，晾置于屋檐下或柴房橫梁上，以陳者良。食用時(shí)，洗凈加水煎煮，沸后加入煮熟去殼的雞蛋(或再加入紅棗)轉(zhuǎn)為文火燉，吃蛋喝湯。產(chǎn)婦吃苦草煮雞蛋一周后，即可排盡惡露，恢復(fù)元?dú)?。因此，苦草在崇明有“子孫草”之稱。在崇明，男女老少也有食用苦草的習(xí)慣，崇明島是有名的長(zhǎng)壽之島，島上大多數(shù)80歲以上老人平常都有喝苦草茶的習(xí)慣。據(jù)老者述說(shuō)，過(guò)去只要有發(fā)熱、皮膚騷癢、肚子疼、腹瀉、飲食無(wú)味、頭暈?zāi)垦?、手足無(wú)力、精神不振等癥狀，都用吃苦草茶的方法食療，一般一周就會(huì)消除癥狀，恢復(fù)元?dú)?。因此，民間又將苦草稱之為“仙草”。正因苦草具備獨(dú)特的重振產(chǎn)婦元?dú)庵δ?，又有?duì)眾多疾病的食療功效，它才成為崇明家家戶戶數(shù)百年來(lái)不離不棄的藥草，也才能在民間生生不息，延續(xù)種植。

2 崇明“苦草”原植物形態(tài)

崇明“苦草”為一年生草本植物，植株有濃烈的揮發(fā)性香氣。莖單生，高100～200 cm，基部直徑可達(dá)1 cm，有縱棱，幼時(shí)綠色，后變褐色或紅褐色，多分枝。莖、枝、葉兩面及總苞片背面無(wú)毛或初時(shí)背面微有極稀疏短柔毛，后脫落無(wú)毛。莖下部葉寬卵形或三角狀卵形，長(zhǎng)3～7 cm，寬2～6 cm，綠色，三回羽狀深裂，每側(cè)有裂片5～8枚，裂片長(zhǎng)橢圓狀卵形，再次分裂，小裂片邊緣具多枚櫛齒狀三角形或長(zhǎng)三角形的深裂齒，葉柄長(zhǎng)1～2 cm，基部有半抱莖的假托葉。中部葉二回羽狀深裂，小裂片櫛齒狀三角形。上部葉與苞片葉一回羽狀深裂，近無(wú)柄。頭狀花序球形，多數(shù)，直徑1.5～2.5 mm，有短梗，下垂或傾斜，在分枝上排成總狀或復(fù)總狀花序，并在莖上生有開(kāi)展、尖塔形的圓錐花序。總苞片3～4層，外層總苞片長(zhǎng)卵形或狹長(zhǎng)橢圓形，中肋綠色，邊膜質(zhì)，中層、內(nèi)層總苞片寬卵形或卵形，花序托凸起，半球形?；ㄉ铧S色，雌花10～18朵，花冠狹管狀。兩性花10～30朵，結(jié)實(shí)或中央少數(shù)花不結(jié)實(shí)，花冠管狀。瘦果小，橢圓狀卵形，略扁。花果期9-11月。

3 崇明“苦草“性狀

崇明“苦草”一般為捆扎的小團(tuán)狀。莖枝為圓柱形，直徑1～6 mm；表面黃綠色至棕黃色，具縱棱線，有的可見(jiàn)互生的枝和葉；切面黃白色，中央有髓；質(zhì)略硬。葉片多皺縮、破碎呈暗綠色至棕黃色，完整者展平后為三回或二回羽狀深裂，裂片及小裂片矩圓形或長(zhǎng)橢圓形。頭狀花序，花序梗眾多。氣香特異，味微苦。

4 崇明“苦草”薄層鑒別[7-8]與液質(zhì)聯(lián)用定性定量[9-11]檢測(cè)

4.1 儀器與試劑

4.1.1 實(shí)驗(yàn)耗材 硅膠G預(yù)制薄層板、普通預(yù)制薄層板(上海東方藥業(yè)科技實(shí)業(yè)有限公司)；高效硅膠預(yù)制薄層板(HSGF 10 cm×10 cm，上海東方藥業(yè)科技實(shí)業(yè)有限公司)。

4.1.2 儀器 CAMAG全自動(dòng)點(diǎn)樣儀；CAMAG薄層攝像儀；1290 UHPLC 6470 QQQ超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀(美國(guó)Agilent Technology公司)；MS205DU十萬(wàn)分之一電子天平、ME104E萬(wàn)分之一電子天平(瑞士Mettler Toledo公司)；Ultrasonic Cleaner超聲儀(上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司)。

4.1.3 對(duì)照品與對(duì)照藥材 青蒿素對(duì)照品、青蒿對(duì)照藥材均來(lái)源于中國(guó)食品藥品檢定研究院。

4.1.4 供試樣品 三批崇明“苦草”(2017年、2018年、2019年)供試樣品由上海崇明苦草實(shí)業(yè)有限公司提供。

4.1.5 試劑 石油醚(60～90 ℃)、乙醚為分析純，乙腈、甲酸(≥98%)(HPLC，德國(guó)CNW公司)；乙酸銨(GR，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；實(shí)驗(yàn)用水為Thermo Fisher GEN PURE PRO制備的超純水。

4.2 供試溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

4.2.1 薄層色譜供試品溶液的配制 準(zhǔn)確稱取已粉碎的崇明“苦草”樣品3 g，加石油醚(60～90 ℃)50 mL，加熱回流1 h，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)诱和?0 mL使溶解，用20%乙腈溶液振搖提取3次，每次10 mL，合并乙腈液，蒸干，殘?jiān)右掖?.5 mL使溶解，供薄層色譜測(cè)定。

4.2.2 薄層色譜標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 稱取青蒿素對(duì)照品10.0 mg，置于10 mL容量瓶中，用乙醇溶解并稀釋至刻度，得最終濃度為1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.2.3 液質(zhì)檢測(cè)供試品溶液的配制 精密稱取已粉碎的崇明“苦草”樣品0.5 g，置100 mL容量瓶中，加入乙腈適量，超聲處理(40 kHz)15 min，用乙腈定容至刻度，取溶液過(guò)0.22 μm濾膜后，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定。

4.2.4 液質(zhì)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 精密稱取青蒿素對(duì)照品10.0 mg，置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，得最終濃度為100 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。準(zhǔn)確吸取1.0 mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用乙腈定容至100 mL，作為對(duì)照溶液。

4.3 薄層色譜與液質(zhì)檢測(cè)結(jié)果

4.3.1 薄層色譜 薄層色譜的展開(kāi)劑與顯色劑的選擇采用石油醚(60～90 ℃)-乙醚(4∶5)作為展開(kāi)劑，青蒿素的Rf值在0.7～0.8時(shí)，得到了較好的分離度，展開(kāi)后，薄層板晾干，噴以2%香草醛硫酸乙醇溶液，在105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，見(jiàn)圖1。

注：1.青蒿素對(duì)照品(點(diǎn)樣量：5 μg)；2.青蒿對(duì)照藥材；3.崇明“苦草”(2017年)；4.青蒿素對(duì)照品(點(diǎn)樣量：10 μg)；5.崇明“苦草”(2018年)；6.崇明“苦草”(2019年)

在上述條件下，3批次不同年份崇明“苦草”的薄層色譜具青蒿對(duì)照藥材和青蒿素對(duì)照品相同位置及相同顏色的斑點(diǎn)(2017年份的崇明“苦草”青蒿素斑點(diǎn)不明顯，隨著崇明“苦草”貯存時(shí)間延長(zhǎng)，所含青蒿素存在降解的可能)。

4.3.2 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜 色譜條件：流動(dòng)相：乙腈∶5 mmol/L 乙酸銨溶液(含0.1%甲酸)=55∶45(體積比)；流速：0.2 mL/min；進(jìn)樣量：1 μL；色譜柱：WatersBEH C18(1.7 μm，2.1 mm×50 mm)；柱溫：35 ℃。

質(zhì)譜條件：離子源：電噴霧離子源；掃描方式：正離子掃描(ESI+)；監(jiān)測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)；離子源電壓：3.5 kV；霧化氣壓力：45 psi；干燥氣流量：5 L/min；干燥氣溫度：300 ℃；鞘氣流量：11 L/min；鞘氣溫度：250 ℃；離子對(duì)、Fragmentor電壓及碰撞能見(jiàn)表1。

表1 目標(biāo)化合物主要質(zhì)譜參數(shù)

4.3.3 數(shù)據(jù)分析 應(yīng)用對(duì)照品同比測(cè)定崇明“苦草”中青蒿素的含量，見(jiàn)表2。

表2 青蒿素含量 (μg/mL)

在上述條件下，3批崇明“苦草”均證明含有青蒿素成分，含量分別為0.066、0.638、0.807 mg/g，與薄層色譜結(jié)果一致，隨著崇明“苦草”貯存時(shí)間延長(zhǎng)，所含的青蒿素成分存在降解的可能。

5 結(jié)果與討論

崇明“苦草”原植物葉片為三回羽狀深裂，頭狀花序球形，直徑1.5～2.5 mm，花果期9-11月，與黃花蒿ArtemisiaannuaLinn特征相同，而與青蒿ArtemisiacarvifoliaBuch.-Ham.ex Roxb.Hort.Beng.特征有差異[12-14]。經(jīng)薄層鑒別和液質(zhì)聯(lián)用定性定量檢測(cè)表明，崇明“苦草”含有黃花蒿ArtemisiaannuaLinn特定成分青蒿素[15]，進(jìn)一步確定崇明“苦草”基源為菊科蒿屬植物黃花蒿ArtemisiaannuaLinn。

崇明“苦草”的栽培民間已有數(shù)百年的歷史，崇明“苦草”得到了島上特有的土質(zhì)氣候條件的孕育滋養(yǎng)，但崇明“苦草”原植物形態(tài)是否會(huì)出現(xiàn)一定變異還有待進(jìn)一步觀察研究。

崇明“苦草”在民間有特定的采收、貯存和食用習(xí)慣[2-4,16]，常作為產(chǎn)婦產(chǎn)后康復(fù)或體弱多病恢復(fù)元?dú)庵?。因此，?yīng)加強(qiáng)對(duì)崇明“苦草”食療功效的開(kāi)發(fā)力度，使崇明世代相傳的“苦草”食療傳統(tǒng)煥發(fā)出新時(shí)代的活力。

崇明“苦草”中青蒿素含量有隨貯存時(shí)間延長(zhǎng)而降解的趨勢(shì)，但崇明民間有苦草陳者良的說(shuō)法，有關(guān)崇明“苦草”中青蒿素及揮發(fā)油含量隨時(shí)間變化的規(guī)律還有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究。

崇明“苦草”有利于產(chǎn)后惡露清除，緩解女性痛經(jīng)，似具有活血化瘀、消炎止痛等功效，突破了中藥青蒿(黃花蒿ArtemisiaannuaLinn干燥地上部分)的傳統(tǒng)功效和主治，還有待藥理、藥化和臨床進(jìn)一步研究驗(yàn)證。