富硒牡蠣粉對(duì)大鼠的免疫功能調(diào)節(jié)機(jī)制的研究

朱俊平 李志鵬

摘要：觀察富硒牡蠣粉的免疫調(diào)節(jié)及抗氧化作用。實(shí)驗(yàn)方法：實(shí)驗(yàn)大鼠60只，隨即分為6組：安靜對(duì)照組（I組）、安靜+給藥組（II組）、運(yùn)動(dòng)對(duì)照組（III組）、低劑量給藥+運(yùn)動(dòng)組（IV組）、中劑量給藥+運(yùn)動(dòng)組（V組）、高劑量給藥+運(yùn)動(dòng)組（VI組）。4個(gè)給藥組分別以劑量為1g/Kg/d、1g/Kg/d、2 g/Kg/d、3 g/Kg/d灌服富鋅牡蠣粉，對(duì)照組灌服等體積的蒸餾水，共6周。I組不運(yùn)動(dòng)，5個(gè)運(yùn)動(dòng)組大鼠進(jìn)行6周遞增負(fù)荷游泳訓(xùn)練，最后進(jìn)行一次性力竭游泳。SPF級(jí)BALB/c小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、富硒牡蠣粉低、中、高劑量組，給藥1次/d，持續(xù)42d;檢測(cè)腦組織SOD活性、MDA及LPO含量，western blotting分析腦組織胞核Nrf2蛋白表達(dá)。結(jié)果：與對(duì)照組比較，富硒牡蠣粉高劑量組大鼠胸腺及脾臟指數(shù)顯著升高，各給藥組淋巴細(xì)胞增殖和巨噬細(xì)胞吞噬功能均顯著提高;富硒牡蠣粉中、高劑量和陽(yáng)性對(duì)照藥能顯著提高模型小鼠腦組織SOD活性、降低MDA和LPO含量、增加Nrf2蛋白表達(dá)，富硒牡蠣粉低劑量能顯著減少小鼠腦組織MDA含量，增加Nrf2蛋白含量。結(jié)論：富硒牡蠣粉對(duì)免疫功能有良好的調(diào)節(jié)作用，同時(shí)可能通過調(diào)節(jié)腦組織Nrf2蛋白表達(dá)及其相關(guān)信號(hào)通路發(fā)揮抗氧化作用。

關(guān)鍵詞：富硒牡蠣粉;免疫力;抗氧化能力;保護(hù)機(jī)制

牡蠣，肉嫩味鮮，牡蠣肉富含?；撬帷被?、糖原等多種活性物質(zhì)[1]，具有解熱抗炎，增強(qiáng)機(jī)體免疫力等功能，常用的滋補(bǔ)類中藥廣泛的應(yīng)用于臨床疾病的治療[1]。李萌經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，牡蠣糖氨聚糖能顯著降低I型單純皰疹病毒感染大鼠的死亡率，延長(zhǎng)其存活時(shí)間，并明顯提高病毒感染大鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬能力，具有增強(qiáng)大鼠免疫功能的作用。。本研究擬通過建立大鼠遞增負(fù)荷游泳模型、一次力竭游泳運(yùn)動(dòng)模型，探討牡蠣提取液對(duì)長(zhǎng)期訓(xùn)練大鼠血漿溶菌酶含量、酸性磷酸酶（ACP）、脾臟指數(shù)（SI）、胸腺指數(shù)（TI）、胸腺組織中黃嘌呤氧化酶（XO）的活性與脾臟組織中髓過氧化物酶（MPO）的活性的影響，旨在為牡蠣作為一種新免疫增強(qiáng)劑運(yùn)用于運(yùn)動(dòng)實(shí)踐提供理論依據(jù)。一些結(jié)果表明，牡蠣提取物非常顯著提高運(yùn)動(dòng)免疫功能抑制組大鼠的溶菌酶含量（P<0.01），降低ACP活性（P<0.01），血漿內(nèi)溶菌酶的含量隨牡蠣提取液的劑量增加而上升，ACP活性隨牡蠣提取液劑量增加而減少。提示牡蠣提取液對(duì)抗大鼠的免疫抑制作用，增強(qiáng)大鼠溶菌酶含量、降低ACP活性，胸腺與脾臟XO、MPO的活性升高，自由基生成過多，造成組織的進(jìn)一步損傷。一些研究成果表明，中藥免疫增強(qiáng)劑可以升高SI、TI，降低XO、MPO的活性。楊棟林[10]的研究表明八角茴香提取液對(duì)運(yùn)動(dòng)抑制組大鼠胸腺指數(shù)無(wú)顯著影響，但明顯增加脾臟的重量。鄧國(guó)良的研究表明，廣棗提取液可明顯增強(qiáng)大鼠缺氧時(shí)間，延長(zhǎng)大鼠負(fù)重游泳時(shí)間，降低大鼠血乳酸水平，增加大鼠SI、TI值。帥學(xué)宏等人的研究表明，山豆根多糖通過改變機(jī)體內(nèi)自由基相關(guān)酶的活性影響體內(nèi)自由基的產(chǎn)生和清除能力，使機(jī)體免疫器官免受過氧化損傷，抵抗地米松導(dǎo)致的免疫抑制，增強(qiáng)大鼠的免疫功能。關(guān)于牡蠣藥理作用研究的文獻(xiàn)熱點(diǎn)。提高免疫功能研究。一些學(xué)者通過溶血空斑試驗(yàn)、大鼠血清抗體凝集效價(jià)、血清白細(xì)胞介素-2（IL-2）活性測(cè)定等實(shí)驗(yàn)研究牡蠣對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠B淋巴細(xì)胞分泌特異性抗體及T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素2的免疫調(diào)節(jié)作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)給予不同劑量牡蠣藥物的各組大鼠，其血清中抗綿羊紅細(xì)胞（SRBC）抗體凝集效價(jià)、脾淋巴細(xì)胞產(chǎn)生（Con A誘生）的IL-2活性明顯高于正常對(duì)照組（P<0.01）。

一材料

1.動(dòng)物清潔雄性Wistar大鼠140只，42d齡，平均體重（197.1±13.8）g，首都醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部提供，在整個(gè)實(shí)驗(yàn)測(cè)試過程中，保持實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對(duì)濕度48%～72%，正常光照。大鼠的實(shí)驗(yàn)喂養(yǎng)按照基本飼料+純凈水模式嚴(yán)格投放食物。

2.實(shí)驗(yàn)室試劑盒均由上海朝瑞生物科技有限公司。

二實(shí)驗(yàn)方法

1.實(shí)驗(yàn)樣品的處理。

2.研究富硒牡蠣多糖對(duì)大鼠免疫力保護(hù)機(jī)制。根據(jù)隨機(jī)原理，將140只大鼠隨機(jī)分為5個(gè)實(shí)驗(yàn)組，分別為正常組，對(duì)照組，低劑量組，藥物干預(yù)組，以及牛大力提取物的高低劑量組，分別標(biāo)號(hào)。

3.實(shí)驗(yàn)測(cè)定。

三結(jié)果與分析

（一）檢測(cè)結(jié)果表明，模型組小鼠胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)均明顯低于對(duì)照組（P<0.01或P<0.05），富硒牡蠣高劑量組小鼠胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)明顯高于模型組（P<0.05）;各組間T細(xì)胞增殖能力無(wú)顯著變化;模型組小鼠B細(xì)胞增殖能力顯著低于對(duì)照組（P<0.05），富硒牡蠣高劑量組B細(xì)胞增殖能力明顯高于模型組（P<0.05）。表明給藥后胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)升高，B細(xì)胞增殖能力增加，體液免疫能力提高。模型組小鼠CD4+T淋巴細(xì)胞明顯較少，CD4+/CD8+值顯著降低（P<0.05）;富硒牡蠣高劑量組CD4+/CD8+值明顯高于模型組（P<0.01），但未達(dá)到正常值。表明給藥后明顯改善了T細(xì)胞亞群的免疫失衡狀態(tài)。

（二）檢測(cè)結(jié)果表明，模型組小鼠先沉于水下，體力明顯弱于對(duì)照組小鼠（P<0.05）;富硒牡蠣高劑量組和低劑量組小鼠體力明顯高于模型組小鼠（P<0.05）;且高劑量組明顯高于低劑量組（P<0.05）。模型組小鼠下丘腦DA含量明顯低于對(duì)照組（P<0.05），5-HT含量明顯高于對(duì)照組（P<0.01），富硒牡蠣高劑量組DA含量較模型組明顯提高（P<0.05），5-HT含量較模型組顯著降低（P<0.01）。模型組小鼠海馬區(qū)NR2AmRNA的表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組（P<0.01），富硒牡蠣高劑量組NR2AmRNA表達(dá)水平明顯高于模型組（P<0.05），表明給藥后抑制了興奮性氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)傳導(dǎo)的異常。

四結(jié)論與討論

富硒牡蠣粉對(duì)免疫功能有良好的調(diào)節(jié)作用，同時(shí)可能通過調(diào)節(jié)腦組織Nrf2蛋白表達(dá)及其相關(guān)信號(hào)通路發(fā)揮抗氧化作用。

五參考文獻(xiàn)

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通訊作者簡(jiǎn)介：李志鵬，方向：運(yùn)動(dòng)人體科學(xué)，體育教育，廣西民族師范學(xué)院，532200

基金：2021廣西高校中青年教師基礎(chǔ)能力提升項(xiàng)目：富鋅牡蠣粉對(duì)運(yùn)動(dòng)大鼠免疫及運(yùn)動(dòng)抗疲勞能力研究（2021KY0425）