“脂肪的檢測(cè)和觀察”實(shí)驗(yàn)改進(jìn)

摘要：本文對(duì)“脂肪的檢測(cè)和觀察”實(shí)驗(yàn)中的實(shí)驗(yàn)材料和染液處理進(jìn)行了改進(jìn)。用花生子葉表皮細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)材料，省去切片的步驟，避免多層細(xì)胞的干擾，大大提高了實(shí)驗(yàn)的成功率。用豬肉組織切片做實(shí)驗(yàn)材料，透光率好，脂肪顆大，染色效果好。蘇丹Ⅲ染液通過(guò)靜置處理，只用上清液進(jìn)行染色，既不影響染色效果，又能去除不溶物對(duì)染色的影響。

關(guān)鍵詞：脂肪 檢測(cè)和觀察 ?實(shí)驗(yàn)改進(jìn) 切片

“脂肪的檢測(cè)和觀察”是人教版高中生物必修1第2章第1節(jié)“檢測(cè)生物組織中的糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)”實(shí)驗(yàn)中的重要部分，是高一學(xué)生理解物質(zhì)鑒定原理，掌握操作高倍顯微鏡的一個(gè)基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)，也是學(xué)生進(jìn)入高中階段生物學(xué)科的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。若此實(shí)驗(yàn)做不成功，在一定程度上會(huì)影響學(xué)生今后學(xué)習(xí)生物的興趣。

1 教材實(shí)驗(yàn)方法及存在問(wèn)題

關(guān)于脂肪的檢測(cè)，人教版舊教材提供了2種方法。方法一：向待測(cè)組織樣液中直接滴加蘇丹Ⅲ，觀察樣液的顏色。方法二：制作花生子葉臨時(shí)切片，用顯微鏡觀察子葉細(xì)胞著色情況。由于方法一的設(shè)計(jì)缺乏嚴(yán)謹(jǐn)性和科學(xué)性，在2019年人教版新教材中已經(jīng)刪掉，只剩方法二。方法二設(shè)計(jì)合理可行，但切片是此實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵，若切片太厚，其透光性差，視野暗，在顯微鏡下無(wú)法觀察到脂肪顆粒。由于花生種子較硬，大多數(shù)學(xué)生沒(méi)有掌握切片技巧，切片不均勻或不夠薄，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗率很高，嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行和學(xué)生做實(shí)驗(yàn)的積極性。

用于檢測(cè)脂肪的蘇丹Ⅲ染液常用的配制方法：取0.1g蘇丹Ⅲ粉末，置于20ml95%酒精中，充分?jǐn)嚢枋蛊淙芙?。在?shí)際使用中發(fā)現(xiàn)蘇丹Ⅲ無(wú)法完全溶解于酒精中，會(huì)有一些粉末渣吸附在脂肪細(xì)胞上，用50%的酒精也無(wú)法洗掉，會(huì)嚴(yán)重干擾脂肪顆粒的觀察效果。

2 改進(jìn)方法及效果

2.1生物材料的改進(jìn)

2.1.1 用花生子葉表皮細(xì)胞代替花生子葉切片

具體操作：將提前1天浸泡過(guò)的花生種子，去掉種皮，子葉掰開(kāi)，用手摳點(diǎn)帶肉的子葉再進(jìn)行撕取，即可得到子葉表皮細(xì)胞，如圖1所示。將得到的表皮細(xì)胞直接放置于載玻片上直接滴加蘇丹Ⅲ染液染色，然后按照教材步驟進(jìn)行后續(xù)操作，在100倍（圖2）物鏡下觀察，與花生子葉切片的100倍圖進(jìn)行對(duì)照（圖3）。由于表皮細(xì)胞是單層細(xì)胞，避免了多層細(xì)胞的干擾，全班同學(xué)都能清晰地觀察到表皮細(xì)胞中的脂肪顆粒被染成橘黃色。此實(shí)驗(yàn)過(guò)程省去了切片的步驟，取樣簡(jiǎn)單，大大提高了實(shí)驗(yàn)的成功率。

2.1.2 用豬肉脂肪組織切片代替花生子葉切片

具體操作：將豬肉脂肪組織放在冰箱的冷凍層過(guò)夜，拿出來(lái)后，馬上切片，很容易切出薄片。薄片放于載玻片上直接滴加蘇丹Ⅲ染液，后續(xù)操作與課本相同，在100倍（圖4）物鏡下觀察，與花生子葉切片對(duì)照（圖3），發(fā)現(xiàn)豬肉脂肪切片透光率比花生切片好，脂肪細(xì)胞和脂肪顆粒都比花生的大，染色效果比花生子葉細(xì)胞好。

2.2 蘇丹Ⅲ染液的改進(jìn)

取0.1g蘇丹Ⅲ粉末置于20ml95%酒精中，充分?jǐn)嚢枞芙猓缓笞屍潇o置分層，沉淀物是沒(méi)溶解的蘇丹Ⅲ粉末渣，倒出上清液備用。分別用蘇丹Ⅲ上清液與原液對(duì)花生表皮細(xì)胞染色，對(duì)比效果（圖2和圖5），發(fā)現(xiàn)上清液染料沒(méi)有粉末渣的影響，觀察效果清晰很多，蘇丹Ⅲ上清液為理想染液。

3 幾點(diǎn)反思

3.1要積極反思課堂中學(xué)生出現(xiàn)的問(wèn)題

作為教學(xué)一線教師，有很多機(jī)會(huì)遇到學(xué)生的各種狀況。比如本實(shí)驗(yàn)中切片的技巧對(duì)于有經(jīng)驗(yàn)的教師來(lái)說(shuō)并不難，因此在學(xué)生上此實(shí)驗(yàn)課之前，筆者都沒(méi)想過(guò)切片會(huì)是個(gè)“問(wèn)題”。但是課堂上看到學(xué)生拿刀片的方式和切片的動(dòng)作，才知道學(xué)生普遍動(dòng)手能力較差，在家可能連切菜的機(jī)會(huì)都很少，因此要他們拿一粒小小的花生切出薄片，反倒成了難題。遇到學(xué)生的這種實(shí)際問(wèn)題，筆者就想利用現(xiàn)有材料花生種子，能否不需要切片，就能觀察到有脂肪顆粒的細(xì)胞呢？鑒于對(duì)花生子葉結(jié)構(gòu)的了解，知道花生子葉是由表皮細(xì)胞和貯藏細(xì)胞構(gòu)成，再聯(lián)想到課本教材中用菠菜葉觀察葉綠體的實(shí)驗(yàn)，取菠菜葉稍帶葉肉下表皮的方法，就是用撕取法。因此筆者嘗試用撕取法取花生子葉的表皮細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)浸泡過(guò)的花生種子很容易撕下表皮細(xì)胞，且在顯微鏡下可觀察到細(xì)胞中含有大量的脂肪顆粒。既完美的利用了教材中的材料，又避免了切片的過(guò)程。

3.2 要勇于大膽嘗試新材料

選用豬肉脂肪組織作為實(shí)驗(yàn)材料，筆者是受必修1第二章第三節(jié)教材內(nèi)容的啟發(fā)，里面有一幅放大2200倍的動(dòng)物脂肪細(xì)胞圖，其脂肪顆粒被蘇丹Ⅲ染色后又大又清晰。就想到用動(dòng)物脂肪組織來(lái)代替花生子葉。由于豬肉脂肪較軟，直接切薄片不現(xiàn)實(shí)，又聯(lián)想到我們平常涮火鍋時(shí)羊肉薄片都是先冷凍再切片，就嘗試把豬肉組織先冷凍再切片，冷凍后的脂肪組織很容易切出薄片，進(jìn)行染色后觀察，發(fā)現(xiàn)豬肉脂肪顆粒比花生脂肪顆粒大，在顯微鏡下觀察效果明顯。

3.3 要敢于質(zhì)疑教材內(nèi)容

教材中用50%的酒精溶液，洗去脂肪細(xì)胞上的浮色。但是在實(shí)際操作中發(fā)現(xiàn)，蘇丹Ⅲ很難完全溶解在酒精中，如果直接使用，會(huì)使一些沒(méi)有溶解的蘇丹Ⅲ吸附在細(xì)胞表面，用50%的酒精根本洗不掉，嚴(yán)重影響了觀察效果。因此筆者將染液靜置后，使上清液和沉淀物分開(kāi)，染色時(shí)只用上清液，既不影響染色效果，又能去除不溶物對(duì)染色的影響。

生物教學(xué)中教材作為教學(xué)的藍(lán)本，但是教師可以根據(jù)自己學(xué)生實(shí)際遇到的情況，對(duì)教材實(shí)驗(yàn)進(jìn)行改進(jìn)和創(chuàng)新，能夠起到優(yōu)化實(shí)驗(yàn)的目的，有助于增強(qiáng)學(xué)生學(xué)習(xí)生物的積極性，提高學(xué)生的參與意識(shí)，培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)探究、創(chuàng)新精神和思維能力。

參考文獻(xiàn)

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3.陳海萍.“檢測(cè)生物組織中的糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)”生物學(xué)教學(xué)[J].2020，41（7）：29-30

作者簡(jiǎn)介：郭慧敏，1978年1月，女，漢，籍貫湖南，碩士研究生，中學(xué)生物教師