UV法測定鹽酸左西替利嗪清潔殘留物的分析方法研究

王麗紅 李敬禹 李彤 于爍爍

【摘要】目的建立UV法測定鹽酸左西替利嗪清潔殘留物的含量。方法為以水為溶劑，采用紫外分光光度法，檢測波長為230nm。結(jié)果方法在1.65～25.05μg/ml范圍內(nèi)回歸曲線為y=0.0339x-0.011（r=0.9996），線性關(guān)系良好，回收率符合要求（回收率為98.5%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.72）。結(jié)論：方法快速可靠、操作簡單、成本低、專屬性強(qiáng)、準(zhǔn)確度和精密度良好。

【關(guān)鍵詞】UV;鹽酸左西替利嗪;清潔殘留物;分析方法

鹽酸左西替利嗪是一種新型的H1受體阻斷劑，用于治療季節(jié)性、常年性過敏性鼻炎、慢性特發(fā)性蕁麻疹等過敏性疾病，是呼吸科、皮膚科處方量最大的藥物之一。

鹽酸左西替利嗪片生產(chǎn)線通常還用于其他產(chǎn)品，為了防止鹽酸左西替利嗪殘留對下一產(chǎn)品的污染，生產(chǎn)結(jié)束后需要對生產(chǎn)設(shè)備進(jìn)行有效清潔并完成清潔驗證，建立殘留物分析方法并對其進(jìn)行方法學(xué)驗證是清潔驗證的重要保障。本研究參考《藥品生產(chǎn)驗證指南》的清潔驗證的特殊要求，通過計算確定本品清潔驗證設(shè)備殘留限度為 0.0025μg/cm2。通過對紫外分光光度法測定本品殘留物的分析方法學(xué)驗證，建立了快速可靠、操作簡單、成本低和專屬性強(qiáng)的測定方法。

1 ?儀器與試藥

1.1 儀器

UV2600紫外分光光度計（島津）;MS105D型電子分析天平（梅特勒托利多）;EDAA-2500T超聲波清洗儀（上海安譜）。

1.2 試藥

鹽酸左西替利嗪對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號100659-201102，含量98.8%）;空白輔料（自制）;水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 檢測方法

2.1.1 擦拭取樣用供試液濃度 本產(chǎn)品最小允許殘留限度為0.0025mg/cm2，取樣面積 S為100cm2，涂布量為0.5ml。故溶液濃度為：（0.0025mg/cm2×100cm2）/0.5ml =0.5mg/ml。鹽酸左西替利嗪在水中易溶（即水中溶解度>100mg/ml），采用水為取樣溶劑可以滿足要求。

2.1.2 最大吸收波長 ?取對照品溶液，照紫外可見分光光度法在200nm～400nm波長下掃圖，結(jié)果表明鹽酸左西替利嗪在230.6nm處有最大吸收，將230nm作為本品的檢測波長。

2.1.3 檢測方法的確定 ?取各試驗項下檢測溶液（溶劑：水），照紫外分光光度法在230nm波長處測定吸光度。

2.2 溶液的配制

2.2.1 對照品貯備液 ?取鹽酸左西替利嗪對照品約20.84mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液;

2.2.2 對照品溶液 ?精密量取對照品貯備液2ml置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。平行配制2份。

2.2.3 供試品溶液 ?取鹽酸左西替利嗪原料藥約20.84mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液;再精密量取2ml置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。平行配制6份。由2名實驗人員分別配制。

2.2.4 空白輔料溶液 ?稱取本品空白輔料約215mg置25ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過;精密量取2ml置50ml量瓶中，加水釋至刻度，搖勻，作為空白輔料溶液。

2.2.5 空白棉簽浸出液 ?取 3 根空白棉簽放入 25mL帶蓋試管中，加入 15 mL 溶劑，蓋好蓋子，將試管超聲 10 min，離心，取上清液作為空白棉簽浸出液。

2.3 專屬性考察

分別取空白輔料和空白棉簽溶液，分別照紫外可見分光光度法在200nm～400nm波長下掃圖，結(jié)果表明溶劑、輔料和棉簽浸出液在230nm波長處無吸收，不干擾本品的測定。

2.4 系統(tǒng)適用性試驗

取對照品溶液照檢測方法測定，結(jié)果兩份對照品溶液響應(yīng)因子[f值（C對/A對）]比值為1.01，在0.98～1.02之間，符合規(guī)定。

2.5 線性與范圍試驗

精密量取貯備液適量，用水稀釋制成限度濃度10%、20%、50%、80%、100%、120%和150%的線性溶液，照檢測方法測定。結(jié)果表明鹽酸左西替利秦在1.65～25.05μg/ml范圍內(nèi)對測得的吸光度用最小二乘法進(jìn)行線性回歸，回歸曲線為y=0.0339x-0.011，回歸系數(shù)r為0.9996，線性關(guān)系良好。

2.6 定量限試驗

精密量取對照品溶液1ml置10ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為定量限溶液，照檢測方法重復(fù)測定6次。結(jié)果表明本品在定量限濃度下連續(xù)6次進(jìn)樣，吸光度的RSD為3.28%，精密度良好。

2.7 精密度試驗

精密量取對照品溶液和供試品溶液，照檢測方法測定。結(jié)果表明重復(fù)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.61%，說明本法重復(fù)性好。12組數(shù)據(jù)的精密度含量為99.9%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.52%，均符合規(guī)定，說明方法精密度高。

2.8 準(zhǔn)確度試驗

取鹽酸左西替利嗪原料藥約16.67mg、20.84mg和25mg，分別置50ml量瓶中，同時分別加入空白輔料約444.5mg，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為貯備液;再精密量取2ml置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，分別作為準(zhǔn)確度的供試品溶液。同法各平行配制3份照檢測方法測定。按外標(biāo)法計算含量考察各組分的回收率。結(jié)果表明3份不同濃度9份樣品的回收率為98.5%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.72，說明本法準(zhǔn)確度高。

2.9 穩(wěn)定性試驗

取對照品溶液和準(zhǔn)確度100%供試品溶液，分別于0h、12h、24h和48h不同時間照檢測方法測定，考察不同時間溶液含量的變化。結(jié)果本品在48h內(nèi)，含量的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.46%，表明本品溶液72h內(nèi)穩(wěn)定。

3 試驗結(jié)果討論

參考化學(xué)藥物方法學(xué)驗證指導(dǎo)原則和藥品生產(chǎn)驗證指南的清潔驗證的基本要求，對鹽酸左西替利嗪清潔殘留物含量測定的檢測方法進(jìn)行了驗證，結(jié)果表明本法專屬性強(qiáng)、線性范圍符合清潔驗證要求、精密度及準(zhǔn)確度高、溶液穩(wěn)定性良好，適用于鹽酸左西替利嗪清潔殘留物的定量分析。

參考文獻(xiàn)

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[2]國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品認(rèn)證管理中心 . 藥品GMP 指南：口服固體制劑 [M]. 北京：中國醫(yī)藥科技出版社