野生動(dòng)物沙門(mén)氏桿菌的檢疫方法

李依然

（東北林業(yè)大學(xué)野生動(dòng)物與自然保護(hù)地學(xué)院，哈爾濱150040）

沙門(mén)氏桿菌病又稱副傷寒，是由沙門(mén)氏桿菌引起的各種野生動(dòng)物、家畜、家禽的多種疾病的總稱。該病對(duì)幼齡動(dòng)物及禽類危害較大，常引起急性敗血癥、胃腸炎及其他局部炎癥。成年動(dòng)物及禽類往往呈散發(fā)或局灶性感染。

1 臨診檢疫

根據(jù)動(dòng)物的種類、年齡、機(jī)體的抵抗力、病原的毒力和數(shù)量等不同可出現(xiàn)多種類型的臨床癥狀，大體上可以分為急性、亞急性和慢性3類。

急性型：多見(jiàn)于仔獸，有的病例未出現(xiàn)任何明顯的臨床癥狀突然死亡，從感染到死亡一般不超過(guò)24 h。對(duì)疾病抵抗力稍強(qiáng)者，3~5 d出現(xiàn)癥狀，通常表現(xiàn)為食欲減退并很快絕食，體溫升高達(dá)41~42℃并持續(xù)。病獸四肢無(wú)力，喜躺臥不愿動(dòng)，偶爾走動(dòng)時(shí)弓背、腳步移動(dòng)緩慢、兩眼流淚。較明顯的臨床癥狀為嚴(yán)重的下痢，有時(shí)嘔吐，嘔吐物含較多黏液。病程稍長(zhǎng)者可出現(xiàn)脫水癥狀，眼窩塌陷，流淚。病程從初期的興奮，很快轉(zhuǎn)為沉郁，最后體溫下降，可達(dá)正常體溫以下，痙攣抽搐，全身衰竭，在昏迷狀態(tài)下死亡。病程一般不超過(guò)2~3 d。急性病例多以死亡告終，偶有幸存者可轉(zhuǎn)為慢性。

亞急性型：潛伏期一般7~14 d，病獸體溫高達(dá)40~41℃，呼吸淺表頻數(shù)，精神沉郁，食欲減少至廢絕。有的病例出現(xiàn)化膿性結(jié)膜炎、眼結(jié)膜潮紅，流眼淚并有膿性分泌物。最主要的癥狀為胃腸機(jī)能高度紊亂、下痢，便出含有大量卡他性黏液的液狀或水樣稀便，個(gè)別病例的稀便中含有血液。有的病例出現(xiàn)嘔吐。下痢和嘔吐嚴(yán)重病獸很快脫水，眼睛下陷無(wú)神，被毛粗糙，蓬亂無(wú)光澤，并污染糞便，尤以后肢和肛門(mén)周圍為重。病獸四肢軟弱無(wú)力，以后肢為重，喜躺臥，運(yùn)動(dòng)障礙，患病后期出現(xiàn)后肢不全麻痹，最后可癱瘓，在嚴(yán)重衰竭下死亡。病程一般為7~14 d。北極狐和銀黑狐患病時(shí)常出現(xiàn)黃疸，特別是感染豬霍亂沙門(mén)氏桿菌時(shí)尤為嚴(yán)重。其他動(dòng)物則沒(méi)有或僅有輕微黃疸出現(xiàn)。水貂和毛絲鼠感染沙門(mén)氏菌時(shí)常發(fā)生敗血癥，導(dǎo)致死亡。

慢性型：慢性病例可由急性或亞急性病例轉(zhuǎn)變而來(lái)，也有的一開(kāi)始就呈慢性經(jīng)過(guò)。癥狀不明顯、不劇烈，患病動(dòng)物主要表現(xiàn)為消化機(jī)能紊亂，食欲不同程度的減弱，下痢，糞便?；煊锌ㄋ责ひ海梢?jiàn)惡臭的茶色或綠褐色稀便。有的病例出現(xiàn)化膿性結(jié)膜炎。患病動(dòng)物精神沉郁、呆滯、進(jìn)行性消瘦、貧血、失水眼窩下凹、運(yùn)動(dòng)減少減慢、多萎縮于圈角或小室內(nèi)。被毛粗糙、蓬亂無(wú)光澤，并被糞便所污染，甚至粘結(jié)成塊，肛門(mén)周圍尤其嚴(yán)重。病獸最后在極度衰竭的情況下死亡。病程多為28 d，有的可達(dá)數(shù)月之久。臨床康復(fù)后可成為帶菌者。在交配與妊娠期感染本病的母獸，出現(xiàn)大批的空懷，空懷率可達(dá)18%左右；受孕后的母獸多在產(chǎn)前5~15 d流產(chǎn)，流產(chǎn)母獸出現(xiàn)輕微不適的癥狀或根本觀察不出異常表現(xiàn)而流產(chǎn)，流產(chǎn)率可達(dá)15%，即使不流產(chǎn)，仔獸生后也發(fā)育不良，多數(shù)在生后10 d內(nèi)死亡。哺乳期發(fā)病的仔獸表現(xiàn)萎靡、衰竭和吸吮乳頭無(wú)力；同窩仔獸散亂趴臥到籠舍的各處，有時(shí)呈游泳式運(yùn)動(dòng)，發(fā)出輕微的呻吟和鳴叫，有的發(fā)生抽搐與昏迷，多數(shù)病仔獸持續(xù)2~7 d后死亡。耐過(guò)者發(fā)育遲緩，恢復(fù)后長(zhǎng)期帶菌。

2 實(shí)驗(yàn)室檢疫

細(xì)菌學(xué)檢查：通常以腹瀉為主的胃腸炎，患病動(dòng)物生前可采直腸糞便或新鮮排糞，尤其帶血和黏液的糞樣；死后取病變腸段內(nèi)容物或腸黏膜及相關(guān)腸系膜淋巴結(jié)；敗血癥患病動(dòng)物應(yīng)采血液及病變臟器組織。未污染的樣品可直接接種在腸道桿菌鑒別或選擇培養(yǎng)基上分離單個(gè)菌落，污染病料應(yīng)先增菌（常用的增菌培養(yǎng)基有：四硫磺酸鈉煌綠培養(yǎng)基、亞硒酸鹽胱氨酸培養(yǎng)基），再在選擇或鑒別培養(yǎng)基上進(jìn)行平板分離。從選擇或鑒別培養(yǎng)基上挑選可疑的菌落作純培養(yǎng)，同時(shí)接種到三糖鐵斜面上培養(yǎng)。

選擇培養(yǎng)基是能抑制革蘭氏陽(yáng)性菌及大腸桿菌的培養(yǎng)基，如SS瓊脂、去氧膽酸鹽瓊脂、亞硫酸鉍瓊脂和HE瓊脂等。鑒別培養(yǎng)基能抑制革蘭氏陽(yáng)性菌生長(zhǎng)，但腸桿菌科的細(xì)菌通常都能生長(zhǎng)，大腸桿菌及其他發(fā)酵乳糖的細(xì)菌生長(zhǎng)出有色菌落，而沙門(mén)氏菌及其他不發(fā)酵乳糖的細(xì)菌，生長(zhǎng)出無(wú)色菌落，常用的這類培養(yǎng)基有麥康凱、遠(yuǎn)藤氏瓊脂和伊紅美藍(lán)瓊脂等。

沙門(mén)氏桿菌在三糖鐵斜面上生長(zhǎng)，可使斜面上部為紅色，而斜面底部為黃色，如該菌能產(chǎn)生H2S，還可使斜面出現(xiàn)黑色。經(jīng)三糖鐵斜面培養(yǎng)后，進(jìn)一步確認(rèn)可能為沙門(mén)氏桿菌后，將被檢菌株繼續(xù)做生化試驗(yàn)，再進(jìn)行抗原測(cè)定。抗原測(cè)定也可與生化試驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行。抗原測(cè)定時(shí)，采用沙門(mén)氏桿菌多價(jià)O血清與被檢菌進(jìn)行玻板凝集試驗(yàn)（應(yīng)注意除Vi抗原的影響）。

血清學(xué)檢查：除平板凝集試驗(yàn)外，還有瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)和熒光抗體試驗(yàn)等。