程序性細(xì)胞壞死與中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究進(jìn)展

李 佳,趙又誼,趙秋影,莫輝明,岳屹立

(1.延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，陜西 延安 716000；2.空軍軍醫(yī)大學(xué)神經(jīng)生物學(xué)教研室，陜西 西安 710032；3.延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室，陜西 延安 716000)

中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病是由于各種因素導(dǎo)致腦與脊髓結(jié)構(gòu)或功能損傷，從而引起的一系列疾病，因神經(jīng)元損傷的不可逆性，探究其損傷機(jī)制也是當(dāng)下研究熱點(diǎn)。一般認(rèn)為細(xì)胞死亡方式有凋亡壞死兩種，然而近來(lái)發(fā)現(xiàn)了一種新的細(xì)胞死亡方式，是由信號(hào)通路介導(dǎo)的細(xì)胞死亡，兼具壞死和凋亡的特點(diǎn)，故稱之為程序性壞死。

1 程序性細(xì)胞壞死(Programmed cell necrosis，PCN)及其機(jī)制

1.1 程序性細(xì)胞壞死 細(xì)胞死亡方式主要分壞死和凋亡兩種。一般認(rèn)為壞死是細(xì)胞受到病理刺激后，不受控制的死亡方式，質(zhì)膜破壞、細(xì)胞器腫脹、細(xì)胞內(nèi)容物滲漏是其典型的形態(tài)學(xué)特征。但凋亡則是為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，受基因嚴(yán)格調(diào)控、自主有序的死亡方式，與細(xì)胞壞死的被動(dòng)性相比，凋亡是主動(dòng)的過(guò)程，受到嚴(yán)格的基因激活、表達(dá)及調(diào)控，在細(xì)胞發(fā)育、維持穩(wěn)態(tài)及發(fā)病機(jī)制中起到重要作用，其顯著特征包括核固縮、裂碎、分解，膜泡化形成凋亡小體。然而最近研究發(fā)現(xiàn)還存在一種活躍的、有多種因子參與的、受到嚴(yán)格調(diào)控的細(xì)胞壞死，稱之為PCN[1]。這種壞死方式的胞漿和胞膜具有典型的壞死樣形態(tài)，研究發(fā)現(xiàn)誘導(dǎo)程序性細(xì)胞壞死的過(guò)程涉及到很多細(xì)胞因子 [如腫瘤壞死因子(TNF)、Fas配體、TNF-α凋亡因子、雙鏈RNA、γ干擾素等]的參與。與細(xì)胞凋亡時(shí)激活Caspase-3相比，程序性壞死的發(fā)生不依賴于Caspase-3的激活，具有其獨(dú)特特征[2]。

程序性細(xì)胞壞死會(huì)引發(fā)很多病理過(guò)程，如心、腎、腦缺血再灌注損傷[3]，以及病原體性或損傷性炎癥疾病等[4]。因此，該壞死通路很可能成為預(yù)防細(xì)胞死亡的潛在靶點(diǎn)。在大鼠[5]、豚鼠[6]離體心臟缺血再灌注模型中用necrostatin-1或necrostatin-5等程序性壞死抑制劑干預(yù)后，發(fā)現(xiàn)均起到了心臟保護(hù)的作用。在很多中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病中，程序性細(xì)胞壞死也起到了至關(guān)重要的作用。Degterev等[7]報(bào)道稱程序性壞死介導(dǎo)24(S)-hydroxycholesterol誘發(fā)的神經(jīng)元死亡。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中necrostatin-1可延遲小鼠腦缺血性損傷[8]。小鼠模型內(nèi)注射necrostatin-1，對(duì)腦出血(ICH)繼發(fā)的神經(jīng)血管損傷也具有保護(hù)作用[9]。上述研究表明程序性壞死在防治中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病中很有可能起到重要作用，因此了解其信號(hào)機(jī)制具有重要臨床意義。

1.2 程序性細(xì)胞壞死的介導(dǎo) 程序性壞死是壞死的一種，啟動(dòng)由其死亡受體及其配基實(shí)現(xiàn)、隨后通過(guò)死亡受體完成介導(dǎo)。Fas、TNF-receptor 1(TNFR1)、TNFR2、TRAIL receptor 1(TRAILR1) 以及TRAILR2等死亡受體不僅是凋亡信號(hào)的起始，也在激活程序性壞死中發(fā)揮重要作用。

TNF-α是最為重要的程序性壞死誘導(dǎo)物之一。TNF-α可以通過(guò)TNFR1胞外部分Cys-rich domain 1區(qū)域組裝的前配體激活TNFR1。激活后形成的三聚體，可以在其胞內(nèi)區(qū)募集到各種蛋白，如與TNFR相關(guān)的死亡結(jié)構(gòu)域(TRADD)，激酶受體相互作用蛋白1(RIP1)，胞內(nèi)凋亡抑制因子1(cIAP1)，cIAP2，TNFR相關(guān)因子2(TRAF2)和TRAF5等，募集后形成復(fù)合體Ⅰ，內(nèi)化后其中的RIP1去泛素化與其他分子結(jié)合形成復(fù)合體Ⅱ，該復(fù)合體構(gòu)成誘發(fā)凋亡或程序性壞死的核心組分。

RIPs是絲/蘇氨酸蛋白激酶家族中的一員，有啟動(dòng)、調(diào)控細(xì)胞應(yīng)激的作用，參與調(diào)控凋亡、壞死或存活。其中不論是凋亡還是程序性細(xì)胞壞死，RIP1均有調(diào)節(jié)作用。cIAP介導(dǎo)的RIP1泛素化可在死亡復(fù)合體形成及活化階段阻礙RIP1發(fā)揮作用，進(jìn)而減少Caspase-8的激活。用Pan-caspase抑制劑阻斷細(xì)胞凋亡時(shí)， Fas配體和TNF-α等死亡信號(hào)可觸發(fā)程序性壞死通路以作為細(xì)胞死亡的替代方式。RIP1激酶變構(gòu)抑制劑(Necrostatin-1)可以改變RIP1激酶結(jié)構(gòu)，對(duì)由死亡受體通路引發(fā)的，依賴于Caspase的程序性壞死有特異性阻止作用，所以在程序性壞死信號(hào)的啟動(dòng)中RIP1活性也是不可或缺的一部分。除RIP1外，RIP3激酶活性也與非Caspase依賴的死亡模式有關(guān)。Christofferson等[10]用基因工程小鼠表達(dá)出失活的RIP3激酶后，動(dòng)物的所有程序性細(xì)胞壞死均被阻斷。以上發(fā)現(xiàn)均提示RIP激酶在程序性細(xì)胞壞死中具有調(diào)節(jié)作用。

RIP1是一個(gè)74 kDa的蛋白，氨基端含有一個(gè)絲/蘇氨酸激酶結(jié)構(gòu)域(KD)，羧基端含有一個(gè)死亡結(jié)構(gòu)域(DD)，N端有與RIP相同類型相互作用基序(RHIM)的中間結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)域可以與RIP3中的RHIM和一個(gè)羧基端DD結(jié)構(gòu)區(qū)結(jié)合。RIP1羥基端結(jié)構(gòu)域可以調(diào)節(jié)RIP1與Fas以及其他DD-containing蛋白的相互作用。RIP1是死亡誘導(dǎo)信號(hào)復(fù)合體(DISC)的關(guān)鍵組成部分，對(duì)細(xì)胞命運(yùn)的決定起到了重要作用。除RIP1外，其同源激酶RIP3也具有觸發(fā)程序性壞死的功能。在小鼠巨細(xì)胞病毒感染的相關(guān)研究中找到了細(xì)胞存在RIP3依賴而與RIP1無(wú)關(guān)的程序性壞死的證據(jù)[11]。RIP1可以被Lys63-去泛素化蛋白酶(CYLD)去泛素化然后同TRADD、FAS-相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)蛋白(FADD)、Caspase-8形成復(fù)合體，即DISC。DISC中Caspase-8的活化是Caspase凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)發(fā)生的源頭，基因修飾或藥物干預(yù)將Caspase-8活性抑制，RIP1-RIP3復(fù)合體會(huì)激活程序性壞死信號(hào)。目前尚不清楚FADD和TRADD是否也是程序性壞死信號(hào)復(fù)合物或壞死小體(Necrosome)組裝所必需的蛋白。

RIP3在壞死的發(fā)生中也發(fā)揮關(guān)鍵作用。研究顯示，RIP3和RIP1通過(guò)RHIM而相互作用促進(jìn)壞死小體裝配完成[12]。RIP1(IQIG)或RIP3(VQVG)的核心殘基RHIM突變會(huì)破壞細(xì)胞壞死小體的形成和程序性壞死，RIP激酶活性和壞死細(xì)胞重組可能以前饋的方式放大信號(hào)?；旌献V系激酶結(jié)構(gòu)域樣假激酶(MLKL)是RIP3依賴性壞死的中介物，RIP3可以在其蘇氨酸357和絲氨酸358殘基上將MLKL磷酸化，這些磷酸化的發(fā)生對(duì)壞死有至關(guān)重要的作用。敲除MLKL后具有抑制壞死的作用。缺乏MLKL的細(xì)胞對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的壞死有抵抗力，也證明了MLKL在TNFα誘導(dǎo)的壞死中發(fā)揮關(guān)鍵作用。在結(jié)構(gòu)上，MLKL擁有激酶結(jié)構(gòu)域，但卻并無(wú)真正激酶的活性。MLKL偽活性位點(diǎn)的突變導(dǎo)致的壞死本質(zhì)是與RIPK3無(wú)關(guān)的，MLKL修飾在RIPK3下游壞死通路也起到重要作用。

同其他E3泛素連接酶一樣，Lys63連接的RIP1會(huì)在cIAP的催化下使聚泛素基團(tuán)增加，然后提供三個(gè)靶點(diǎn)，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β激酶1(TAK1)可在此結(jié)合，TAK1結(jié)合蛋白2(TAB2)，與TAB3構(gòu)成TAK1-TAB2-TAB3復(fù)合體，激活核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)，同時(shí)反式激活如細(xì)胞FLICE類抑制蛋白(c-FLIP)等細(xì)胞保護(hù)基因。若將TAK1敲除則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生程序性壞死傾向。然而，若長(zhǎng)時(shí)間和過(guò)度激活TAK1則會(huì)引發(fā)RIP3磷酸化和活化，甚至無(wú)需TNF刺激也會(huì)導(dǎo)致程序性壞死，但TAK1消融則會(huì)導(dǎo)致Caspase依賴的凋亡發(fā)生。因此，TAK1可能是凋亡和程序性壞死共同的上游調(diào)控因子。

1.3 程序性壞死過(guò)程 溶酶體膜透化(LMP)是TNF-α誘導(dǎo)程序性壞死的早期步驟[13]。溶酶體蛋白酶釋放到在胞漿中可能導(dǎo)致體內(nèi)重要蛋白消化并激活其他酶類，尤其是Caspases相關(guān)蛋白。LMP可被各種不同的刺激物激活，除過(guò)ROS物質(zhì)外，還有清潔功能的親溶酶體混合物、一些內(nèi)細(xì)胞源性死亡蛋白等。大量LMP可導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生無(wú)Caspase激活性死亡，而且在程序性壞死中也確實(shí)發(fā)現(xiàn)有LMP的存在[14]。胞質(zhì)磷脂酶A2(cPLA2)和神經(jīng)酰胺可以在脂質(zhì)過(guò)氧化的上游刺激LMP。在L929型細(xì)胞中使cPLA2過(guò)表達(dá)則抗TNF的程序性死亡會(huì)更敏感。cPLA2缺乏的L929型細(xì)胞在TNF表達(dá)后則不能積累神經(jīng)酰胺，這對(duì)抗TNF誘導(dǎo)的程序性壞死有保護(hù)作用，也為cPLA2在神經(jīng)酰胺生成和程序性壞死中起著基本作用提供了有力支持。

上述的復(fù)合體Ⅱ形成后會(huì)導(dǎo)致RIP3的進(jìn)一步聚集與活化，隨后募集RIP3的底物分子混合系激酶區(qū)域樣蛋白(MLKL)。MLKL羧基端激酶結(jié)構(gòu)域同RIP3結(jié)合，氨基端激酶結(jié)構(gòu)域被磷酸化與多聚化，MLKL 通過(guò)N端插入膜結(jié)構(gòu)，從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜及細(xì)胞器膜上，形成通透性孔道，破壞生物膜完整性，導(dǎo)致大量離子內(nèi)流，細(xì)胞滲透壓過(guò)高腫脹而死。

目前已確定的壞死信號(hào)下游介質(zhì)中，活性氧(ROS)是程序性壞死執(zhí)行中的媒介之一。TNF-α可刺激引導(dǎo)多種細(xì)胞產(chǎn)生ROS。一方面 ，ROS會(huì)阻斷呼吸鏈質(zhì)子傳遞，致使細(xì)胞能量代謝障礙而死亡；另一方面，ROS可引起細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化或改變細(xì)胞器膜某些通道蛋白功能，如溶酶體受到ROS的損傷后，溶酶體膜通透化(LMP)釋放大量溶酶體酶，細(xì)胞因此自我消化而亡。端激酶(JNK)通路信號(hào)，使用叔丁基羥基茴香醚(BHA)等抗氧化劑治療可以減少ROS水平，并在一些細(xì)胞型中有抑制死亡的作用。

在凋亡過(guò)程中，基因翻譯、蛋白酶體介導(dǎo)的蛋白質(zhì)降解等ATP消耗過(guò)程被Caspases迅速關(guān)閉。然而這些過(guò)程在TNF誘導(dǎo)的程序性壞死中卻會(huì)持續(xù)，因此胞內(nèi)ATP的濃度降低。多聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)作為核酶的一種，主要在DNA修復(fù)和轉(zhuǎn)錄調(diào)控中發(fā)揮重要作用，過(guò)度活化會(huì)使ATP耗盡。PARP1參與了纖維肉瘤L929型細(xì)胞TNF途徑的程序性壞死[15]。其中凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)會(huì)在PARP1活化后促進(jìn)下，從線粒體膜間隙向細(xì)胞核發(fā)生易位，核內(nèi)有大量的Caspase無(wú)關(guān)DNA片段。藥物和基因抑制PARP1或阻斷AIF表達(dá)則會(huì)有保護(hù)細(xì)胞免受程序性壞死刺激的作用[16]。腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)移酶(ANT)和親環(huán)素D(CypD)都參加了線粒體通透性轉(zhuǎn)換的過(guò)程，據(jù)此推測(cè)他們也參與了程序性壞死的過(guò)程。CypD消融可通過(guò)抑制ATP消耗而保護(hù)小鼠避免缺血性腎損傷。研究顯示ANT與CypD和電壓依賴的陰離子通道(VDAC)相互作用，形成滲透過(guò)渡孔復(fù)合物(PTPC)[17]。抑制PTPC主要成分形成的藥物和基因有VDAC，ANT和CYPD，他們?cè)隗w內(nèi)外均通過(guò)對(duì)抗損傷發(fā)揮細(xì)胞保護(hù)作用。這些結(jié)果提示線粒體在程序性壞死中也發(fā)揮了重要作用。

1.4 程序性壞死的保護(hù) 目前已研發(fā)出多種程序性壞死抑制物，如RIP1抑制劑、RIP3抑制劑、MLKL抑制劑等。其中RIP1激酶變構(gòu)抑制劑(Necrostatin-1)，可特異性抑制RIP1激酶的活性，阻滯對(duì)RIP3的募集及兩者之間的相互作用。Chen等[18]在MLKL敲除的HT-29細(xì)胞中引入帶HA標(biāo)簽的MLKL，發(fā)現(xiàn)會(huì)有內(nèi)吞MLKL并于溶酶體結(jié)合的現(xiàn)象，使MLKL被降解，從而使得細(xì)胞得以保護(hù)。純化MLKL定位的細(xì)胞膜脂筏結(jié)構(gòu)后可得flotillin-1和flotillin-2，這兩種蛋白都與細(xì)胞內(nèi)吞有關(guān)，提示針對(duì)flotillin-1，flotillin-2可研發(fā)新型的程序性壞死抑制劑。

內(nèi)體分選復(fù)合物(ESCRT)-Ⅲ對(duì)于胞內(nèi)運(yùn)輸而言是必需的，而它維持質(zhì)膜完整性對(duì)程序性細(xì)胞壞死也有一定的拮抗作用，損傷膜修復(fù)當(dāng)中ESCRT-Ⅲ是不可或缺的重要成分，在實(shí)驗(yàn)中誘發(fā)MLKL寡聚化同時(shí)介導(dǎo)程序性壞死， MLKL激活后的定位恰好位于膜損害之處，在此募集ESCRT-Ⅲ成分，隨后將破碎的膜泡主動(dòng)脫落，以此完成保護(hù)程序性細(xì)胞壞死[19]。

1.5 其他激活途徑 程序性壞死的經(jīng)典途徑是激活TNF，然而細(xì)胞表面Toll樣受體(Toll-like receptor 1,TLR)及其相應(yīng)配體，也可以誘發(fā)壞死復(fù)合體合成，導(dǎo)致細(xì)胞程序性壞死。細(xì)胞在應(yīng)激、損傷、感染狀態(tài)下，TLRs會(huì)被病原相關(guān)分子觸發(fā)，若抑制Caspase活性，則脂多糖(LPS)會(huì)激活TLR3或TLR4，隨后TLR的TIR適配域感受IFN-beta(TRIF)收到相應(yīng)信號(hào)，TRIF包含RHIM結(jié)構(gòu)域，可與RIP1、RIP3結(jié)合而誘導(dǎo)壞死，這是一條主要依賴于RIP3激酶的壞死通路。Thapa等[20]在小膠質(zhì)細(xì)胞中也證實(shí)了TLR信號(hào)對(duì)RIP3依賴的程序性壞死有密切聯(lián)系。

鼠胚胎成纖維細(xì)胞中的Caspase-8和FADD缺失后，Ⅰ型、Ⅱ型干擾素均能通過(guò)PKR與RIP1結(jié)合，然后產(chǎn)生RIP1-RIP3壞死復(fù)合體，某些細(xì)胞壞死調(diào)節(jié)可能還涉及到自分泌環(huán)路?？傊?，激活程序性壞死的形式絕不是單一的，但是RIP3激酶的激活，是其共同的關(guān)鍵步驟，含有RHIM結(jié)構(gòu)域蛋白上游信號(hào)將RIP3活化后，使其底物MLKL磷酸化來(lái)傳遞壞死信號(hào)。

2 程序性細(xì)胞壞死與中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病

2.1 創(chuàng)傷性腦損傷(TBI) TBI是全球死亡或者致殘的主要因素。TBI的搶救主要在于減少顱腦二次損傷，目前常用的治療技術(shù)有去骨瓣減壓術(shù)及低溫療法。大量細(xì)胞壞死是TBI致殘及死亡的重要原因之一，其中程序性壞死會(huì)引起嚴(yán)重組織損傷及功能障礙。nerostatin-1有改善小鼠皮層受控后的功能結(jié)構(gòu)的作用。實(shí)驗(yàn)表明哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和Akt信號(hào)通路在TBI后會(huì)被激活[21]。Akt已知是神經(jīng)元細(xì)胞凋亡抑制劑，而mTOR是Akt下游效應(yīng)因子。最近研究有報(bào)道Akt與mTOR聯(lián)合抑制降低海馬體海馬CA3和CA1區(qū)域的神經(jīng)細(xì)胞死亡，進(jìn)而改善小鼠受控皮層影響的功能結(jié)構(gòu)[22]。通過(guò)TNF和zVAD(一種Caspase抑制劑)聯(lián)合誘導(dǎo)海馬神經(jīng)細(xì)胞系HT22程序性壞死時(shí)，細(xì)胞死亡發(fā)生在PIPK1-RIPK3-pAKT組裝完成及Akt和mTOR磷酸化實(shí)現(xiàn)前。Akt和mTOR抑制劑預(yù)處理后阻斷線粒體ROS產(chǎn)生及程序性壞死的發(fā)生，提示Akt/mTOR活化通過(guò)誘導(dǎo)致死性氧化應(yīng)激導(dǎo)致神經(jīng)元程序性壞死。因此抑制程序性壞死有可能為TBI提供一種新的治療策略。

2.2 腦腫瘤 腦腫瘤中膠質(zhì)母細(xì)胞瘤占比很重，其侵襲性和致病性都很高但預(yù)后差，治療效果不佳。其抵抗放療化療治療效果可能是由于存在細(xì)胞凋亡缺陷。Nomura等[23]發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞中紫草素會(huì)誘導(dǎo)依賴RIP1的程序性壞死發(fā)生。而Huang等[24]進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)程序性壞死和凋亡之間有密切聯(lián)系，將紫草素誘導(dǎo)的程序性壞死會(huì)在加入Necrostatin-1抑制劑后轉(zhuǎn)化為凋亡。日本包膜血球凝集病毒(HVJ-E)可誘導(dǎo)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞壞死[25]，細(xì)胞胞漿中Ca2+調(diào)蛋白激酶(CaMK)Ⅱ在Ca2+濃縮時(shí)被激活，將RIP1磷酸并產(chǎn)生ROS。

在以5-氨基乙酰丙酸為基礎(chǔ)的光動(dòng)力治療(5-ALA-PDT)中，將NF-kB抑制后發(fā)現(xiàn)程序性壞死在惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞中也有發(fā)生[26]。研究顯示阿米洛利衍生物5-betaenzylglycinyl-amiloride會(huì)誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤產(chǎn)生程序性細(xì)胞壞死，此過(guò)程不為PARP和H2AX活化所影響[27]。此外發(fā)現(xiàn)AMP活化蛋白激酶(AMPK)抑制劑復(fù)合物C也有誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生程序性細(xì)胞壞死的作用。以上表面程序性壞死可能會(huì)是腦腫瘤潛在的治療靶點(diǎn)。

2.3 腦血管疾病 腦血管疾病最常見(jiàn)的當(dāng)屬中風(fēng)，是一種大腦血供應(yīng)急性障礙疾病，分缺血性和失血性。中風(fēng)通常導(dǎo)致不可逆的神經(jīng)死亡以及隨后的不良預(yù)后。中風(fēng)發(fā)作后腦組織很多生化指標(biāo)顯著異常，提示明顯的細(xì)胞損傷[28]。缺血性腦損傷與細(xì)胞內(nèi)凋亡信號(hào)缺乏導(dǎo)致程序性壞死誘導(dǎo)產(chǎn)生有關(guān)[6]。程序性壞死是腦缺血、再灌注損傷中重要的死亡途徑。單獨(dú)使用程序性壞死抑制劑Necrostatin-1或?qū)⑵渑c凋亡抑制劑(神經(jīng)保護(hù)肽Gly14)humanin聯(lián)合使用發(fā)現(xiàn)對(duì)與氧糖剝奪后誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡具有保護(hù)作用。此外，兩種抑制劑的聯(lián)合治療可以改善腦動(dòng)脈堵塞及再灌注的小鼠的神經(jīng)評(píng)分，減少梗死面積。敲除RIP3，或MLKL可以明顯的減輕腦缺血導(dǎo)致的皮質(zhì)神經(jīng)元死亡[29]。

程序性壞死也參與了腦出血相關(guān)的細(xì)胞死亡[9]。King等[8]在動(dòng)物模型中報(bào)道了程序性壞死抑制劑Necrostatin-1可以限制細(xì)胞死亡，減少血腫體積，改善腦出血后的神經(jīng)行為表現(xiàn)。Chang等[29]報(bào)道稱抑制劑Necrostatin-1也可以抑制凋亡和自噬通路，在腦出血小鼠模型中發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。

2.4 中樞退行性疾病 中樞退行性疾病是一種較為特殊的疾病，其共同特征是結(jié)構(gòu)或功能逐漸衰退，其中含有神經(jīng)系統(tǒng)中的細(xì)胞死亡。一些最常見(jiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病有肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化癥(ALS)、阿爾茨海默癥(AD)、多發(fā)性硬化(MS)等。

ALS特征是上、下運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元逐漸退化,通常在確診后3～5年內(nèi)由于呼吸無(wú)力死于呼吸衰竭。Bertram等[30]將人胚胎干細(xì)胞來(lái)源的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元(hEs-MNs)與從ALS患者死后11 h內(nèi)取得的星形膠質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)以做建模，在此模型中也發(fā)現(xiàn)了ALS中存在運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元程序性壞死的證據(jù)。

AD是一種起病隱匿的進(jìn)行性發(fā)展的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，嚴(yán)重的神經(jīng)元喪失是其主要特征，然而其細(xì)胞死亡機(jī)制尚不明確。Caccamo等[31]對(duì)AD患者尸解發(fā)現(xiàn)了明顯的程序性壞死特點(diǎn)，其程度與Braak分期、腦質(zhì)量、認(rèn)知分?jǐn)?shù)密切相關(guān)。同時(shí)受RIPK1調(diào)控的基因組在多個(gè)獨(dú)立AD轉(zhuǎn)錄組的特征有明顯重疊。抑制AD小鼠模型中的程序性壞死后，神經(jīng)元的損失明顯減少。

MS是一種炎癥性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，腦和脊髓白質(zhì)的局灶性炎性脫髓鞘和軸突變性，是多發(fā)性硬化的主要病理特征，而MS抑制少突膠質(zhì)細(xì)胞死亡及促進(jìn)其再髓鞘化，是MS患者永久性殘疾的重要原因之一。另外，高雪氏病(GD)是一種遺傳性代謝疾病，由于葡萄糖腦苷酶基因(GBA)突變而引起的最常見(jiàn)的溶酶體蓄積障礙疾病，其神經(jīng)元死亡的機(jī)制一直不清，近年的研究發(fā)現(xiàn)RIP激酶直接參與了GD的病理過(guò)程，在 Ripk3-/-GD小鼠模型中小膠質(zhì)細(xì)胞RIP3表達(dá)量與病理發(fā)展程度密切相關(guān)。

程序性壞死是一種可被多種外部刺激所誘發(fā)的另一種細(xì)胞死亡方式，尤其在凋亡信號(hào)被抑制時(shí)廣泛發(fā)生。RIP1-RIP3-MLKL壞死復(fù)合體是程序性壞死發(fā)生的關(guān)鍵。程序性壞死與許多疾病的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。越來(lái)越多的證據(jù)表明抑制程序性壞死通路，可以在腦損傷等多種腦疾病中起到神經(jīng)保護(hù)作用，這提供了一個(gè)很有前景的治療方向，阻斷程序性壞死信號(hào)對(duì)于防治中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病有重要意義。