復(fù)合乳酸菌膠囊對(duì)小兒慢性腹瀉病的療效及對(duì)其腸道微生態(tài)的影響

熊學(xué)敏，邵榮昌，方麗玲，姜勇超，何茹

小兒慢性腹瀉病是兒科較為常見(jiàn)的消化道疾染病，以大便次數(shù)增多、大便性狀改變等主要臨床表現(xiàn)，易導(dǎo)致小兒營(yíng)養(yǎng)不良、生長(zhǎng)發(fā)育障礙等，嚴(yán)重影響小兒健康。據(jù)流行病學(xué)資料統(tǒng)計(jì)顯示，全球?qū)е? 歲以下小兒死亡原因中，腹瀉病占據(jù)第2位（18.00%）。目前臨床上對(duì)于小兒慢性腹瀉病的治療多采用抗生素、腸黏膜保護(hù)劑等藥物，但收效甚微。復(fù)合乳酸菌膠囊一種富含乳酸桿菌、乳酸鏈球菌、嗜乳酸桿菌的新型復(fù)方微生態(tài)制劑，通過(guò)口服可在腸道內(nèi)定植、繁育，提高腸道益生菌含量，調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)失調(diào)，抑制病原菌的滋生、繁殖，在修復(fù)腸道黏膜方面療效顯著。據(jù)報(bào)道，復(fù)合乳酸菌膠囊在小兒慢性腹瀉病中應(yīng)用療效顯著，但是關(guān)于其對(duì)慢性腹瀉病小兒腸道微生態(tài)的影響報(bào)道尚少，鑒于此，本研究特采用分組方法探討此問(wèn)題，以期為臨床治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2018年10月醫(yī)院收治的82例患有慢性腹瀉病的小兒，采用隨機(jī)數(shù)字表法將其分為對(duì)照組與觀察組，每組各41例。其中對(duì)照組男22 例，女19 例，年齡范圍為6 個(gè)月至6歲，年齡（3.14±0.63）歲，病程范圍為2～4個(gè)月，病程（3.58±0.71）個(gè)月，其中，感染后腸炎癥16例，乳糖不耐癥8 例，腸易激綜合征10 例，潰瘍性結(jié)腸炎7 例。觀察組男20例，女21例，年齡范圍6個(gè)月至6歲，年齡（3.11±0.62）歲，病程范圍2～4 個(gè)月，病程（3.56±0.69）個(gè)月，其中，感染后腸炎癥18例，乳糖不耐癥6例，腸易激綜合征9例，潰瘍性結(jié)腸炎8例。兩組的一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)赫爾辛基宣言》。

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合小兒慢性腹瀉病的診斷標(biāo)準(zhǔn)者；年齡為6 個(gè)月至6 歲；發(fā)病后未使用其它抗菌藥物治療者；小兒近親屬知情并簽署知情同意書(shū)；所有小兒每天排便頻率≥4次，大便為水樣或者蛋花樣，無(wú)脫水現(xiàn)象。

排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重營(yíng)養(yǎng)不良者；合并心、肝、腎等功能不全者；存在藥物過(guò)敏史者；存在代謝性疾病或胃腸道畸形等疾病史者；存在嚴(yán)重傳染性疾病者；中途退出研究或者轉(zhuǎn)入其他醫(yī)院者。

1.2 方法

對(duì)照組給予常規(guī)治療：入院后對(duì)小兒口服補(bǔ)液鹽、糾正水電酸堿平衡、抗感染治療、增強(qiáng)免疫、調(diào)節(jié)腸道菌群等常規(guī)治療，并指導(dǎo)小兒近親屬適當(dāng)減少母乳喂養(yǎng)，采用無(wú)乳糖奶粉配合米湯、面糊的方式進(jìn)行喂養(yǎng)；此外，給予蒙脫石散（哈藥集團(tuán)中藥二廠，國(guó)藥準(zhǔn)字H20093375，生產(chǎn)批號(hào)160914）口服治療，3克∕次，3次∕日。

觀察組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上聯(lián)合復(fù)合乳酸菌膠囊（江蘇美通制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H19980184，生產(chǎn)批號(hào)160109）口服治療，年齡≤1 歲的小兒，0.5粒∕次，3次∕日；年齡＞1歲的小兒，1粒∕次，3次∕日。

兩組治療時(shí)間均為7 d。

1.3 觀察指標(biāo)

比較兩組治療后的止瀉時(shí)間、排便頻率。比較兩組小兒慢性腹瀉病的臨床療效。顯效：治療3 d 后，小兒大便次數(shù)、性狀及全身癥狀均恢復(fù)正常；有效：治療3 d后，小兒大便次數(shù)、性狀及全身癥狀均有所改善，但尚未恢復(fù)正常；無(wú)效：治療3 d 后大便次數(shù)、性狀及全身癥狀均無(wú)改善，甚至呈加重趨勢(shì)?？傆行剩剑@效+有效）∕總例數(shù)×100%。比較兩組治療后的腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)及復(fù)雜度。（1）腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)檢測(cè)方法：對(duì)所有小兒取0.2 g 的新鮮大便，檢測(cè)其大便樣本的微生物總DNA，并建立DNA 文庫(kù)，利用DNAMAN 軟件拼接測(cè)序結(jié)果，以獲取其基因框架，并預(yù)測(cè)代表基因的開(kāi)放閱讀框，去除冗余。之后與腸道菌群數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行序列比對(duì)，鑒別出腸道菌群的種類及結(jié)構(gòu)，并計(jì)算物種的豐度。（2）腸道微生態(tài)復(fù)雜度的檢測(cè)方法：利用Ion Torrent PGM 技術(shù)對(duì)腸道菌群16S rRNA V3區(qū)進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增進(jìn)行高通量測(cè)序，對(duì)測(cè)序結(jié)果處理及聚類分析，利用R 軟件繪制豐富度（Chao1）指數(shù)及多樣性（Shannon）指數(shù)箱線圖。

比較兩組不良反應(yīng)發(fā)生情況。

2 結(jié)果

2.1 止瀉時(shí)間、排便頻率

表1 所示，治療后觀察組的止瀉時(shí)間顯著短于對(duì)照組（P＜0.05），排便頻率顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。

表1 小兒慢性腹瀉82例止瀉時(shí)間、治療后排便頻率的比較∕

2.2 臨床療效

表2所示，兩組臨床療效等級(jí)分布差異顯著（P＜0.05），觀察組總有效率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

表2 小兒慢性腹瀉82例臨床療效比較∕例（%）

2.3 腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)及復(fù)雜度

治療后兩組的糞便樣本中共分為厚壁菌門(mén)（Firmicutes）、擬桿菌門(mén)（Bacteroidetes）、變形菌門(mén)（Proteobacteria）、放線菌門(mén)（Actinobacteria）、螺旋菌門(mén)（Spirochactes）和梭桿菌門(mén)（Fusobacteria）6 大門(mén)，其中治療后觀察組糞便樣本依次比例分別為83.04%、2.15%、13.24%、1.10%、0.29%、0.11%，對(duì)照組糞便樣本中的比例依次為76.21%、3.58%、11.69%、3.82%、2.97%、1.73%，治療后觀察組糞便中厚壁菌門(mén)比例顯著高于對(duì)照組。治療后，觀察組腸道中雙歧桿菌屬、乳桿菌屬、腸球菌屬、大腸桿菌屬、嗜堿菌屬、鹽單胞菌屬、節(jié)細(xì)菌屬、梭菌屬、葡萄球菌屬豐度分別為（50.95±9.53）%、（10.31±2.06）%、（10.16±2.03）%、（7.85±1.26）%、（6.73±1.14）%、（5.29±1.02）%、（3.24±0.57）%、（2.91±0.53）%、（2.56±0.42）%，對(duì)照組分別為（13.37±2.56）%、（9.40±1.48）%、（12.59±3.12）%、（41.28±8.25）%、（7.48±1.33）%、（6.03±1.16）%、（3.66±0.62）%、（3.24±0.56）%、（2.95±0.53）%，其中觀察組的雙歧桿菌屬、乳桿菌屬顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），大腸桿菌屬、腸球菌屬顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 小兒慢性腹瀉82例治療后腸道微生態(tài)優(yōu)勢(shì)菌群數(shù)量變化∕（lg拷貝數(shù)∕g濕便，）

觀察組治療后腸道微生態(tài)Chao1指數(shù)、Shannon指數(shù)均高于對(duì)照組（P＜0.05），見(jiàn)表4。

表4 小兒慢性腹瀉82例治療后腸道微生態(tài)Chao1指數(shù)、Shannon指數(shù)∕

2.4 不良反應(yīng)發(fā)生情況

表5所示，兩組治療期間在嘔吐、皮疹、便秘發(fā)生率及總發(fā)生率均差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表5 小兒慢性腹瀉82例不良反應(yīng)發(fā)生情況比較∕例（%）

3 討論

小兒慢性腹瀉病是一種由多病源、多因素綜合作用所導(dǎo)致的慢性消化道疾病，及時(shí)有效的治療至關(guān)重要。目前臨床上針對(duì)小兒慢性腹瀉病尚無(wú)特殊療法。因此，探討復(fù)合乳酸菌膠囊治療小兒慢性腹瀉病的療效及對(duì)其腸道微生態(tài)的影響意義重大。

研究顯示，蒙脫石散可以吸附病毒，減輕病毒對(duì)胃腸道黏膜的損傷，提高胃腸道黏膜對(duì)致病因子的防御能力的作用。本研究在蒙脫石散常規(guī)用藥的基礎(chǔ)上聯(lián)合復(fù)合乳酸菌膠囊可有效改善小兒慢性腹瀉病的臨床癥狀，與黃新宇研究結(jié)果相符。推測(cè)其原因，可能是由于復(fù)合乳酸菌膠囊是一種包含乳酸桿菌、乳酸鏈球菌、嗜乳酸桿菌的活菌制劑，口服后能夠有效抑制機(jī)體致病菌滋生，并保障機(jī)體內(nèi)正常腸道菌群吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，分泌足夠的乳酸，緩解胃腸道內(nèi)的堿性環(huán)境，進(jìn)而有效地抑制病原菌的增殖。此外，復(fù)合乳酸菌膠囊還可以促進(jìn)消化酶的分泌，以增加對(duì)胃腸道的保護(hù)作用。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組的止瀉時(shí)間短于對(duì)照組，治療后排便頻率低于對(duì)照組，兩組的臨床療效等級(jí)分布差異顯著，且觀察組的總有效率優(yōu)于對(duì)照組，說(shuō)明復(fù)合乳酸菌膠囊治療小兒慢性腹瀉病不僅能夠改善臨床癥狀，而且可以提高臨床療效。

本研究發(fā)現(xiàn)，治療后兩組的糞便樣本中門(mén)水平微生物組成基本相似，但是不同的菌門(mén)比例有所差異，治療后觀察組的不同菌屬豐度與對(duì)照組也有明顯差異，觀察組的雙歧桿菌屬、乳桿菌屬優(yōu)于對(duì)照組；此外，治療后觀察組腸道微生態(tài)Chao1 指數(shù)和Shannon 指數(shù)均高于對(duì)照組，提示復(fù)合乳酸菌膠囊治療小兒慢性腹瀉病可以改善腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)及其復(fù)雜度。由于小兒自身免疫能力低下，容易受外界環(huán)境感染，且胃腸道內(nèi)環(huán)境的修復(fù)力弱，一旦病菌侵入，腸道微生態(tài)菌群的結(jié)構(gòu)與復(fù)雜度隨之發(fā)生變化，導(dǎo)致腸道內(nèi)的優(yōu)勢(shì)菌屬減少，有害菌群增加，從而影響腸道功能。復(fù)合乳酸菌膠囊中的乳酸桿菌、乳酸鏈球菌、嗜乳酸桿菌可以吸附在腸道黏膜上，并降低腸道pH 環(huán)境，抑制有害菌滋生繁殖，同時(shí)乳酸桿菌、乳酸鏈球菌、嗜乳酸桿菌還能夠增加小兒腸道免疫力，維持機(jī)體內(nèi)微生態(tài)平衡。總之，利用乳酸菌膠囊治療小兒慢性腹瀉病能夠改善其腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)及其復(fù)雜度。

此外，本研究中兩組不良反應(yīng)發(fā)生率的結(jié)果對(duì)比相近，說(shuō)明復(fù)合乳酸菌膠囊治療小兒慢性腹瀉病的安全性好。綜上所述，復(fù)合乳酸菌膠囊治療小兒慢性腹瀉病可有效縮短小兒止瀉時(shí)間，降低排便頻率，增加療效，改善腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)及復(fù)雜度，且不會(huì)增加不良反應(yīng)發(fā)生率。