車前子在不孕癥中的應(yīng)用及機(jī)制研究進(jìn)展

李鈺玲 劉海燕 賁倩

不孕癥之名首載于《周易》：“婦三歲不孕?！碧旃锓υ?，沖任血海虧虛，則胞宮失養(yǎng)，乃致不孕；女性易憂思惱怒，肝氣不疏，氣血運(yùn)行不暢則不易受孕。中醫(yī)藥治療不孕癥源遠(yuǎn)流長，具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。車前子是臨床常用中藥，藥理作用十分廣泛，在古典醫(yī)籍中運(yùn)用于治療不孕癥早有記載?！睹t(yī)別錄》言：“養(yǎng)肺，強(qiáng)陰，益精，令人有子?！薄侗静萁?jīng)疏》曰：“入五子衍宗丸為生精種子要藥；入金匱腎氣丸則固精益陰?！薄渡褶r(nóng)本草經(jīng)百種錄》載：“凡多子之藥皆屬腎，故古方用入補(bǔ)腎藥中。車前子多子，亦腎精之藥。子藥健脾益氣，補(bǔ)腎藏精，謂之助孕佳品?！狈N子的繁殖特性相似于人類的生殖功能，故有“子藥—精子—生命”與“下丘腦—垂體—性腺軸”功能相似之說?！侗静輦湟费裕骸澳I有二竅，車前子能利水竅而固精竅，精盛則有子。”車前子為利水之品，使水竅常開，小便利而濕熱外泄，同時(shí)配以補(bǔ)腎之品，可使精竅常閉而無泄漏，精固則陰強(qiáng)，精盛則有子?！侗窘?jīng)》謂之“主氣癃、止痛，利水道小便，除濕痹。久服輕身，耐老” ?，F(xiàn)代人多喜嗜辛甘厚味之品，因而很多女性體質(zhì)偏于脾虛痰濕質(zhì)，痰濕為陰邪，易阻滯氣機(jī)，車前子為利水滲濕、化痰降濁藥之物，使水濕得去，則痰濕瘀無容身之處，氣血調(diào)和，沖任充盛，胞宮得養(yǎng)。由此可見，車前子在治療生殖疾病方面發(fā)揮著重要作用。

1 車前子在卵巢儲(chǔ)備功能下降不孕中的應(yīng)用

《傅青主女科》載：“經(jīng)水出諸腎，而本于腎。”中醫(yī)學(xué)認(rèn)為卵巢儲(chǔ)備功能下降以腎虛為本，進(jìn)而累及其他臟腑，常夾雜痰濕、血瘀等病理因素，導(dǎo)致“腎—天癸—沖任—胞宮軸”紊亂。陽松威等[1]研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)腎中藥能夠抑制卵泡閉鎖與消亡，提高卵泡數(shù)量和質(zhì)量，增加卵泡充盈度，緩解卵巢組織病變程度。徐寧[2]以補(bǔ)腎健脾為治則擬四五二合劑，研究結(jié)果證實(shí)中藥周期療法聯(lián)合電針治療卵巢儲(chǔ)備功能下降的臨床療效顯著，可增加竇卵泡的生成，緩解中醫(yī)癥狀。趙紅艷[3]注重補(bǔ)腎疏肝法，車前子入肝、腎二經(jīng)，種子藥亦有加快重陰轉(zhuǎn)陽階段之意，使卵巢儲(chǔ)備功能得以逆轉(zhuǎn), 經(jīng)行正常, 得孕有子。

1.1 車前子多糖具有抗氧化活性

袁從英[4]研究發(fā)現(xiàn)，車前子多糖可以顯著升高小鼠血液谷胱甘肽過氧化物酶活性, 清除體內(nèi)過多的活性氧類物質(zhì)自由基，提高細(xì)胞超氧化物歧化酶的活力、減少脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的生成，說明車前子具有抗氧化、防衰老等作用，可延緩衰老進(jìn)程。胥莉等[5]研究發(fā)現(xiàn)，車前子的總黃酮提取物和總多糖提取物均具有較強(qiáng)的體外抗氧化活性，且能有效抑制6-羥基多巴胺誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞死亡，是有效的天然抗氧化及神經(jīng)保護(hù)物質(zhì)。代國年等[6]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，經(jīng)車前子干預(yù)后，小鼠肝臟超氧化物歧化酶活性和還原型谷光甘肽濃度顯著升高，過氧化氫和丙二醛濃度顯著降低，這表明車前子能夠減輕撲熱息痛誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激作用,提高機(jī)體抗氧化應(yīng)激系統(tǒng)防御功能，防止氧化產(chǎn)物堆積。

1.2 通過雌激素受體α和雌激素受體β介導(dǎo)激活基因轉(zhuǎn)錄

王曉帆[7]研究發(fā)現(xiàn)，車前子水提物通過雌激素受體α和雌激素受體β共同介導(dǎo)激活基因轉(zhuǎn)錄，使性未成熟小鼠子宮系數(shù)明顯增加，亦對(duì)人乳腺癌細(xì)胞具有顯著的促增殖作用，在體內(nèi)、體外均發(fā)揮雌激素樣活性作用。

1.3 調(diào)控生殖腺細(xì)胞凋亡關(guān)鍵基因表達(dá)水平

李靜等[8]選用秀麗線蟲模擬卵巢功能下降模型,實(shí)驗(yàn)表明五子衍宗方可使ced-3mRNA表達(dá)水平下調(diào)，ced-9mRNA表達(dá)水平上調(diào)，提示五子衍宗方通過調(diào)節(jié)線蟲生殖腺細(xì)胞凋亡通路關(guān)鍵基因的表達(dá)水平而抑制生殖腺細(xì)胞的凋亡，從而改善卵巢功能受損秀麗線蟲的生殖能力，發(fā)揮生殖能力保護(hù)作用。

由此可見，車前子具有抗氧化活性、類雌激素樣作用，可以調(diào)控生殖腺細(xì)胞凋亡關(guān)鍵基因表達(dá)水平，對(duì)改善卵泡組織萎縮、緩解卵巢組織病變、改善卵巢儲(chǔ)備功能下降發(fā)揮著重要的作用。

2 車前子在多囊卵巢綜合征不孕中的應(yīng)用

多囊卵巢綜合征(polycystic ovary syndrome，PCOS)以臟腑功能失調(diào)為本，痰濁、瘀血阻滯為標(biāo)，多涉及肝、脾、腎三臟功能異常。毛新等[9]探索PCOS合并痤瘡患者中醫(yī)體質(zhì)分布情況發(fā)現(xiàn)，濕熱質(zhì)在臨床中占一定比例。車前子性寒，其清熱利濕之效對(duì)PCOS痤瘡患者具有良好的效果?！夺t(yī)林纂要》記載：“車前子功用似澤瀉，但彼專去腎之邪水，此則兼去脾之積濕?！避嚽白忧鍩崂麧裥?jié)?，分化痰濕脂膜之濁，有化痰利水之功。研究提示使用益腎健脾通利化痰活血方能明顯改善PCOS患者的月經(jīng)狀況[10]。曹穎[11]探索加減瓜石湯對(duì)改善陰虛胃熱型PCOS患者的療效，方中取車前子甘寒之性，利濕泄熱，導(dǎo)熱下行，使熱邪從水道而去，實(shí)驗(yàn)已得到臨床驗(yàn)證，療效良好。

2.1 抑制α-糖苷酶的活性

PCOS以痤瘡、排卵障礙、月經(jīng)紊亂、不孕等為臨床表現(xiàn)，常伴有不同程度的糖、脂代謝異常。彭慶華等[12]研究表明，車前子降糖活性的主要化學(xué)成分是環(huán)烯醚萜類，其中以京尼平苷酸含量最高。有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，車前子對(duì)鏈脲佐霉素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠模型具有良好的降血糖效果，并且能提升血清中胰島素的含量和修復(fù)胰島β細(xì)胞的損傷[13]。同樣，蘭繼平等[14]發(fā)現(xiàn)車前子活性成分麥角甾苷對(duì)糖尿病模型小鼠具有良好的降糖效果，其作用與修復(fù)損傷的胰島素細(xì)胞、減少炎癥介質(zhì)、增加機(jī)體的抗氧化能力有關(guān)。

2.2 增加膽固醇7a羥化酶的活性,增加膽汁酸的合成

栗艷彬[15]研究發(fā)現(xiàn)，車前子膠能顯著降低實(shí)驗(yàn)組大鼠的血清總膽固醇及低密度脂蛋白膽固醇水平，減輕肝臟的質(zhì)量，降低肝臟系數(shù)，說明車前子膠具有一定的降血脂作用。其機(jī)制可能是車前子改變膽汁酸的組成，使親水性膽汁酸比例增加，從而反饋性抑制膽固醇7a羥化酶的活性，降低血脂。有研究發(fā)現(xiàn)，車前子主要能改善高脂小鼠的血脂、血糖和胰島素水平，對(duì)高脂血癥小鼠的可能作用機(jī)制在于磷脂酶A2活性酶的生物學(xué)效應(yīng)、糖基甘油合成酶和肌醇必需酶1α、脂肪酸代謝和炎癥的基因表達(dá)等[16]。

2.3 車前子多糖發(fā)揮抗氧化作用

劉素標(biāo)[17]通過給高脂血癥大鼠喂養(yǎng)車前子提取物，發(fā)現(xiàn)高脂血癥大鼠的血清總膽固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白膽固醇的水平明顯降低。說明車前子提取物具有降脂效果，其降脂的主要成分是車前子多糖，若倍量則降血脂效果顯著增強(qiáng)。研究還發(fā)現(xiàn)其降脂作用機(jī)制可能與保護(hù)氧化酶活性而發(fā)揮抗氧化的作用相關(guān)。

車前子具有抑制α-糖苷酶的活性、增加膽固醇7a羥化酶的活性、增加膽汁酸的合成、抗氧化活性等不同作用機(jī)制，可達(dá)到降糖、降脂的療效，改善PCOS所致的不孕癥。

3 車前子在輸卵管阻塞性不孕中的應(yīng)用

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為濕、熱、寒諸邪是輸卵管阻塞不孕的主要病因，因其阻滯氣機(jī)、影響氣血運(yùn)行而致瘀阻沖任，胞脈、胞絡(luò)不通是該病病機(jī)根本。導(dǎo)致輸卵管阻塞的因素很多，其中最主要的是盆腔感染，這種感染往往是慢性炎癥，炎癥逐漸破壞了管腔的粘膜，形成瘢痕，引起輸卵管堵塞、管壁僵硬、扭曲、周圍黏連，改變輸卵管與卵巢的關(guān)系，影響輸卵管運(yùn)卵、拾卵等功能。王珍珍[18]擬王氏逐瘀通脈湯，取車前子利水之性，同時(shí)又滋補(bǔ)腎經(jīng)，補(bǔ)瀉兼施，剛?cè)岵?jì)，治療氣滯血瘀型輸卵管阻塞不孕癥較對(duì)照組有明顯優(yōu)勢(shì)。許瑞青[19]用化瘀通絡(luò)種子湯治療輸卵管阻塞性不孕，方中車前子已證實(shí)有廣譜抗菌作用，對(duì)金黃色葡萄球菌及各種桿菌均有抑制作用，該方臨床療效良好。

3.1 車前子多糖抑制炎性因子

現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，車前草不同藥用部位均有較好的抗炎作用[20]。李芬芬等[21]研究表明，車前子精制多糖可顯著抑制炎癥細(xì)胞的吞噬活性，降低炎癥細(xì)胞因子分泌量，具有一定的抗感染作用。趙宏等[22]通過體外實(shí)驗(yàn)研究了車前子多糖-B9對(duì)細(xì)菌脂多糖誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7炎癥模型的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)車前子多糖-B9能抑制脂多糖誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞一氧化氮的分泌，亦證實(shí)車前子具有抗感染的作用。

3.2 車前子水提液抗炎、抗氧化、消除自由基

馮娜[23]用車前子水提純液給小鼠灌胃，發(fā)現(xiàn)對(duì)二甲苯致耳廓腫脹、蛋清致氣囊滑膜炎有明顯的抑制作用，能降低皮膚及腹腔毛細(xì)血管的通透性及紅細(xì)胞膜的通透性。其抗炎機(jī)制可能是通過抑制炎性因子的釋放、抑制脂質(zhì)過氧化和消除自由基的途徑來減輕炎癥反應(yīng)。Kim等[24]研究車前子抗炎作用機(jī)制，發(fā)現(xiàn)車前子水提物對(duì)環(huán)氧合酶-2的半抑制濃度值為8.61 μg/mL，其中桃葉珊瑚苷為車前子水提液中的主要抗炎成分。

車前子可改善免疫狀態(tài)、增加局部吞噬細(xì)胞，利于盆腔粘連組織的消散和吸收，并改善輸卵管結(jié)構(gòu)和促進(jìn)拾卵功能的恢復(fù)，對(duì)治療輸卵管阻塞等炎性不孕發(fā)揮著重要的作用。

4 車前子在子宮內(nèi)膜容受性不孕中的應(yīng)用

中醫(yī)認(rèn)為腎精充足、腎氣旺盛則子宮內(nèi)膜得以生長。反之，若腎氣虛弱、腎精不足則男女之精無以植入胞宮。因此，腎虛是子宮內(nèi)膜容受不良的主要病機(jī)。相關(guān)研究表明，補(bǔ)腎中藥可以增加子宮內(nèi)膜厚度,改善子宮內(nèi)膜形態(tài)，增加子宮血流，進(jìn)而改善子宮內(nèi)膜容受性，提高臨床妊娠率[25]。李兆惠[26]從臨床實(shí)踐中創(chuàng)溫陽化濁方增加妊娠率取得了滿意的效果，方中車前子，清利濕濁，助氣化疏利，陽氣暢通則內(nèi)膜血脈疏通暢達(dá)，以改良內(nèi)膜環(huán)境，提高內(nèi)膜容受性，以助攝納孕胎。何成瑤教授擬婦科調(diào)經(jīng)2號(hào)方，一取車前子性甘寒滑利之性，用通于閉之中，用瀉于補(bǔ)之內(nèi)，利水而不耗氣，水竅開，精竅閉；二取車前子入腎經(jīng)以補(bǔ)腎益精，在改善子宮內(nèi)膜容受性上取得了不錯(cuò)的療效，又可增加子宮內(nèi)膜厚度，提高臨床妊娠率[27]。

4.1 車前子苷緩解平滑肌痙攣

近代藥理研究發(fā)現(xiàn)，車前子含有黃酮類成分，其提取物車前子苷具有緩解子宮平滑肌痙攣?zhàn)饔?，可降低子宮平滑肌的敏感性與興奮性，從而提高子宮內(nèi)膜容受性[28]。

4.2 上調(diào)S100A11蛋白的基因表達(dá)

近年來研究顯示，子宮內(nèi)膜中低水平的S100A11能夠使子宮內(nèi)膜細(xì)胞中一系列和胚胎容受相關(guān)的基因表達(dá)發(fā)生改變，從而無法形成接受狀態(tài)，導(dǎo)致子宮內(nèi)膜與侵入性胚泡間無法同步協(xié)調(diào)作用[29]。S100A11作為子宮內(nèi)膜容受性標(biāo)志性因子之一，五子衍宗丸能夠上調(diào)因促性腺激素釋放激素長方案控制性超促排卵所致下降的S100A11蛋白的基因表達(dá)，從而改善小鼠妊娠率及胚胎著床率[30]。

4.3 增加著床分子的蛋白表達(dá)

白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor，LIF)通過JAK/STATA途徑發(fā)生磷酸化增強(qiáng)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞與纖連蛋白的結(jié)合，促進(jìn)胚泡的早期植入[31]。同源框基因A10(Homeobox A10，HOXA10)可能通過對(duì)孕激素的直接調(diào)控而間接調(diào)控γ氨基丁酸pi受體mRNA的表達(dá)，從而調(diào)控子宮內(nèi)膜容受性[32]。郭孟佳[33]研究發(fā)現(xiàn)，溫陽化濁方增加高齡小鼠子宮著床分子 LIF、HOXA10的蛋白表達(dá)，使子宮免疫狀態(tài)轉(zhuǎn)向利于胚胎著床的方向，提高子宮內(nèi)膜容受性。

車前子可通過車前子苷緩解平滑肌痙攣、上調(diào)S100A11蛋白的基因表達(dá)、增加著床分子LIF、HOXA10的蛋白表達(dá)等機(jī)制改善子宮內(nèi)膜容受性，從而增加受孕幾率。

5 車前子在子宮內(nèi)膜異位癥不孕中的應(yīng)用

“離經(jīng)之血不循其道”，久而成瘀?！皟删嗖隙尚巍保蝠鲎璋麑m、沖任不通，兩精不易結(jié)合，故導(dǎo)致不孕。司雨[34]在治療卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫不孕患者時(shí)，善用以車前子為佐藥的五子四物湯，其中車前子疏利腎氣、通利下竅，使方藥補(bǔ)而不滯，臨床發(fā)現(xiàn)可顯著改善患者瘀血的狀態(tài)，達(dá)到抑制異位子宮內(nèi)膜生長的目的。楊藝[35]自擬除濕破瘀逐血湯，方中加入車前子意在加強(qiáng)利濕之力, 行瘀血之功，復(fù)煎液保留灌腸, 使藥力接近病變部位，使局部瘀血、水腫得以消散，周圍纖維組織逐步溶解，腫物體積逐漸縮小，從而有效改善子宮內(nèi)膜異位癥患者的血流變，為受精卵著床提供條件。

5.1 車前子多糖具有免疫調(diào)節(jié)作用

子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病與免疫因素有關(guān)，可表現(xiàn)為抗體增加及炎癥介質(zhì)的變化。植物中的多糖成分是一種良好的免疫調(diào)節(jié)劑。謝小梅等[36]采用環(huán)磷酰胺造模免疫抑制小鼠，對(duì)精制車前子多糖進(jìn)行免疫活性研究，發(fā)現(xiàn)其可顯著提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬活性，促進(jìn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化、溶血素分泌、脾臟T淋巴細(xì)胞分泌白細(xì)胞介素-2，具有較好的免疫增強(qiáng)作用。陳一晴[37]考察大粒車前子多糖對(duì)巨噬細(xì)胞RAW26.7細(xì)胞增殖及一氧化氮生成的影響，結(jié)果提示大粒車前子多糖可以促進(jìn)一氧化氮的生成，說明大粒車前子多糖是巨噬細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)物質(zhì)。馮娜等[38]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，車前子多糖可顯著增加免疫力低下小鼠的吞噬指數(shù)，具有改善、調(diào)節(jié)及增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的作用。

現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)車前子膠亦可提高小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)程度，使免疫力低下小鼠的溶血素水平升高，且對(duì)體重、脾指數(shù)和胸腺指數(shù)均有增加的作用[39]。故車前子可通過改善血液循環(huán)、發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，緩解子宮內(nèi)膜異位癥以提高妊娠率。

6 總結(jié)

綜上，車前子的中藥功效及化學(xué)成分在治療不同原因的不孕癥中發(fā)揮著多種作用，能明顯增強(qiáng)療效，改善生殖能力，滿足更多女性的生育要求。車前子應(yīng)用于不孕癥的臨床療效確切，值得臨床工作者在進(jìn)一步研究及推廣。目前車前子仍具有很大的發(fā)展?jié)摿?，尤其隨著反復(fù)流產(chǎn)、胚胎停育等疾病發(fā)病率的逐漸上升，車前子的抗病毒、保肝腎等作用在內(nèi)分泌及其他因素所致不良妊娠結(jié)局方面值得進(jìn)行更深入的探索和更廣泛的應(yīng)用。