Sigma-1受體與卵巢儲備功能低下不孕患者退行性變的關(guān)系

李 嫚 羅穗豫

1.鄭州煤炭工業(yè)(集團)有限責任公司總醫(yī)院(新密，452371)；2.河南省人民醫(yī)院

卵巢儲備低下患者卵巢功能障礙，進而引起患者卵巢反應性、女性生殖能力出現(xiàn)下降以及性激素水平出現(xiàn)變化等圍絕經(jīng)期臨床癥狀[1-3]，是導致現(xiàn)代女性不孕的重要病因之一。卵巢儲備能力低下包括生理性及非生理性，生理性卵巢儲備能力低下多表現(xiàn)為患者基礎(chǔ)竇卵泡數(shù)(AFC)減少[4-6]。Sigma-1受體是生物機體內(nèi)中的重要跨膜蛋白之一，被認為是與衰老相關(guān)的蛋白；而卵巢儲備低下作為一種非典型的退行性疾病，目前尚缺乏Sigma-1受體與卵巢儲備功能低下不孕患者退行性變的相關(guān)研究[7-9]。本次研究選取90例體外受精女性的臨床資料進行回顧性分析，探討Sigma-1受體與卵巢儲備功能低下不孕患者退行性變的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月—2018年12月于本院生殖醫(yī)學科收治的90例體外受精女性臨床資料。納入標準：①不孕及卵巢儲備功能低下符合相關(guān)診斷標準[10-11]；②年齡22歲～38歲。排除標準：①存在相關(guān)卵巢手術(shù)史；②存在腫瘤病史或接受放化療史；③染色體異常；④既往接受過相關(guān)非常規(guī)輔助治療。所有患者及家屬知情并簽署知情同意書，本次研究經(jīng)過本院醫(yī)學倫理委員會同意。

1.2 Sigma-1受體檢測

納入對象于月經(jīng)周期第3～4天抽取靜脈血，抗凝，離心取上清-80℃保存待檢；于取卵日收取第一個直徑>16mm卵泡的清卵泡液，30min內(nèi)離心取上清-80℃保存待檢；取卵手術(shù)過程中術(shù)者撿出卵冠丘復合物后用離心管收集所有剩余卵泡液，離心棄上清，清洗后再次棄上清。添加PBS液混勻后重懸細胞，離心后可見卵泡液層、顆粒細胞層、淋巴細胞分離液層以及紅細胞層，采用移液器緩慢抽吸顆粒細胞至新的離心管。通過Western blot法檢測卵巢顆粒細胞中Sigma-1受體水平，血漿及卵泡液中Sigma-1受體水平采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測。

1.3 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 兩組一般臨床資料比較

根據(jù)患者卵巢儲備功能情況分組：卵巢儲備功能低下患者47例(低下組)，體質(zhì)指數(shù)22.8±2.1kg/m2，年齡31.3±3.2歲，不孕5.3±1.1年；卵巢儲備功能正常33例(正常組)，體質(zhì)指數(shù)22.9±2.1kg/m2，年齡30.2±4.2歲，不孕5.3±1.1年。兩組患者體質(zhì)指數(shù)、年齡及不孕年限等比較無差異(P>0.05)。低下組基礎(chǔ)卵泡刺激素(FSH)高于正常組，抗苗勒氏管激素(AMH)、AFC、獲卵數(shù)以及可用胚胎數(shù)均低于正常組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組一般臨床資料比較

2.2 兩組Sigma-1受體蛋白表達水平比較

低下組患者顆粒細胞、血漿及卵泡液中Sigma-1受體蛋白表達水平均低于正常組(P<0.001)。見表2、圖1。

表2 兩組不同組織中Sigma-1受體蛋白表達水平比較

圖1 Western blot檢測顆粒細胞中Sigma-1受體蛋白表達水平

2.3 Sigma-1受體蛋白表達與卵巢儲備標志物相關(guān)性

患者血漿、卵泡液中Sigma-1受體蛋白表達水平均與基礎(chǔ)FSH呈負相關(guān)關(guān)系(P<0.05)，與AMH、AFC、獲卵數(shù)及可用胚胎數(shù)呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。見表3。

表3 不同組織中Sigma-1受體蛋白表達水平與卵巢儲備標志物相關(guān)性分析

3 討論

Sigma-1受體為一種重要跨膜蛋白，在患者神經(jīng)、消化、泌尿、眼科以及生殖等多個器官系統(tǒng)中存在異常表達[12-13]。臨床研究Sigma-1受體蛋白初期，多集中在與神經(jīng)退行性病變間相關(guān)性，認為Sigma-1受體在一定程度上與生物機體衰老有一定相關(guān)性[14-16]。隨著現(xiàn)代醫(yī)療水平發(fā)展，已逐漸證實Sigma-1受體在多種疾病的發(fā)生發(fā)展中起到重要的生物保護作用，且Sigma-1受體配體能通過刺激蛋白功能進而達到調(diào)節(jié)相關(guān)細胞代謝的作用[17-19]。

卵泡液中存在的各類細胞因子、蛋白水平變化與卵母細胞質(zhì)量以及功能具有密切相關(guān)性，且能直接影響卵母細胞的生長、閉鎖以及后續(xù)發(fā)育等潛能，研究卵泡液中的重要蛋白具有較高價值。本次研究中卵巢儲備功能低下患者Sigma-1受體蛋白表達水平均低于卵巢儲備功能正?；颊?，提示Sigma-1受體蛋白參與到卵巢儲備功能調(diào)控中，且考慮Sigma-1受體蛋白表達具有促進增殖、抗凋亡、神經(jīng)保護以及拮抗退行性病變等特點，可認為Sigma-1受體蛋白在生殖系統(tǒng)中存在類似作用機制，在卵巢儲備功能低下的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮一定保護作用。既往研究提示Sigma-1受體存在于機體顆粒細胞、血漿及卵泡液中，卵巢顆粒細胞以及卵泡液構(gòu)成了卵母細胞的微環(huán)境，與生物機體卵巢儲備關(guān)系密切，且內(nèi)部通過細胞間縫隙連接能夠形成一個特殊的網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)，進而實現(xiàn)卵母細胞與顆粒細胞間雙向交流，相互交換代謝產(chǎn)物以及小分子物質(zhì)[20]。FSH為臨床上常用且有效的性激素評估指標，圍絕經(jīng)期女性基礎(chǔ)FSH水平上升提示卵巢儲備功能降低。本研究卵巢儲備功能低下患者血漿及卵泡液中Sigma-1受體蛋白表達水平均與基礎(chǔ)FSH呈負相關(guān)關(guān)系，與AMH、AFC、獲卵數(shù)及可用胚胎數(shù)均呈正相關(guān)關(guān)系。隨著女性年齡增長，卵巢原始卵泡以指數(shù)形式減少，且能與年齡及基礎(chǔ)FSH共同反映女性卵巢儲備功能。

綜上所述，Sigma-1受體可能參與到了卵巢儲備功能的調(diào)節(jié)過程中，低表達水平與卵巢儲備功能低下具有相關(guān)性，可作為臨床潛在檢驗卵巢儲備標志物。但本次研究樣本量較少且為單中心獲取，存在局限性，可加大樣本量并選取多中心進行深入研究其發(fā)生機制。