RDW、血清OPN在肝硬化病程及Child-pugh分級中的應(yīng)用

李韞池 ，史也，孫中磊 ，田蕾

1.錦州醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)院，遼寧 錦州 121000；2.遼陽市中心醫(yī)院消化內(nèi)科，遼寧 遼陽 111000；3.棗莊礦業(yè)集團(tuán)中心醫(yī)院消化內(nèi)科，山東 棗莊 277400

肝硬化(liver cirrhosis，LC)是由各種慢性病因引起肝臟損害、肝細(xì)胞變性壞死導(dǎo)致的[1]。其主要機(jī)制是由于機(jī)體的自我修復(fù)作用，正常肝小葉結(jié)構(gòu)被增生的纖維組織、再生的結(jié)節(jié)狀肝臟細(xì)胞所取代而形成假小葉結(jié)構(gòu)[2]。慢性肝病誘導(dǎo)肝星狀細(xì)胞的活化，加速肝纖維化，這也是細(xì)胞外基質(zhì)的膠原蛋白主要來源[3]。肝星狀細(xì)胞的活化是由多種生長因子、細(xì)胞因子和趨化因子介導(dǎo)的，骨橋蛋白(OPN)就是其中之一[4]。在生理狀態(tài)下OPN 表達(dá)于腎和骨，而在病理情況下，OPN的表達(dá)可以被歸因于炎癥、血管生成、肝纖維化和不同器官的癌變[5]。同時肝臟在造血過程中起著十分重要的作用，是合成、儲存造血必不可少的蛋白質(zhì)、鐵、維生素和凝血因子的工廠，同時也是調(diào)節(jié)機(jī)體凝血與抗凝機(jī)制的重要器官[6]。肝硬化患者由于肝功能下降，肝臟合成造血原料不足，凝血-抗凝平衡被打破，凝血功能、紅細(xì)胞及血小板參數(shù)發(fā)生改變。紅細(xì)胞分布寬度(RDW)是反映紅細(xì)胞(RBC)體積異質(zhì)的一種參數(shù)，與紅細(xì)胞形態(tài)改變關(guān)系密切，在臨床應(yīng)用廣泛，在許多器官甚至系統(tǒng)疾病中都有著重要的評估意義。本研究擬通過分析肝硬化患者OPN、RDW 變化與肝硬化病程及Child-Pugh 肝功能分級的關(guān)系，尋找評估肝硬化患者病情嚴(yán)重程度、降低患者死亡率的方法，為臨床研究提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇遼陽市中心醫(yī)院2017年11月至2019 年7 月診斷為肝硬化的患者87 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①性別不限，年齡在18 周歲及以上；②根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)確診為肝硬化者；③臨床資料完整，住院當(dāng)天皆行血常規(guī)、生化系列、凝血功能等檢測；④因肝硬化初次于我院住院治療的患者；⑤依從性良好，能配合試驗(yàn)及治療患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①肝硬化合并肝癌患者；②合并其他器官嚴(yán)重疾病患者；③血液病患者；④依從性差，不能配合試驗(yàn)者。87 例肝硬化患者中，男性45 例，女性42 例；年齡31～75 歲，平均(58.83±6.59)歲。將同期于我院體檢科健康體檢的87 例健康人群作為對照組，其中男性41 例，女性46 例；年齡35～70 歲，平均(58.91±6.44)歲。兩組受檢者的年齡、性別比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)遼陽市中心醫(yī)院倫理批準(zhǔn)且皆得到入選患者知情同意。

1.2 分組方法 按肝硬化患者貧血程度分為無貧血組42例、輕中度貧血組23例、重度貧血組22例；按肝硬化患者發(fā)病原因分為為肝炎后肝硬化組31例、酒精性肝硬化組27例、其他病因肝硬化組29例；按肝硬化患者病程分為代償期組21 例、失代償期組66 例；按Child-Pugh分級分為A組38例，B組29例，C組20例。

1.3 觀察指標(biāo)與檢測方法 患者入院時血常規(guī)檢測中收集RDW、RBC、血紅蛋白(Hb)、白細(xì)胞(WBC)、血小板(PLT)(采血細(xì)胞分析儀測定)；生化系列檢測中收集谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、血肌酐(Scr)、總膽紅素(TBil)、白蛋白(Alb)(采用全自動生化分析儀測定)；凝血功能檢測中收集凝血時間(PT)、纖維蛋白原(FIB)(全自動凝血分析儀測定)，以及OPN指標(biāo)(采用酶聯(lián)免疫吸附法測定，Abcam公司ab254514)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS24.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。其中計量資料應(yīng)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()來表示，兩樣本間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較則采用單因素方差分析，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性分析。以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肝硬化組與對照組受檢者的主要檢測指標(biāo)比較 肝硬化組患者RDW、OPN、AST、ALT、GGT、TBil、PT、FIB等指標(biāo)均明顯高于對照組，而RBC、Hb、PLT 及Alb 等指標(biāo)則明顯低于對照組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；其余指標(biāo)兩組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，見表1。

2.2 肝硬化患者的RDW、OPN 值與肝功能重要指標(biāo)及凝血指標(biāo)間的相關(guān)性 RDW 值與ALT、AST、TBil、PT和GGT呈正相關(guān)(P＜0.05)，與ALB、FIB呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)，但與 Scr 不相關(guān)(P＜0.05)；OPN 值與 ALT、AST、TBil、PT和GGT呈正相關(guān)(P＜0.05)，與ALB、FIB呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)，而與Scr不相關(guān)(P＞0.05)，見表2。

表1 肝硬化組與對照組受檢者的主要檢測指標(biāo)比較()

表1 肝硬化組與對照組受檢者的主要檢測指標(biāo)比較()

指標(biāo) 肝硬化組(n=87)對照組(n=87)t值P值RDW(%)OPN(ng/mL)RBC(g/L)WBC(×1012/L)Hb(g/L)ALT(U/L)AST(U/L)Scr(μmol/L)Alb(g/L)PLT(×109/L)GGT(U/L)TBil(μmol/L)PT(s)FIB(g/L)15.66±2.02 125.64±31.25 3.47±0.93 10.19±2.35 117.75±18.26 72.85±15.68 75.37±16.33 83.61±19.23 32.47±7.67 104.35±23.95 183.13±19.65 73.97±14.65 16.45±2.67 2.74±0.25 13.71±1.96 26.71±4.85 4.78±1.13 9.65±1.72 136.47±12.26 11.72±2.69 9.87±2.17 79.81±21.64 42.65±11.05 131.57±26.97 36.17±4.25 12.85±3.35 10.83±1.74 2.21±0.36 6.46 29.18 8.21 1.73 7.94 35.84 37.09 1.22 7.052 7.04 68.18 37.93 16.45 11.28＜0.05＜0.05＜0.05＞0.05＜0.05＜0.05＜0.05＞0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05

表2 RDW、OPN值與肝功能重要指標(biāo)及凝血指標(biāo)間的相關(guān)性

2.3 不同貧血程度肝硬化患者的RDW、OPN 比較 重度貧血組患者的RDW、OPN 值明顯高于輕中度貧血組和無貧血組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表3。

2.4 不同病情程度肝硬化患者的RDW 和OPN值比較 肝功能失代償組患者的RDW、OPN 值明顯高于代償組和對照組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表4。

表3 不同貧血程度肝硬化患者的RDW、OPN比較()

表3 不同貧血程度肝硬化患者的RDW、OPN比較()

注：與無貧血組比較，aP＜0.05；與輕中度貧血組比較，bP＜0.05。

組別無貧血組輕中度貧血組重度貧血組F值P值例數(shù)42 23 22 RDW(%)14.65±2.16 15.95±1.85a 17.64±2.52ab 13.69＜0.01 OPN(ng/mL)82.75±22.64 113.57±32.56a 141.56±36.27ab 30.25＜0.01

表4 不同病情程度肝硬化患者的RDW和OPN比較()

表4 不同病情程度肝硬化患者的RDW和OPN比較()

注：與對照組比較，aP＜0.05；與代償組比較，bP＜0.05。

組別 例數(shù)RDW(%)OPN(ng/mL)對照組代償組失代償組F值P值87 21 66 13.71±1.96 14.75±2.13a 16.11±2.25ab 24.64＜0.01 26.71±4.85 97.53±28.64a 133.65±31.57ab 452.6＜0.01

2.5 不同病因肝硬化患者的RDW和OPN比較 酒精肝硬化組、肝炎肝硬化組和其他病因肝硬化組患者的RDW、OPN 值比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，見表5。

表5 不同病因肝硬化患者的RDW和OPN值比較()

表5 不同病因肝硬化患者的RDW和OPN值比較()

組別 例數(shù)RDW(%)OPN(ng/mL)酒精肝硬化組肝炎肝硬化組其他病因肝硬化組F值P值27 31 29 15.53±2.23 16.15±2.34 15.43±2.46 0.829 6 0.439 8 125.97±30.26 128.46±33.57 122.85±29.65 0.241 3 0.786 1

2.6 不同Child-Pugh分級肝硬化患者的RDW和OPN 比較 按照Child-Pugh 分級評分表分組，A 級、B級和C級三組RDW、OPN值均明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；C 級RDW、OPN 值明顯高于B級、A級，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表6。

表6 不同Child-Pugh分級肝硬化患者的RDW和OPN比較()

表6 不同Child-Pugh分級肝硬化患者的RDW和OPN比較()

注：與對照組比較，aP＜0.05；與A組比較，bP＜0.05;與B組比較，cP＜0.05。

組別 例數(shù)RDW(%)OPN(ng/mL)對照組A組B組C組F值P值87 38 29 28 13.71±1.96 14.31±2.10a 15.95±1.24a,b 17.12±1.85a,c 24.64＜0.01 26.71±4.85 92.15±28.27a 140.04±31.37a,b 170.65±36.41a,c 452.6＜0.01

3 討論

引起肝硬化的主要原因有慢性肝炎、酒精性肝硬化、藥物性肝損害、自身免疫及膽汁淤積性肝炎等，其機(jī)制主要是大量肝細(xì)胞變性壞死、廣泛肝纖維化、肝假小葉及再生結(jié)節(jié)形成[7-8]。RDW升高常通常表明機(jī)體內(nèi)存在炎癥反應(yīng)和/或伴鐵代謝異常[9]，而有研究證實(shí)RDW與肝纖維化程度密切相關(guān)[10]，然而肝硬化患者的RDW值升高的具體原因仍不明確。自從首次發(fā)現(xiàn)OPN蛋白在肝臟中的表達(dá)增加，越來越多的證據(jù)證實(shí)了OPN在慢性肝病、纖維化和肝硬化進(jìn)展中的病理作用[11-12]。OPN是細(xì)胞外基質(zhì)蛋白網(wǎng)絡(luò)中的重要細(xì)胞因子，有助于肝纖維化發(fā)生[4]。在過表達(dá)OPN 轉(zhuǎn)基因小鼠模型實(shí)驗(yàn)中證實(shí)即使沒有促纖維化因子的作用，小鼠仍發(fā)生肝纖維化[13]。盡管研究表明OPN 在肝纖維化發(fā)生中可能發(fā)揮的作用，但OPN在促進(jìn)肝纖維化中的詳細(xì)機(jī)制仍不完全清楚。

本研究結(jié)果顯示，肝硬化患者RDW、OPN、ALT、AST、TBil、GGT指標(biāo)較對照組明顯升高，而RBC、Hb、PLT 及Alb 較對照組明顯降低，這也與先前的研究結(jié)論相吻合，也符合肝硬化患者的病情變化特點(diǎn)[9，13-19]。同時，肝硬化患者 RDW、OPN 與 ALT、AST、GGT、TBil、PT呈正相關(guān)，與Alb呈負(fù)相關(guān)，隨著肝功能下降，RDW、OPN 值不斷增加，證實(shí)了RDW、OPN 值與肝功能變化密切相關(guān)，可用于評價肝功能的惡化程度；肝硬化失代償期組RDW、OPN值明顯高于代償期組，證實(shí)RDW、OPN 值與肝硬化嚴(yán)重程度有關(guān)。而不同病因的肝炎后肝硬化組、酒精性肝硬化組和其他病因肝硬化組見RDW、OPN值沒有差異，因此RDW、OPN值不能用于區(qū)分肝硬化病因。但是，RDW、OPN 值與Child-pugh 分級密切相關(guān)，隨著Child-pugh 評分的升高，RDW值也明顯增大，且在A、B、C三組組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義，可作為Child-pugh分級參考指標(biāo)。

有研究表明，肝硬化患者因門脈高壓導(dǎo)致消化吸收功能減退而造成的葉酸、鐵元素及維生素B12的缺乏，引起RDW 升高[20]。機(jī)體氧化與抗氧化作用失衡，紅細(xì)胞因氧化應(yīng)激壽命縮短，導(dǎo)致部分未成熟紅細(xì)胞入血，炎癥因子抑制紅細(xì)胞成熟，促進(jìn)未成熟的網(wǎng)織紅細(xì)胞入血，血漿脂蛋白代謝異常，使紅細(xì)胞膜形態(tài)改變，紅細(xì)胞失去正常結(jié)構(gòu)更容易被破壞，多因素共同作用引起RDW 升高[21-23]。OPN 被認(rèn)為是調(diào)節(jié)成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化生長因子-1，性別決定區(qū)Y-box 9在活化的造血干細(xì)胞上可以促進(jìn)OPN 的產(chǎn)生，OPN 刺激HSCs細(xì)胞內(nèi)HMGB1 的乙酰化，導(dǎo)致膠原的上調(diào)促進(jìn)肝臟纖維化[24-25]。有研究表明OPN 的作用與OPN 的代謝有關(guān)，通過凝血酶切割OPN暴露額外的整合素結(jié)合基序，OPN裂解水平與肝纖維化程度呈正相關(guān)[26]。還有研究表明OPN與Hedgehog通路的活性以及纖維化程度相關(guān)，在肝硬化患者中明顯上調(diào)[27-28]。

肝硬化根據(jù)病程可分為代償期與失代償期[29]，代償期肝硬化患者臨床上常無癥狀或僅有輕微癥狀卻無特異性，其肝功能可能在正常范圍或僅有輕度減低，隨著病情進(jìn)一步惡化，進(jìn)入肝功能失代償期，引起不同程度的脾大脾亢、腹腔積液、消化道出血、肝性腦病及營養(yǎng)不良等，患者生活質(zhì)量明顯下降。因此，RDW、OPN 值對早期評估肝硬化患者肝功能狀態(tài)進(jìn)行臨床干預(yù)，延緩肝功能衰退改善患者生活狀態(tài)至關(guān)重要。肝硬化的病因繁多，在我國肝炎肝硬化占比最大，占總患患者數(shù)的半數(shù)以上[30-32]。由于生活水平的改善，酒精性相關(guān)因素導(dǎo)致的肝硬化比例也逐年增加，僅次于肝炎肝硬化[14]。自身免疫性肝硬化常見于歐美國家[33]，近年來我國患患者數(shù)亦呈上升趨勢，其病因可能與遺傳易感性及免疫缺陷相關(guān)，該類型肝硬化女性較男性發(fā)病率高[34]，與酒精性肝硬化相反[35]。肝硬化發(fā)病主要與上訴病因密切相關(guān)，然而RDW、OPN 值不能用于區(qū)分肝硬化病因。Child-pugh 評分標(biāo)準(zhǔn)廣泛應(yīng)用于臨床，用于分析肝硬化患者的肝功能損害程度，評價肝臟儲備功能及預(yù)測預(yù)后[36]。RDW、OPN 作為現(xiàn)階段研究熱點(diǎn)，其與Child-pugh 評分之間的關(guān)系一直備受關(guān)注，本研究證明了RDW、OPN值與Child-pugh 分級呈正相關(guān)，可作為Child-pugh 分級參考指標(biāo)。

綜上所述，RDW、OPN 值在肝硬化患者中明顯升高，雖然無法用于診斷肝硬化病因，但是對肝硬化患者貧血程度的鑒別和肝硬化病程的判斷有著重要意義。遺憾的是本研究樣本量不足，沒有得出評估肝硬化的RDW、OPN 參考值，課題組將在以后逐漸完善。總之，RDW、OPN 值對推斷肝硬化患者病情嚴(yán)重程度、Child-pugh分級有著重要價值，為肝硬化患者的臨床診療提供了幫助。