杜鵑紅山茶與山茶種間雜交技術(shù)研究

林劍波，張俊麗*，劉和平

（陽江職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣東陽江 529500）

杜鵑紅山茶（Camellia azalea Wei）又名張氏紅山茶（Camellia changii Ye）、四季紅山茶、假大頭茶等，是珍稀瀕危的山茶屬原種植物。目前野生的杜鵑紅山茶僅在廣東省陽春市鵝凰嶂省級自然保護(hù)區(qū)白木河河岸兩側(cè)狹長地帶發(fā)現(xiàn)零星分布，且數(shù)量極其稀少[1-5]。杜鵑紅山茶具有抗逆性強(qiáng)、花大色艷、花期長，是非常珍貴的茶花種質(zhì)資源，得到了國際山茶學(xué)會(huì)和世界園林界的高度重視，特別是四季開花的特性尤為珍貴，可以用來培育四季開花尤其夏秋季開花的茶花新品種，具有良好的市場前景和潛在的開發(fā)空間。子房敗育率高和自然結(jié)實(shí)率低是杜鵑紅山茶出現(xiàn)瀕危的2 個(gè)主要內(nèi)因。從發(fā)現(xiàn)杜鵑紅山茶以來，原產(chǎn)地也在杜鵑紅山茶的遷移性保護(hù)、嫁接擴(kuò)繁、栽培技術(shù)研究等方面做了大量的工作，但在基礎(chǔ)研究及育種探索等方面相對滯后，杜鵑紅山茶在本地知名度不高[6-9]。本課題組從2009 年開始開展杜鵑紅山茶雜交工作，選育出一批優(yōu)于雙親的雜交品種，在原產(chǎn)地為杜鵑紅山茶的育種帶來突破。本研究闡述了杜鵑紅山茶雜交育種研究工作及主要技術(shù)要點(diǎn)，以供相關(guān)研究參考。

1 育種目標(biāo)與方法

杜鵑紅山茶具有四季開花、花色鮮艷且抗逆性強(qiáng)等特點(diǎn)，但存在單瓣、無香味、顏色單一等不足，故本研究的育種目標(biāo)主要有：一是利用杜鵑紅山茶花期長的特性，培育四季開花特別是夏秋季開花的茶花新品種；二是培育重瓣、花大、有香味及多種顏色的杜鵑紅山茶新品種。據(jù)相關(guān)研究表明，新品種培育的主要方法有品種選育、誘變育種及有性雜交等，結(jié)合實(shí)際，本研究主要選擇有性雜交方法培育新品種。

2 親本選擇與培育

本研究雜交親本選擇主要遵循以下原則：一是雜交親本必須符合育種目標(biāo)，即雜交組合親本應(yīng)該含有育種目標(biāo)想要得到的性狀；二是為提高雜交成功率，親本之間的親緣關(guān)系應(yīng)該盡可能接近；三是父母本生長健壯，病蟲害少，花朵健康；四是父本花朵雄蕊、花藥等發(fā)育良好，能提供較多且活力較強(qiáng)的花粉，母本應(yīng)具有較好的坐果能力。故首先排除完全重瓣茶花品種，挑選具有較高坐果率并符合育種目標(biāo)的單瓣和半重瓣品種作為雜交親本。結(jié)合育種目標(biāo)與實(shí)際，本研究選擇生長健壯、無病蟲害的杜鵑紅山茶為母本，同時(shí)選擇紅芙蓉、紅露珍、花露珍、娃麗娜深、大元帥、香妃茶、迪朱麗亞、瑪莉費(fèi)絲、凱夫人、超級南天武士、綠帶、白邊粉丹、湖南紅茶、白花油茶、香水茶花等品種茶花為父本。母本及部分父本種植于陽江職業(yè)技術(shù)學(xué)院內(nèi)由中央財(cái)政支持的園林技術(shù)職業(yè)教育實(shí)訓(xùn)基地。親本管理良好，植株生長健壯，父本花粉質(zhì)量高。

3 花粉采集與保存

杜鵑紅山茶雖然具有長期開花特別是夏秋開花的特性，但是其花期剛好與大部分品種茶花花期錯(cuò)開，與其它品種茶花花期不育是杜鵑紅山茶種間雜交工作的難題之一，具有活力的、高質(zhì)量的花粉是杜鵑紅山茶中間雜交成功的保證，故開展茶花花粉采集與保存方法的研究是關(guān)鍵。

本研究采用花藥干燥法。采集花粉時(shí)，選擇欲開而未開放的花朵比較適宜，因?yàn)榇藭r(shí)雄蕊和花藥已經(jīng)成熟，但花藥還未裂開，花粉未噴出。花粉保存的基本要求是干燥和合適的溫度，據(jù)報(bào)道，花粉在-10℃甚至低于-60℃的溫度下保存，也可以長期保持較高的萌發(fā)率。杜鵑紅山茶花粉在4℃和-20℃下都能保存，4℃具有實(shí)踐意義，-20℃冷凍保存或液氮保存是杜鵑紅山茶花粉的長期保存方式[10-12]。據(jù)本課題組研究，茶花花粉保存在4℃左右的干燥環(huán)境，花粉活力可達(dá)0.5～1年。

本研究選擇在晴天上午采集花粉，挑選合適花蕾，小心剪掉約1/2 的花瓣，露出雄蕊與花藥，用鑷子小心的取下花藥放入培養(yǎng)皿，貼上標(biāo)簽待用。將培養(yǎng)皿置于干燥環(huán)境待花藥開裂后，用40 目網(wǎng)篩過篩，用試管收集放入4℃干燥環(huán)境備用。

4 授粉操作與管理

相關(guān)研究表明，杜鵑紅山茶雌雄蕊結(jié)構(gòu)決定了杜鵑紅山茶為兼性異交型。雌蕊異型，花柱2～4 裂，花柱長于或等于雄蕊，（花內(nèi)）雄蕊分化在花內(nèi)造成了多個(gè)不同的花藥位置。杜鵑紅山茶最佳授粉期分別為1～2月、11～12 月[13]。在杜鵑紅山茶開花季節(jié)，晴天9:00～15:00，柱頭活力較強(qiáng)時(shí)授粉成功率較高[14]。為進(jìn)一步提高杜鵑紅山茶授粉成功率，本研究選擇生長健壯樹體茂盛枝條上的花朵進(jìn)行授粉。

4.1 人工去雄

為保證授粉花朵的營養(yǎng)，選定需授粉花蕾后，抹除該花蕾周邊其他花朵及花芽。從萼片處開始，用剪刀小心剪掉約1/2 的花瓣，露出雄蕊，清除花藥，并露出雌蕊和柱頭。

4.2 授粉

授粉前，必須檢測儲藏的各品種茶花的花粉活力，避免浪費(fèi)人力。用小毛筆筆尖蘸上儲藏的茶花花粉，一只手輕輕穩(wěn)住杜鵑紅山茶枝條和花朵，一只手拿毛筆輕輕地將花粉涂抹到裸露的柱頭上，直到肉眼可見柱頭粘住花粉為止。做完一組授粉工作后，及時(shí)換上干凈的工具開展另一組授粉工作，以防干擾及污染。

4.3 套袋

為避免蟲媒和風(fēng)媒等對已授粉柱頭的干擾或污染，必須及時(shí)用牛皮紙袋套住已授粉花朵及下面部分枝條與葉片，并用回形針夾住袋口，以防紙袋脫落。

4.4 掛牌

每做完一組雜交，要及時(shí)掛牌。用鉛筆在標(biāo)簽上準(zhǔn)確標(biāo)注雜交編號、雜交組合、雜交日期及授粉人等信息，然后將標(biāo)簽套在授粉花朵基部。

4.5 檢查與管理

授粉后，要經(jīng)常檢查袋子、標(biāo)簽是否脫落。做好施肥澆水病蟲害防治等日常管理工作。授粉3～4 周后，解開袋子，查看授粉效果，及時(shí)清除授粉不成功與脫落的殘花。用網(wǎng)袋套上授粉成功花朵，系緊綁扎帶，防止果實(shí)成熟后掉落。

5 果實(shí)處理與播種

雜交授粉3～4 個(gè)月后果實(shí)基本成熟，應(yīng)及時(shí)采收、處理。采收的果實(shí)將種子去殼，用殺菌劑處理后可以直接播種，也可以放入干凈的濕河沙中存放2 周左右，待種子后熟后用容器或者苗床播種。播種期間，保持容器或者苗床有一定的濕潤度，但不要積水。

6 苗期管理與開花

杜鵑紅山茶種間雜交種子播種3 個(gè)月后，種子開始萌發(fā)。雜交種子的萌發(fā)時(shí)間不一致，播種后至1 年內(nèi)都有種子陸續(xù)萌芽。萌芽期間，加強(qiáng)噴水保濕、病蟲害防治等日常護(hù)理，待小苗長至10cm 左右，及時(shí)移栽或者換盆。苗期需要保濕，夏天降溫，施肥以液體肥為主，薄肥勤施。繼續(xù)加強(qiáng)病蟲害防治工作，噴藥時(shí)添加葉面肥，為小苗提供足夠營養(yǎng)。杜鵑紅山茶雜交種子播種3～5 年之后，實(shí)生苗將陸續(xù)開花。開花期間，繼續(xù)加強(qiáng)病蟲害防治，苗期蟲害以紅蜘蛛為主，也有少量的食葉害蟲。病害較少。夏天溫度過高時(shí)，要搭遮陽網(wǎng)降溫，同時(shí)需經(jīng)常淋水、施肥和噴施葉面肥，提供充足的水肥。

7 結(jié)論與展望

據(jù)報(bào)道，杜鵑紅山茶與山茶屬各組雜交親和性依次為：紅山茶組、原始山茶組、瘤果茶組、糙果茶組、金花茶組。前人選用山茶屬紅山茶組、糙果茶組、原始山茶組、金花茶組、瘤果茶組、短柱茶組、油茶組、連蕊茶組和長柄茶組部分原種，烈香、大莊香園、臘葉、大菲麗絲、紫蘇達(dá)、黑騎士等多個(gè)名貴栽培品種和杜鵑紅山茶作為親本進(jìn)行正、反交雜交，均能得到雜交種子，但坐果率都比較低，分別低至5.13%和5.92%[12-15]。

本研究發(fā)現(xiàn)，以杜鵑紅山茶為母本，紅露珍、花露珍、紅芙蓉、迪朱麗亞、尼麗夫人、白邊粉丹、綠帶、娃麗娜深、瑪莉費(fèi)絲、香妃茶等與杜鵑紅山茶雜交親和性較好，課題組成功獲得一批雜交后代，雜交后代基本融合親本的優(yōu)良性狀，表現(xiàn)出花期長、半重瓣甚至完全重瓣等，是原產(chǎn)地在杜鵑紅山茶育種研究工作的一大突破。后期將進(jìn)一步開展杜鵑紅山茶的基礎(chǔ)研究，繼續(xù)加強(qiáng)雜交、回交與誘變等育種工作，抓緊推進(jìn)新品種鑒定與登錄、擴(kuò)繁與推廣等，以期取得更大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。