P16 在尖銳濕疣組織中的表達(dá)及意義

范婉婷，饒 蘭，馬 虎

（1.湖北省荊門市第一人民醫(yī)院病理科，湖北 荊門 448000；2.湖北省荊門市第一人民醫(yī)院皮膚性病科，湖北 荊門 448000）

尖銳濕疣（Condyloma Acuminatum，CA）是由人乳頭狀瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）感染所致的一種常見(jiàn)的性傳播疾病，具有增生快，治療后易復(fù)發(fā)的特點(diǎn)。目前，P16作為替代指標(biāo)已被廣泛應(yīng)用于HPV 相關(guān)疾病的診斷和鑒別，而其在尖銳濕疣中的應(yīng)用尚待研究。本研究探討P16在尖銳濕疣皮損中的表達(dá)情況，研究其在尖銳濕疣發(fā)生發(fā)展中的作用，為診斷、鑒別診斷提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集我院病理科2017 年9 月～2018 年12 月女性外陰尖銳濕疣活檢標(biāo)本75 例，年齡（19 ～60）歲，平均45.5 歲；另取30 例成年男性正常包皮組織作為對(duì)照組。組織均由10%中性福爾馬林固定，免疫組化采用SP 法，P16鼠抗人單克隆抗體購(gòu)自邁新公司，免疫顯色試劑盒購(gòu)自Dako 公司，操作步驟按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。用PBS 代替一抗作陰性對(duì)照，用已知陽(yáng)性片作陽(yáng)性對(duì)照。

1.2 免疫組化結(jié)果判斷 由兩位高年資病理醫(yī)師在雙盲條件下獨(dú)立評(píng)定。P16表達(dá)于鱗狀上皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，陽(yáng)性表達(dá)呈棕黃色。免疫染色分為陰性、局灶斑片狀弱陽(yáng)性、彌漫性強(qiáng)陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 24.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料以（）表示，采用t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以n、%表示，采用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)P ＜0.05 時(shí)表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

P16在尖銳濕疣中陽(yáng)性表達(dá)率為62.67%（47/75），在正常皮膚組織中均為陰性，兩者間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05），見(jiàn)圖1。

3 討論

P16基因，又稱CDKN2A 基因，是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的與細(xì)胞周期調(diào)控密切相關(guān)的抑癌基因。P16基因直接參與了細(xì)胞周期的調(diào)控，其產(chǎn)物P16蛋白是細(xì)胞周期素依賴性激酶的抑制因子。Serrano M 等[1]首次報(bào)告人類P16蛋白，其表達(dá)情況與細(xì)胞增殖及分裂密切相關(guān)。

多項(xiàng)研究表明，P16的表達(dá)與HPV 感染有關(guān)，可能參與尖銳濕疣的發(fā)生發(fā)展。Yiu ZZ 等[2]研究P16在鱗狀上皮中的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)HPV 病毒基因使腫瘤抑制因子P53和Rb 失活，并且上調(diào)P16的表達(dá)。Zhang G 等[3]研究指出彌漫性P16免疫染色與HPV感染導(dǎo)致的上皮內(nèi)病變高度相關(guān)。Kazlouskaya V等[4]通過(guò)免疫組織化學(xué)方法，發(fā)現(xiàn)75%的尖銳濕疣病灶表現(xiàn)為P16蛋白的散發(fā)性和局灶性陽(yáng)性染色，而正常相鄰皮膚均為陰性。HPV 病毒感染導(dǎo)致視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤（Rb）蛋白功能喪失，同時(shí)P16的表達(dá)與功能性Rb 之間存在反向關(guān)系，進(jìn)而引起P16蛋白失去反饋抑制，出現(xiàn)高表達(dá)；另外，P16基因的甲基化突變失活也使得無(wú)功能的P16蛋白的表達(dá)增加[2]。

另外，有研究表明，P16蛋白可作為尖銳濕疣與相關(guān)疾病的鑒別指標(biāo)。樂(lè)桂花[5]研究指出P16在子宮頸良性鱗狀上皮中呈陰性表達(dá)，而在HPV 感染導(dǎo)致的不同級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變中，P16的表達(dá)有明顯差異，級(jí)別越高，P16的表達(dá)就越強(qiáng)。郭書(shū)萍等[6]對(duì)尖銳濕疣、鮑溫樣丘疹病及鮑溫病皮損進(jìn)行研究，指出P16蛋白在HPV 感染皮損中的表達(dá)情況均高于未感染HPV 的正常皮膚黏膜，同時(shí)，鮑溫樣丘疹病及鮑溫病中的表達(dá)均高于尖銳濕疣。Cheah PL 等[7]研究發(fā)現(xiàn)所有正常的鱗狀上皮不表達(dá)P16，P16免疫陽(yáng)性可作為高危人乳頭狀瘤病毒感染基因組整合的替代標(biāo)記物，同時(shí)用于尖銳濕疣與陰道上皮內(nèi)瘤變（VIN）的鑒別。Maniar KP 等[8]研究指出，P16在尖銳濕疣中為斑片狀/弱染色，但在高度VIN 病變中為彌漫性/強(qiáng)染色，并指出P16可作為尖銳濕疣與高度VIN 區(qū)分開(kāi)來(lái)的方法。

本研究發(fā)現(xiàn)P16蛋白在尖銳濕疣中陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于正常皮膚組織，提示HPV 感染人表皮組織后，P16蛋白的過(guò)度表達(dá)可能是機(jī)體對(duì)HPV 感染引起細(xì)胞異常增殖的一種反饋調(diào)節(jié)，P16蛋白的表達(dá)情況可作為尖銳濕疣的輔助診斷指標(biāo)。另外，多項(xiàng)研究表明，P16蛋白在鱗狀上皮異型增生病變中的表達(dá)情況顯著高于在尖銳濕疣中的表達(dá)，提示HPV 感染人表皮組織后引起P16蛋白過(guò)度表達(dá)，P16蛋白又進(jìn)一步促進(jìn)了鱗狀上皮的異型轉(zhuǎn)化，進(jìn)而表明P16蛋白可作為尖銳濕疣與鱗狀上皮異型增生病變的鑒別指標(biāo)。

綜上所述，P16蛋白參與了尖銳濕疣的發(fā)生發(fā)展，可作為尖銳濕疣診斷及鑒別診斷的有用指標(biāo)。