淺談目前非洲豬瘟常用診斷方法

陳靜

（安徽省動物疫病預(yù)防與控制中心 230091）

1 臨床的早期表現(xiàn)和診斷

非洲豬瘟是由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起的一種急性、烈性、高度接觸性傳染病，發(fā)病率和致死率高達100%，給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴重影響。

非洲豬瘟臨床早期診斷直接受基層獸醫(yī)專業(yè)水平的影響，為此，基層獸醫(yī)應(yīng)加強對非洲豬瘟疫病的診斷學習和總結(jié)，不斷提高臨床診斷技術(shù)。

1.1 3 種類型非洲豬瘟病毒感染的不同表現(xiàn)

強毒株會引起最急性型和急性型臨床表現(xiàn)。發(fā)病豬的體溫會升高，升高到41～42℃，同時出現(xiàn)嘔吐、食欲減退和精神不振的情況，有一部分生豬可能沒有先兆癥狀就突然死亡，死亡率達100%。

中等毒力的毒株能引起亞急性型癥狀，死亡率有所下降，達到30%～70%。主要臨床癥狀有出血和水腫，如果豬抵抗力較強，經(jīng)過3～4 周后康復(fù)，可成為帶毒豬。強毒力和中等毒力的毒株會引發(fā)母豬流產(chǎn)，胎兒全身和胎盤會出現(xiàn)出血點。

低毒力的毒株可能會引起慢性癥狀，病豬沒有出血的表現(xiàn)，在身體某些部位可能出現(xiàn)壞死和紅斑。

1.2 病理變化

1.2.1 最急性型

該類型病豬急性死亡，通過肉眼不能觀察出明顯的變化。

1.2.2 急性型

該類型病豬會出現(xiàn)肺部水腫而死亡；肝臟、腎臟和胃部會出現(xiàn)淋巴結(jié)出血；膀胱和心內(nèi)膜等部位有出血點。

1.2.3 亞急性型

該類型病豬始終會出現(xiàn)心包積液的癥狀；脾臟出現(xiàn)明顯腫大，淋巴結(jié)出現(xiàn)出血癥狀，呈現(xiàn)深紅色血腫。該型病死豬的腎臟出血比急性還要嚴重。

1.2.4 慢性型

該種類型的非洲豬瘟病變集中在肺部，肺部出現(xiàn)干酪樣肺炎和淋巴網(wǎng)狀組織增生。

2 實驗室診斷方法

2.1 病原學診斷

體外擴增基因法是目前實驗室檢測ASFV 常用的檢測方法。普通聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）和實時熒光定量聚合酶鏈式反應(yīng)兩種方法，已被許多國家使用，通過采集病豬體液的方式能直接檢測出病毒。特點是特異性和敏感性強，適合各種非洲豬瘟病毒的檢測。我國大多數(shù)獸醫(yī)實驗室現(xiàn)多用實時熒光定量聚合酶鏈式反應(yīng)。除了普通聚合酶鏈式反應(yīng)和實時熒光定量聚合酶鏈式反應(yīng)診斷方法外，直接免疫熒光試驗優(yōu)勢明顯，快速、經(jīng)濟和敏感性高，針對非洲豬瘟的亞急性型和慢性型病例的檢驗有比較好的效果，在檢驗過程中有些非洲豬瘟病毒毒株能引導巨噬細胞產(chǎn)生細胞病變，從而不出現(xiàn)血細胞吸附現(xiàn)象，影響檢測效果。

2.2 血清學診斷

檢測抗體能應(yīng)用于非洲豬瘟病毒感染豬的診斷，主要的方法有間接免疫熒光試驗和間接酶聯(lián)免疫吸附試驗等。其中間接酶聯(lián)免疫吸附試驗主要優(yōu)點是靈敏度高和價格低廉等，能大批量檢驗血清，但該種檢測方法的不足之處有假陰性和假陽性的出現(xiàn)。

3 討論

3.1 臨床上及時診斷發(fā)現(xiàn)

在生豬養(yǎng)殖業(yè)過程中的傳染病處理應(yīng)堅持早排查、早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早處理的原則，只有及早診斷出結(jié)果，及早發(fā)現(xiàn)，采取科學的防控措施，才能避免傳染性病的大范圍傳播與蔓延。生豬在感染非洲豬瘟病毒后由于受到多方面因素的影響，如病毒的致病性、豬品種、地區(qū)非洲豬瘟流行情況，在臨床上的表現(xiàn)不全一致。但受種種原因的制約和限制，學術(shù)界對我國養(yǎng)豬場發(fā)生的非洲豬瘟感染病毒的臨床癥狀研究比較少。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，非洲豬瘟病毒能潛伏4～19d，潛伏的時間越長，造成的影響越大?，F(xiàn)階段，國際上防控非洲豬瘟采用的普遍方式是精準清除病毒，效果如何直接受處理病毒的影響。在一般情況下不建議進行病理剖檢，如果在剖檢過程中因操作不當和生物安全處理措施不當很容易造成非洲豬瘟病毒的擴散和傳播。

3.2 最有效的診斷方式是實驗室診斷

現(xiàn)階段，比較有效的診斷方式是實驗室診斷。利用血清學試驗檢測非洲豬瘟病毒特異性抗體。在接種的第3 天能在血液中分離出非洲豬瘟病毒。如果直接接觸或間接接觸帶毒病豬，經(jīng)過10～13d 能從豬血液中分離出具有傳染性的非洲豬瘟病毒。

3.3 唾液檢測有一定的研究價值

學術(shù)界對該種檢測方式的可靠性和敏感性存在不同的態(tài)度。相關(guān)研究顯示，非洲豬瘟在自然感染情況下，唾液可以早于血液3～20d 檢測出非瘟病毒。建議豬群一旦出現(xiàn)不吃料、減料、輕微發(fā)熱等疑似發(fā)病癥狀，可立即采集豬的唾液、肛腸拭子等混檢，有助于提早發(fā)現(xiàn)疫情，或使用唾液對無癥狀豬群定期進行排查。需要注意的是，唾液核酸容易降解，要注意保存。早期檢測唾液樣本，熒光定量PCR 檢測方法更敏感、更合適，但對操作的規(guī)范性有很強的要求。相比較而言，鼻腔黏液受到外界干擾比較少。

3.4 實驗室診斷過程中的操作規(guī)范

病毒感染潛伏期在血液中和組織中存在差異，病豬體內(nèi)的扁桃體和唾液中可能會出現(xiàn)大量病毒，在前期采樣過程中應(yīng)重點采集扁桃體和唾液，避免對檢測結(jié)果造成影響。此外，核酸能否被快速有效的提取直接影響檢測效率。在提取過程中，如果操作不當會對實驗室環(huán)境造成污染，影響檢測結(jié)果。為此，必須重視操作的規(guī)范性。

3.5 非洲豬瘟病毒檢測試劑盒的質(zhì)量需要提升

在經(jīng)濟條件和技術(shù)水平的支持下，我國已經(jīng)研制出一批高質(zhì)量的非洲豬瘟病毒熒光檢測試劑盒，對加快檢測奠定了堅實的基礎(chǔ)。此外，隨著大量試劑盒的快速生產(chǎn)，必須建立科學的設(shè)計和質(zhì)量監(jiān)督管理體系，不斷完善質(zhì)量檢驗方法，為診斷非洲豬瘟病毒奠定基礎(chǔ)。