豬人工授精精液稀釋保存注意事項

王蔚曜

（云南省紅河州蒙自市畜牧技術(shù)推廣站 661199）

精液質(zhì)量是影響豬人工授精效果的重要因素，精液品質(zhì)直接關(guān)系到母豬受胎率和產(chǎn)仔數(shù)。蒙自縣是云南省仔豬生產(chǎn)大縣，通過連續(xù)多年實施國家生豬良種補(bǔ)貼項目，全市豬人工授精普及率達(dá)95%以上。2019 年，全市有豬人工授精供精站9個，存欄采精公豬148 頭，生產(chǎn)提供種豬常溫精液產(chǎn)品25 萬份，開展豬人工授精配種12 萬胎（次）。就精液產(chǎn)品生產(chǎn)過程中的精液稀釋保存環(huán)節(jié)而言，應(yīng)注重做好以下方面工作。

1 實驗室準(zhǔn)備

實驗室是精液檢查、處理、貯存的場所，而精液對溫度、酸堿度、灰塵、強(qiáng)光均很敏感，因此實驗室應(yīng)清潔、無菌、無煙、無灰塵。實驗室安裝空調(diào)，生產(chǎn)操作時開啟空調(diào)，保持室溫25℃，窗子為有色玻璃、遮光窗簾。工作人員樹立無菌操作觀念，穿專門工作服，戴手套、口罩、帽子。與精液接觸的器械設(shè)備使用前經(jīng)過高溫滅菌消毒，一次性耗材也進(jìn)行滅菌消毒。

2 稀釋液配制

2.1 稀釋劑選擇與保存

豬精液稀釋劑主要有現(xiàn)場現(xiàn)時自配劑和商品稀釋劑兩種，有短效、中效、長效之分，選擇原則根據(jù)精液保存期限確定，一般精液保存2d 左右，則選擇短效型即可。若供精站具備較強(qiáng)的人員設(shè)備技術(shù)力量，可自行配制稀釋劑，否則建議使用商品化稀釋劑，雖然其成本比自配劑稍高，優(yōu)點是質(zhì)量穩(wěn)定，批次間差異小，便于人工授精中規(guī)范化操作使用。為保證稀釋劑成分穩(wěn)定，稀釋劑需低溫避光保存。

2.2 稀釋水選擇

精子對外界環(huán)境比較敏感，如果稀釋用水水質(zhì)不好則會對精子產(chǎn)生一定損害，因此，稀釋用水應(yīng)使用玻璃蒸餾器生產(chǎn)的蒸餾水，生產(chǎn)中常見使用的礦泉水、純凈水等都不符合標(biāo)準(zhǔn)。

2.3 稀釋液配制

配制稀釋液時，溶解稀釋粉的水溫控制在25～35℃，最高不超過40℃。若溫度過高，會破壞抗生素。精液稀釋粉劑完全溶解后靜置1h 左右，達(dá)到稀釋液pH 和滲透壓穩(wěn)定才能對精子發(fā)揮良好的保護(hù)作用。

3 品質(zhì)檢查

精液采集后盡快進(jìn)行稀釋，原精貯存不超過30min。稀釋前先進(jìn)行采精量、顏色、氣味、活力、密度檢查，原精精液量≥100ml，顏色乳白色，氣味略帶腥味，鮮精活力≥0.7、密度≥1億/ml 為正常合格精液，未經(jīng)檢查或檢查不合格的精液不可稀釋。

4 稀釋倍數(shù)計算確定

根據(jù)＜種豬常溫液＞(GB23238-2009) 標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)檢查合格的原精液，按照每個輸精劑量中有效精子數(shù)25 億、輸精量80ml的標(biāo)準(zhǔn)來確定加入的稀釋液數(shù)量，例某頭公豬某次采精量250ml，活力0.8，密度2 億/ml，則有效精子數(shù)為250ml×2 億/ml×0.8=400 億，輸精份數(shù)為400 億÷25 億/份=16 份，加入稀釋液量為16 份×80ml/份-200ml=1080ml。

5 等溫稀釋

精液稀釋時，先將稀釋液預(yù)熱至33～37℃，再以精液溫度為標(biāo)準(zhǔn)來調(diào)節(jié)稀釋液的溫度，保持稀釋液與精液溫差不超過1℃。

6 稀釋方法

稀釋精液的整個過程應(yīng)輕柔緩慢。若作高倍稀釋時，應(yīng)先按1：1 比例進(jìn)行低倍稀釋，將稀釋液緩慢分次倒入原精液中，即先加入與原精量等量的稀釋液慢慢混合，稍待片刻后再加入混合后等量的稀釋液慢慢混合，反復(fù)操作至完成為止。

7 稀釋后再檢查

精液稀釋完成5min 后再作一次活力檢查，如果活力沒有下降則可進(jìn)行分裝，如果活力下降，則說明稀釋液的配制或稀釋方法存在問題，應(yīng)立即查明原因加以改進(jìn)。生產(chǎn)實踐中常見錯誤做法是只檢查原精液活力，稀釋后不進(jìn)行精液活力檢查。

8 精液分裝

稀釋好的精液按每份80ml 分裝，使用對精子無毒害的專用精液包裝瓶（袋），分裝時將瓶（袋）內(nèi)空氣擠掉，以減少運輸中晃動對精子造成的打擊。分裝后的精液逐個粘貼標(biāo)簽，一個品種一個顏色便于區(qū)分，標(biāo)注清楚公豬的品種、耳號、生產(chǎn)日期等。

9 精液保存

精液分裝好后，不宜立即放入17℃恒溫箱中，應(yīng)在22～25℃室溫下放置1～2h 緩慢降溫，待精液溫度平衡至室溫后再轉(zhuǎn)入恒溫箱。恒溫箱內(nèi)放置溫度計一支，每天檢查恒溫箱溫度2次并記錄，注意恒溫箱溫度變化，避免溫度忽高忽低影響精液品質(zhì)。保存過程中盡量減少恒溫箱開關(guān)次數(shù)，每天間隔12h 輕輕搖動精液一次，使精子與稀釋液充分混勻，避免精子相互擠壓、密度過大、營養(yǎng)供應(yīng)不足而引起死亡。

豬精液品質(zhì)好壞對養(yǎng)豬生產(chǎn)意義重大，生產(chǎn)實踐中要盡力避免上述因素對精液質(zhì)量的影響，確保提供高質(zhì)量精液產(chǎn)品，從而提高母豬生產(chǎn)力水平。