豬藍(lán)耳病診斷及防治

陶雪江

（江蘇省常熟市古里動物防疫站 215500）

豬藍(lán)耳病是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒 （PRRSV） 的變異株引起的一種急性高致死性傳染病[1]，豬只一旦感染藍(lán)耳病通常表現(xiàn)出以下臨床癥狀： 豬只突然發(fā)病，高熱不退，體溫可達(dá)40～41℃，精神沉郁，臥地不起，食欲減退或廢絕，出現(xiàn)嘔吐，呈腹式呼吸，大便干燥或腹瀉，部分病豬呼吸急促、皮膚發(fā)紺、毛孔出現(xiàn)出血點(diǎn)。 豬藍(lán)耳病發(fā)病急、傳播速度快，特別是飼養(yǎng)管理?xiàng)l件差的養(yǎng)殖場發(fā)生率特別高，給養(yǎng)豬戶帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[2]。 近幾年，全國各地均有豬藍(lán)耳病發(fā)生，造成大量豬只死亡，本病會使豬抵抗力下降而且繼發(fā)其他疾病，所以，本病沒有特效的治療藥物，因此，做好豬藍(lán)耳病的診斷及防治工作尤為重要。

1 患病豬臨床癥狀

某養(yǎng)豬場的患病豬群，臨床癥狀表現(xiàn)為初產(chǎn)母豬和經(jīng)產(chǎn)母豬發(fā)生高熱，體溫達(dá)到40～41℃、精神沉郁、食欲不佳或食欲廢絕、呼吸困難，有的母豬在耳尖、乳頭、外陰、腹部、尾部等處的皮膚發(fā)紺，但以耳尖部最為明顯和常見。 發(fā)生早產(chǎn)的母豬分娩不順暢，出現(xiàn)少奶或無奶情況。 仔豬尤其是哺乳仔豬的死亡率很高，可達(dá)80%以上。 斷奶仔豬發(fā)病時(shí)大多會出現(xiàn)呼吸困難、咳嗽等癥狀，有些病豬會表現(xiàn)為腹瀉、關(guān)節(jié)炎、皮膚有斑點(diǎn)。 育肥豬的體溫升高可達(dá)41℃左右，出現(xiàn)食欲基本廢絕，全身發(fā)紅，呼吸急促，咳嗽等癥狀。 無繼發(fā)感染的病豬死亡率較低。 種公豬發(fā)病時(shí)癥狀不明顯，但會影響精液品質(zhì)，死精數(shù)量增多。

2 鑒定和診斷

2.1 病料采集

可采集流產(chǎn)的死胎、新生仔豬肺、心、腦、肝、腎、脾、扁桃體、支氣管外周淋巴結(jié)、胸膜、骨髓制成勻漿來做病毒分離； 也可采取發(fā)病母豬血清、血漿進(jìn)行病毒分離。

2.2 細(xì)菌分離鑒定

采取發(fā)生病變的淋巴結(jié)、腎臟，無菌環(huán)境下進(jìn)行細(xì)菌分離鑒定試驗(yàn)，37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12～24h 后，觀察結(jié)果。

2.3 RT-PCR病原診斷

2.3.1 處理樣品

4 份待檢樣品0.5g，將稱取的樣品放入研磨器中研磨，研磨片刻后再加入1.5ml PBS 繼續(xù)研磨，將研磨好的組織液放入滅菌離心管 （1.5ml） 中，在離心機(jī)中 8000rpm 離心 5min，離心完畢后取100μL 上清，再加入30μL 消化液混勻。

2.3.2 提取病毒RNA

處理好的樣品中依次加入30μL 醋酸鈉溶液，300μL 酚-氯仿-異戊醇混合液，混勻，冰浴 15min，4℃ 12000rpm 離心15min。 取 300μL 上請加入 1.5ml 離心管 （經(jīng) DEPC 水處理）中，加入 300μL 異丙醇，混勻，置液氮 3min 后室溫融化，4℃15000rpm 離心 20min。

去除上清，沿離心管的管壁慢慢加入75%乙醇1ml，輕旋1 周倒掉，將離心管倒扣在吸水紙上真空抽干，加入9μL 滅菌去離子水和1μLRNA 酶抑制劑，混勻。

2.3.3 RT-PCR 反應(yīng)

將 RT-PCR 混合液、RNA 酶抑制劑、反轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA酶、樣品RNA 按要求體積加入PCR 管中，在PCR 儀中進(jìn)行系列循環(huán)后進(jìn)行延伸。

2.3.4 電泳觀察

2g 瓊脂糖加入 100ml 電泳液 （1 倍稀釋） 中，加熱溶解后加入10μL 溴化乙啶混勻，瓊脂糖倒入電泳槽內(nèi)，待凝固后取出梳子，將混合有1μL 上樣緩沖液的10μL 擴(kuò)增產(chǎn)物點(diǎn)樣在上樣孔中進(jìn)行電泳。

3 防治分析

3.1 發(fā)病地區(qū)的防治

3.1.1 無害化處理

根據(jù)相關(guān)規(guī)定，流產(chǎn)死胎、病死豬及病豬的排泄物等要采用深埋、焚燒等方式進(jìn)行無害化處理。

3.1.2 進(jìn)行緊急免疫

發(fā)生藍(lán)耳病的同時(shí)多會伴發(fā)豬瘟，豬只發(fā)生藍(lán)耳病時(shí)其豬瘟抗體水平明顯下降，所以也要加強(qiáng)豬瘟的接種免疫工作，建議種公豬每年至少免疫2 次，母豬產(chǎn)后到斷奶前免疫一次或每年免疫兩次，仔豬斷奶前進(jìn)行首免。 規(guī)?；B(yǎng)殖場要嚴(yán)格按照當(dāng)?shù)刂贫ǖ拿庖叱绦蜻M(jìn)行免疫[3]。 另外，根據(jù)各地區(qū)疫情發(fā)生的實(shí)際情況，積極做好相關(guān)傳染病的免疫接種工作。 常規(guī)免疫程序?yàn)樯唐纷胸i： 斷奶后進(jìn)行首次免疫，30d 后再加強(qiáng)免疫一次； 后備母豬： 70 日齡前的免疫程序可參照商品仔豬的免疫程序，以后在進(jìn)行配種前接種免疫一次； 種用公豬： 70 日齡前的免疫程序可參照商品仔豬的免疫程序，以后每隔半年加強(qiáng)免疫一次。

3.1.3 進(jìn)行對癥治療

母豬分娩前10d 左右可連用數(shù)天孕畜專用的抗炎藥物，以減少母豬流產(chǎn)的發(fā)生。 母豬分娩前后各一周可喂服適當(dāng)孕畜專用的抗生素。 母豬一旦發(fā)生藍(lán)耳病，配種時(shí)機(jī)要往后推遲。 初生仔豬可適當(dāng)補(bǔ)給電解多維、葡萄糖等。 仔豬斷奶階段和轉(zhuǎn)群豬只要適當(dāng)給予抗應(yīng)激藥物，以減少應(yīng)激反應(yīng)的發(fā)生。 及時(shí)淘汰沒有治療價(jià)值的豬。 對老齡病豬可選用抗菌藥物進(jìn)行治療。可在發(fā)病豬的飼料或飲水中適當(dāng)添加阿莫西林、氟苯尼考等。豬只食欲減退時(shí)可適量加大藥量。 如果豬發(fā)生便秘可飼喂人工鹽、硫酸鎂。 病豬繼發(fā)感染豬瘟、偽狂犬病等疾病時(shí)如果確定沒有治療價(jià)值要進(jìn)行淘汰[4]。

3.1.4 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

豬場設(shè)置消毒池，嚴(yán)格人員、車輛的出入制度。 做好衛(wèi)生消毒工作，保持豬舍、用具、場區(qū)的清潔衛(wèi)生，保持通風(fēng)，飼養(yǎng)密度不宜過大，做好驅(qū)蠅、滅鼠工作[3]。 適時(shí)調(diào)整日糧搭配。 發(fā)病期間做好防止豬群流動工作。

3.2 未發(fā)病地區(qū)的防治

3.2.1 免疫接種

所有的母豬和公豬都要進(jìn)行兩次藍(lán)耳病的基礎(chǔ)免疫，兩次間隔3 周左右，基礎(chǔ)免疫后每隔5 個(gè)月進(jìn)行一次免疫。

3.2.2 引種控制

禁止從藍(lán)耳病疫區(qū)引進(jìn)豬，應(yīng)堅(jiān)持自繁自養(yǎng)。

3.2.3 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

豬場設(shè)置消毒池，嚴(yán)格人員、車輛的出入制度。 排泄物要及時(shí)處理，嚴(yán)格消毒制度，爭取做到全進(jìn)全出。

3.2.4 加強(qiáng)豬瘟、偽狂犬病等的免疫工作

定期開展疾病的免疫抗體監(jiān)測工作，根據(jù)免疫抗體消長規(guī)律制定合理的免疫程序并及時(shí)進(jìn)行免疫接種[4]。

4 診斷結(jié)果分析

4.1 細(xì)菌的分離鑒定結(jié)果

細(xì)菌分離鑒定未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌生長。

4.2 RT-PCR診斷結(jié)果

擴(kuò)增出的目的條帶，與陽性對照結(jié)果一致，表明該豬場的病死豬感染了豬藍(lán)耳病。

4.3 豬藍(lán)耳病發(fā)生地區(qū)情況

各種對應(yīng)性防治措施有效控制豬藍(lán)耳病的進(jìn)一步傳播，并對已患病豬有明顯的治療效果，病情得到有效控制。

4.4 豬藍(lán)耳病未發(fā)生地區(qū)情況

經(jīng)過有效防治工作，沒有發(fā)生藍(lán)耳病，豬群的整體免疫狀況明顯提高。

5 討論

我國早在1996 年就發(fā)布了畜禽病害肉尸及其產(chǎn)品無害化處理規(guī)程 (GB16548-1996)，規(guī)程要求對患相關(guān)疾病畜禽的肉、尸體及其產(chǎn)品進(jìn)行無害化處理。 但現(xiàn)實(shí)情況并不樂觀，在小市場上仍有病死畜禽肉及其產(chǎn)品出現(xiàn)。 所以應(yīng)加大執(zhí)行力度，切實(shí)做好檢疫工作，杜絕病死畜禽肉及其產(chǎn)品的出現(xiàn)。

由于豬藍(lán)耳病暫時(shí)沒有特效治療藥物，因此，預(yù)防控制本病更為重要，只有采取科學(xué)預(yù)防措施才能有效控制疫情的蔓延。