質型多角體病毒在北方地區(qū)的復制及林間防治試驗

梁立明

摘 要：質型多角體病毒在南方防治馬尾松毛蟲經過試驗，已經取得了成功，這在生物防治松毛蟲領域中是一項新的突破。這種新的方法雖然在南方取得了成功，但在北方尚未進行嘗試。赤松毛蟲在北方遼寧阜新地區(qū)油松林內為害十分嚴重，多年來雖然采取了綜合防治措施，也取得了一定效果，但近年來又發(fā)生猖獗，故我們借用CPV質型多角體病毒在南方防治松毛蟲的技術模式，在北方遼寧阜新地區(qū)進行防治試驗。此次試驗過程是由貴州長綠生物技術防御有限公司協助，病毒來源由其公司提供。此次試驗內容分為2個階段：第1階段為復制病毒；第2階段為林間防治試驗（其中包括“生物導彈”——利用赤眼蜂攜帶病毒，和直接噴灑病毒2項內容）。

關鍵詞：病毒；赤松毛蟲；復制

中圖分類號：S763.3 文獻標識碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20180632150

1 復制病毒（CPV病毒在赤松毛蟲體內增殖）

1.1 試驗地點及林地概況

此次復制病毒的地點設在蟲災較重的阜新縣平安地鎮(zhèn)西山。林內生態(tài)條件一般，林齡在15a左右，郁閉度65%，有蟲株率100%，蟲口密度100頭/株。

1.2 試驗時間及方法

1.2.1 飼養(yǎng)欄設置

在2011年5月7日開始，在林地內設置5個養(yǎng)蟲圍欄，面積50m2左右。四周用光滑的塑料布圍上，以防止松毛蟲向外逃散，中間用尼絨絲網拉上網床，以便托起松枝養(yǎng)蟲。

1.2.2 蟲源采集

然后用人工在林地附近采集蟲源及新鮮松針，放在網床上，采集總蟲數在10萬頭左右，分散在5個圍欄之內。

1.2.3 噴施病毒

在5月15日進行第1次病毒噴灑，利用超低量噴霧機噴施。當日天氣：小雨，溫度29℃，風速4.5m/s，所噴病毒濃度為106pib/mL，5個圍欄總用藥量為750mL。在5月18日進行第2次噴灑。當日天氣晴，溫度29℃，風速5m/s，噴灑方法及濃度，藥量同第1次。

1.2.4 更換新枝

在噴灑病毒后，每3d進行1次新枝更換，以利于松毛蟲的正常取食。更換的新枝也都在試驗林地的附近，立地條件相似的林地內采集。采集量以維持3d內松毛蟲的正常取食為宜。

1.3 CPV病毒在赤松毛蟲體內增殖后對個體的生長發(fā)育影響狀況

在噴灑病毒后，過1～2d等松毛蟲取食帶病毒的針葉后，采10頭幼蟲裝入罐瓶中進行個體飼養(yǎng)。每天供應病毒針葉，同時在附近林地采集10頭健康幼蟲也進行罐瓶飼養(yǎng)，每日供應沒噴病毒的新鮮松針。觀察結果如表1所示。

通過上表的排糞量來看，食取病毒針葉的幼蟲排糞量明顯少于健康幼蟲，這表明CPV病毒在幼蟲體內已經感染，抑制個體取食，取食量減少，排糞量相應減少。

由上表對照看，食取病毒幼蟲個體長度明顯小于健康幼蟲，蟲尾部明顯萎縮，這是由于幼蟲感染病毒后，蟲群大多數厭食影響生長發(fā)育而造成的。

1.4 病毒感染率調查

在7月中旬對感染情況做了調查，分別在5個圍欄內各采集幼蟲100頭，通過解剖后，看到有425頭幼蟲感染，感染率為85.0%。

1.5 采集病毒

在7月末，松毛蟲幼蟲達到7～8齡時進行病毒采集，采集方法：用剪刀剖開幼蟲中腸，看是否感染，感染病毒的中腸為黃白或白色。人工現場采蟲及時解剖，把感染的中腸全部剪掉后放入器皿中。在飼養(yǎng)欄內10萬頭幼蟲除死亡之外，共收集攜帶病毒的中腸18kg左右，然后進行分離提純。

2 CPV病毒林間防治試驗

2.1 試驗地點及林地概況

試驗區(qū)設在阜新縣務歡池鎮(zhèn)推朋前山的松林內，樹高2～5m，林齡相近，林內生態(tài)條件較好，郁閉度75%左右，有蟲株率30%左右，蟲口密度5～10頭/株。

2.2 試驗內容及方法

利用赤眼蜂攜帶病毒（“生物導彈”）防治松毛蟲試驗。

“生物導彈”是不同于單純的赤眼蜂寄生，它是利用赤眼蜂足攜帶CPV病毒，通過赤眼蜂尋找寄主將CPV病毒住留在赤松毛蟲卵殼上，被寄生的赤松毛蟲卵，體現出卵期寄生效果。未被寄生的赤松毛蟲卵，幼蟲孵化時由于取食被CPV病毒污染的卵殼而感染CPV病毒，這是一種新式的利用卵期寄生及幼蟲感染病毒雙重效果來抑制赤松毛蟲種群數量增長的方法。試驗方法及初步結果如下。

試驗地點設在推朋前山油松林內，試驗地面積40hm2，在其內設置5塊標準地，查清標準樹上蛹期的蟲口密度，做為防前基數，于松毛蟲卵始盛期，分2次掛卡放蜂。第1次掛卡時間為7月25日，第2次時間為7月31日，總放蜂量達12000～15000頭/667m2。

在設置“生物導彈”試驗區(qū)同時，在一定距離內，又設置了13.3hm2對照區(qū)，其間的立地條件與試驗區(qū)近似，設立5塊標準地。

2.3 直接噴灑病毒試驗

在“生物導彈”試驗區(qū)附近，選取6.67hm2林地進行直接噴灑病毒試驗，噴灑時間為8月15日，利用超低量噴霧機噴施，濃度為20億pib/mL，每677m2用藥量為1×105pib/mL，病毒總量為100億pib/667m2。

2.4 林間試驗初期結果

2.4.1 卵期效果

在赤眼蜂羽化后，對2個區(qū)進行了隨機調查，分別采集若干卵塊，帶回室內查數各自的寄生情況，調查結果見表3、表4。

由表3和表4可以看出“生物導彈”區(qū)的卵期寄生率明顯高于對照區(qū)，也就是說，在初期赤眼蜂的寄生作用已經十分明顯。

2.4.2 Ⅱ齡幼蟲期效果

在8月25日對“生物導彈”區(qū)、病毒區(qū)、對照區(qū)采取了抽樣調查，采集幼蟲解剖觀察感染情況，結果見表5。

由表5看出，病毒區(qū)感染效果明顯，而“生物導彈”區(qū)也有一定效果。

2.4.3 后期套籠飼養(yǎng)觀察及結果

用3個套籠，各飼養(yǎng)200頭病毒區(qū)幼蟲，套在噴灑與病毒試驗區(qū)同樣濃度病毒的油松枝上，每周一、三、五各觀察1次死亡情況。

另外用3個套籠，各飼養(yǎng)200頭“生物導彈”區(qū)幼蟲，套在沒有噴灑病毒的油松枝上，觀察同上。

再用3個套籠內各飼養(yǎng)200頭對照區(qū)內的幼蟲，套在沒有噴灑病毒的油松枝上，作為對照，觀察同上。

觀察結果，病毒區(qū)幼蟲取食病毒針葉后，食欲明顯減退，行動遲緩，蟲體逐漸萎縮，死亡蟲數較多?！吧飳棥眳^(qū)的幼蟲，也出現抑食癥狀，但不太明顯，死亡蟲數較病毒區(qū)少。對照區(qū)的幼蟲取食情況正常。

3 結論

1CPV質型多角體病毒，在北方的復制情況很好，能夠在赤松毛蟲初期效果是很明顯的，這種在南方防治馬尾松毛蟲成功的方法在北方也是可行的。蟲幼蟲體內增殖。以及在北方防治赤松毛。

利用赤眼蜂攜帶CPV病毒（“生物導彈”）進行松毛蟲治理，卵期寄生效果比較明顯，但攜帶病毒所發(fā)揮的作用，還需要長時間的進一步的觀察。

直接噴灑病毒效果十分明顯。對于應用質型多角體病毒防治赤松毛蟲的最佳施藥方式、劑量、最佳應用蟲期和時間、擴散作用及其經濟成本等還有待于進一步研究。

參考文獻

[1]洪靖君，彭輝銀，段家龍.昆蟲質多角體病毒研究的若干新進展[J].昆蟲學報，2002（6）：815-821.

[2]馬永平，孟小林，胡蓉，等.替代宿主增殖松毛蟲質型多角體病毒的比較研究[J].中國病毒學，2001（2）：155-160.