(河北省塞罕壩機(jī)械林場(chǎng)三道河口分場(chǎng),河北 承德 068450)
提前準(zhǔn)備好成熟度完好、籽粒飽滿的千葉蓍種子,培養(yǎng)皿清洗并烘干備用,準(zhǔn)備濾紙。試驗(yàn)前對(duì)千葉蓍種子用30%H2O2 浸泡20min 消毒,蒸餾水清洗2-3遍備用。將已經(jīng)烘干的培養(yǎng)皿、已經(jīng)裁剪合適的濾紙烘箱烘干20min,取出晾至室溫。
選擇直徑為9cm 的培養(yǎng)皿,將消毒處理過(guò)的種子勻稱地放于鋪有兩層濾紙的培養(yǎng)皿中,每個(gè)培養(yǎng)皿中都放入40 粒的種子[10],為了使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更具有代表性,每個(gè)溫度設(shè)置3 次重復(fù)的處理,之后再加入適量蒸餾水,全部處理都完成后,將種子分別放在15℃、20℃、25℃、30℃溫度的培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)。對(duì)于發(fā)芽數(shù)的統(tǒng)計(jì)在每天下午進(jìn)行,同時(shí)每天要向培養(yǎng)皿中加入適量的蒸餾水,使濾紙保持濕潤(rùn),以避免種子因失水而影響萌發(fā),導(dǎo)致試驗(yàn)數(shù)據(jù)出現(xiàn)偏差[11]。假如連續(xù)6 天完全無(wú)種子萌發(fā),萌芽統(tǒng)計(jì)就可以結(jié)束。整理數(shù)據(jù)時(shí),不僅要統(tǒng)計(jì)出萌發(fā)的種子數(shù),對(duì)不同溫度下的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽指數(shù)也要進(jìn)行計(jì)算分析[12]。
用蒸餾水分別配置濃度為0.05%、0.2%、0.6%、1%、1.2%的Na2CO3溶液和1%、2%、3%、5%、7%的PEG 溶液,以蒸餾水處理為對(duì)照。在放有兩層濾紙的培養(yǎng)皿中將處理過(guò)的種子均勻地放入,之后加入適量的處理液以飽和,將40 粒種子分別放在每個(gè)培養(yǎng)皿中[13]。每處理重復(fù)3次,然后對(duì)每個(gè)培養(yǎng)皿稱重記錄。將培養(yǎng)皿放在20℃,光照條件為12h 下的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),每過(guò)24h 對(duì)各個(gè)試驗(yàn)組的發(fā)芽情況進(jìn)行記錄[14]。恒重法補(bǔ)充每天消耗的水分保證Na2CO3及PEG 濃度不變。
試驗(yàn)開(kāi)始后,需要每天統(tǒng)計(jì)千葉蓍種子的發(fā)芽數(shù)(以胚根伸出長(zhǎng)度為種子長(zhǎng)度的1/2 作為發(fā)芽標(biāo)準(zhǔn))[15]。其中:
發(fā)芽率(%)=所有萌芽種子粒數(shù)/供試種子粒數(shù)×100%[15];
發(fā)芽勢(shì)=規(guī)定天數(shù)內(nèi)種子萌芽粒數(shù)/供試種子粒數(shù)×100%[15];
發(fā)芽指數(shù)Gi=∑(Gt/Dt)(Gt 指浸種后t 日的發(fā)芽數(shù),Dt 指相應(yīng)的發(fā)芽日數(shù))[15]。
千葉蓍種子的發(fā)芽率在不同的溫度下的影響有所不同。千葉蓍種子的發(fā)芽率在15℃-30℃的溫度處理后呈現(xiàn)出先上升后下降的趨勢(shì)。在培養(yǎng)溫度為20℃時(shí)的千葉蓍種子的發(fā)芽率為83%,達(dá)到最高,比15℃時(shí)提高了26%,差異顯著。當(dāng)培養(yǎng)溫度為30℃時(shí)發(fā)芽率為45%,達(dá)到最低,比在20℃時(shí)的發(fā)芽率低38%,差異顯著。當(dāng)溫度在20℃-30℃時(shí),伴隨著溫度的升高,千葉蓍種子的發(fā)芽率呈現(xiàn)出了明顯的下降趨勢(shì)。
用不同濃度的Na2CO3 溶液對(duì)千葉蓍種子進(jìn)行處理,結(jié)果表明其發(fā)芽率隨著Na2CO3 濃度的逐漸增加而呈現(xiàn)出了下降的趨勢(shì)。在鹽的脅迫作用下千葉蓍種子的發(fā)芽率呈現(xiàn)出了先上升后下降的趨勢(shì)。對(duì)照組千葉蓍的發(fā)芽率為83%,當(dāng)濃度在0.05%Na2CO3 時(shí)的發(fā)芽率為84%,其發(fā)芽率比對(duì)照組高1.00%,差異不顯著;當(dāng)Na2CO3 濃度為0.20%其發(fā)芽率為56%,為對(duì)照組的67%,差異顯著;當(dāng)Na2CO3 濃度為0.60%-1.20%時(shí)發(fā)芽率出現(xiàn)了顯著的下降趨勢(shì),在濃度為1.20%的Na2CO3 溶液濃度的影響下,種子的發(fā)芽率下降為9%,有效地抑制住了千葉蓍種子的萌發(fā)。
試驗(yàn)探討了不同培養(yǎng)溫度對(duì)千葉蓍種子萌發(fā)的影響以及Na2CO3 鹽溶液和PEG 溶液對(duì)千葉蓍種子的逆境脅迫。結(jié)果表明:
(1)20℃為千葉蓍種子萌發(fā)的最適宜的溫度。
(2)與對(duì)照組相比,千葉蓍種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽指數(shù)隨著Na2CO3 脅迫濃度的增加均呈現(xiàn)出下降的趨勢(shì),種子發(fā)芽的時(shí)間隨著脅迫濃度的增加相對(duì)鹽害率的升高也出現(xiàn)了不同程度的延長(zhǎng);千葉蓍種子的生長(zhǎng)在不同濃度鹽脅迫的效用下受到了不同程度的抑制。千葉蓍種子在1.20%的鹽濃度下仍有種子發(fā)芽,說(shuō)明其耐鹽性較強(qiáng)。
(3)與對(duì)照組相比,千葉蓍種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽指數(shù)隨著PEG脅迫濃度的不斷加大均呈現(xiàn)出先上升后下降的趨勢(shì)。種子發(fā)芽的時(shí)間隨著脅迫濃度的增加開(kāi)始延遲,發(fā)芽過(guò)程延長(zhǎng);千葉蓍種子的生長(zhǎng)在不同濃度干旱脅迫的作用下受到了不同程度的抑制。千葉蓍種子在7.00%的PEG 脅迫下的發(fā)芽率為33%,說(shuō)明其具有一定的抗旱性。