草莓灰霉菌生防酵母菌的篩選及生防效果測(cè)定

王曉妍 張棟園 李寧 崔新儀

摘? ? 要：從天津當(dāng)?shù)爻Ｒ?jiàn)的7個(gè)葡萄品種中篩選得到69株酵母菌，通過(guò)平板對(duì)峙篩選發(fā)現(xiàn)8株酵母菌對(duì)草莓灰霉菌抑制效果超過(guò)50.00%，其中菌株YGMG-3的離體抑制率達(dá)到74.32%，顯著高于其他處理（P<0.05）;對(duì)篩選得到的8株酵母菌株進(jìn)行產(chǎn)揮發(fā)性物質(zhì)測(cè)定，結(jié)果表明一株酵母菌株YGMG-3對(duì)草莓灰霉菌具有明顯抑制效果，其抑制率達(dá)到68.89%，顯著高于其他處理（P<0.05）;為進(jìn)一步確認(rèn)酵母菌株YGMG-3對(duì)草莓灰霉菌的抑制效果，本研究測(cè)定了其對(duì)草莓灰霉菌孢子萌發(fā)的影響，結(jié)果顯示酵母菌株YGMG-3對(duì)草莓灰霉菌的孢子萌發(fā)具有較強(qiáng)的抑制效果，其中2×107個(gè)·mL-1處理效果最顯著，抑制孢子萌發(fā)率達(dá)到85.50%，顯著高于其他處理（P<0.05）。這些結(jié)果為開(kāi)發(fā)酵母菌株YGMG-3防治草莓灰霉菌提供了一定信息。

關(guān)鍵詞：生防酵母菌;草莓灰霉菌;抑菌效果;孢子萌發(fā)

中圖分類號(hào)：S481? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? ? ? ? DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2020.09.001

Abstract： Sixty-nine yeast strains were screened from seven common grape varieties collected in tianjin， eight strains among these yeast strains inhibited more than 50.00% growth of agent caused strawberry greymold invitro. A yeast strain YGMG-3 exerted significant inhibite functionon strawberry grey mould with 74.32%，which was significantly higher than other stains（P<0.05）.Volatile substance produced from eight strains of yeast was determined and the strain YGMG-3 inhibited 68.89% mycelial growth of strawberry grey mold， which was significantly higher than other treatments（P<0.05）.To further confirm the inhibitory effect of yeast strain YGMG-3 on strawberry gray mould， germination of spores of strawberry grey mould were measured. The yeast strains YGMG-3 with 2×107·mL-1 concentration inhibited 85.50% germination of spores of strawberry grey mould， which was significantly higher than other treatments（P<0.05）. These results provided some information for the development of yeast strain YGMG-3 to control strawberry grey mould.

Key words： antagonistic yeast; strawberry grey mould; inhibitory effect; spore germination

草莓 （Fragaria × ananassa Duch.），屬薔薇科，草莓屬，多年生草本植物。其色澤鮮艷、口感酸甜深受消費(fèi)者的喜愛(ài)，又由于營(yíng)養(yǎng)豐富，因此被稱為“水果皇后”[1]。草莓灰霉?。⊿trawberry Gray Mould）是引起草莓腐爛的主要原因之一[2-3]。我國(guó)各草莓栽培地區(qū)都有發(fā)生，20 世紀(jì) 70 年代后發(fā)病逐漸加重，特別在南方采果期正值春雨時(shí)節(jié)，發(fā)病更為嚴(yán)重。草莓灰霉病的發(fā)生常造成感病品種的病果率在 30%左右，嚴(yán)重的可達(dá)60%以上，對(duì)草霉產(chǎn)量、品質(zhì)影響很大。目前防治草莓灰霉病主要還是采用化學(xué)殺菌劑處理[4-6] ，這樣往往會(huì)引入一些不安全因素。另外，病原菌對(duì)常用化學(xué)藥劑抗藥性的增強(qiáng)，使得化學(xué)農(nóng)藥的防效不斷下降，并且隨著人們生活水平不斷提高，對(duì)綠色食品的要求越來(lái)越強(qiáng)烈[7-9]，因此很有必要開(kāi)辟新的安全有效防治途徑，生物防治顯得具有重要意義。本研究從葡萄果實(shí)上篩選可離體拮抗草莓灰霉菌的酵母菌，并對(duì)其生防效果進(jìn)行研究，為草莓灰霉病的防治提供一定的理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 供試材料

從天津市西青區(qū)紅旗農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)購(gòu)入7個(gè)不同品種的葡萄：玫瑰香葡萄，馬奶葡萄，陽(yáng)光玫瑰葡萄，魏可葡萄，A17葡萄，脆紅寶葡萄、紅地球，挑選大小一致，成熟度8～9成，無(wú)病蟲(chóng)和機(jī)械傷口的果實(shí)用于酵母菌的分離與篩選。

1.1.1 供試酵母菌 從葡萄果皮和果肉中分離得到。

1.1.2 供試灰霉菌 草莓灰霉菌（Botrytis cinerea Pers.）由天津農(nóng)學(xué)院植物病理實(shí)驗(yàn)室提供。

1.1.3 供試培養(yǎng)基 PDA培養(yǎng)基、PDB培養(yǎng)基、YEPD培養(yǎng)基均采用常規(guī)方法制備。

1.1.4 主要儀器與設(shè)備 詳見(jiàn)表1。

1.2 試驗(yàn)方法

2.4 不同濃度酵母菌YGMG-3菌株對(duì)灰霉菌孢子萌發(fā)率的影響

結(jié)合表2和表3的試驗(yàn)結(jié)果，篩選出一株對(duì)草莓灰霉菌具有較好抑制效果的酵母菌菌株YGMG-3，測(cè)定了其對(duì)草莓灰霉菌孢子萌發(fā)的影響，結(jié)果見(jiàn)表4。

從表4可以看出，酵母菌株YGMG-3對(duì)草莓灰霉菌孢子萌發(fā)具有較好的抑制作用，其中2×107個(gè)·mL-1濃度對(duì)草莓灰霉菌孢子萌發(fā)抑制率達(dá)到85.50%，顯著高于其他處理（P<0.05），其次為處理2×108個(gè)·mL-1，孢子抑制率達(dá)到76.04%。

3 結(jié)論與討論

生物防治在果蔬采后病害控制過(guò)程中有著越來(lái)越廣泛的應(yīng)用前景[10-11]，但是對(duì)有效生防菌的篩選是一項(xiàng)繁重而復(fù)雜的工作，在工作前期篩選得到具有安全，有效，易定殖等特點(diǎn)優(yōu)良菌株才能夠?yàn)檫M(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)和利用奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。因此，本研究從日常食材中篩選拮抗酵母菌，為生防酵母菌的安全性提供了保障。酵母菌在葡萄中普遍存在，且容易在果蔬表面定殖，這些都為篩選和開(kāi)發(fā)優(yōu)良的生防酵母菌株奠定了基礎(chǔ)。

有研究表明，有些酵母菌可以產(chǎn)生一些揮發(fā)性的抑菌物質(zhì)[12-13]，在本研究中，通過(guò)對(duì)峙培養(yǎng)和產(chǎn)揮發(fā)性物質(zhì)測(cè)定發(fā)現(xiàn)酵母菌YGMG-3均對(duì)草莓灰霉菌具有明顯的抑制效果，可能該菌株不僅能產(chǎn)生抗生素類物質(zhì)還能產(chǎn)生一些具有揮發(fā)性的抑菌物質(zhì)，酵母菌YGMG-3對(duì)草莓灰霉菌孢子萌發(fā)也有明顯的抑制作用，但是還需要對(duì)該菌株的活體抑制效果進(jìn)一步研究和確認(rèn)，對(duì)其抑菌機(jī)理進(jìn)行深入研究，為酵母菌株YGMG-3的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用奠定堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。

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