肺癌患者胸水中sST2、Fascin含量以及癌細(xì)胞 惡性增殖、侵襲基因表達(dá)水平的檢測(cè)分析

常蓓 劉廣雅 劉利敏

河南省蘭考東方醫(yī)院檢驗(yàn)科，開(kāi)封市 475300

肺癌晚期患者常伴有惡性胸水，是由于胸膜受癌細(xì)胞侵襲后導(dǎo)致胸腔積液吸收減少及局部淋巴回流受阻所導(dǎo)致[1]。早期鑒別出胸水的良惡性有助于患者的早期治療，延長(zhǎng)肺癌患者生存期[2]。目前臨床常用的胸水脫落細(xì)胞學(xué)檢查，診斷胸水良惡性的敏感度較低，臨床使用價(jià)值不高[3]。近年來(lái)，一些研究結(jié)果[4-6]顯示，可溶性生長(zhǎng)刺激表達(dá)基因2蛋白(sST2)和肌動(dòng)蛋白交聯(lián)蛋白(Fascin)在惡性胸水內(nèi)呈高表達(dá)，兩者可能與惡性胸水的發(fā)生發(fā)展具有一定的聯(lián)系，可協(xié)助判斷胸水性質(zhì)，明確診斷，為治療提供參考。為探討肺癌患者胸水中sST2、Fascin含量與癌細(xì)胞惡性增殖、侵襲的關(guān)系，本研究選取肺癌合并惡性胸水患者50例以及低蛋白血癥合并胸水或心力衰竭合并胸水患者30例作為研究對(duì)象，對(duì)兩組患者胸水的sST2、Fascin含量等進(jìn)行了比較分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月至2019年2月在我院治療的肺癌合并惡性胸水患者50例為研究組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合《早期肺癌圍術(shù)期治療專(zhuān)家共識(shí)》[7]中肺癌相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；患者出現(xiàn)胸水；(2)臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并嚴(yán)重的自身免疫性疾病；(2)合并全身感染性疾病。選取同期在我院治療的低蛋白血癥合并胸水或心力衰竭合并胸水患者30例為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者符合低蛋白血癥(血漿總蛋白質(zhì)<60 g/L或血漿白蛋白<35 g/L)或心力衰竭(進(jìn)行B型利鈉肽和N末端B型利鈉肽原檢查)的診斷標(biāo)準(zhǔn)、出現(xiàn)胸水，臨床資料完整。研究組患者男29例，女21例；年齡34～64歲，平均(46.42±3.35)歲；身體質(zhì)量指數(shù)19.2～24.3 kg/m2，平均(21.42±0.75)kg/m2。對(duì)照組患者男17例，女13例；年齡32～66歲，平均(46.55±3.24)歲；身體質(zhì)量指數(shù)19.0～24.5 kg/m2，平均(21.39±0.81)kg/m2。兩組患者的性別、年齡、身體質(zhì)量指數(shù)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法 對(duì)肺癌合并惡性胸水患者50例及蛋白血癥合并胸水或心力衰竭合并胸水患者30例的臨床及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)資料進(jìn)行比較分析?；颊咝厮畼?biāo)本的sST2、Fascin含量采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)，胸水癌細(xì)胞惡性增殖基因(LKB1、MTS1、BCL2、KI-67)及惡性侵襲基因(MMP9、N-cadherin、E-cadherin、TMSG-1、Bin-1)的表達(dá)水平采用熒光定量PCR反應(yīng)檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以x±s表示，兩組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)；對(duì)肺癌患者胸水中sST2、Fascin的含量與癌細(xì)胞惡性增殖基因、侵襲基因表達(dá)水平的關(guān)系進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者胸水中sST2、Fascin含量的比較 研究組患者的sST2、Fascin含量顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者胸水中sST2、Fascin含量的比較 (n，x±s)

2.2 兩組患者的胸水癌細(xì)胞惡性增殖基因表達(dá)水平比較 研究組患者胸水癌細(xì)胞的惡性增殖基因BCL2、KI-67的表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組，LKB1、MTS1的表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

2.3 兩組患者的胸水癌細(xì)胞惡性侵襲基因表達(dá)水平 研究組患者胸水癌細(xì)胞惡性侵襲基因MMP9、N-cadherin的表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組，E-cadherin、TMSG-1及Bin-1的表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 兩組患者的胸水癌細(xì)胞惡性侵襲基因表達(dá)水平比較 (n，x±s)

2.4 研究組患者胸水中sST2、Fascin含量與其癌細(xì)胞中惡性增殖、侵襲基因表達(dá)水平的相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，研究組患者胸水中的sST2、Fascin含量與其癌細(xì)胞中惡性增殖基因LKB1、MTS1及惡性侵襲基因E-cadherin、TMSG-1、Bin-1的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)，與惡性增殖基因BCL2、KI-67及惡性侵襲基因MMP9、N-cadherin的表達(dá)水平呈正相關(guān)。見(jiàn)表4。

表4 研究組患者胸水中sST2、Fascin含量與其癌細(xì)胞中惡性增殖、侵襲基因表達(dá)水平的相關(guān)性分析

3 討 論

惡性胸水是肺癌晚期患者的常見(jiàn)并發(fā)癥，早期判定胸水性質(zhì)、明確診斷對(duì)制定治療方案等具有重要的意義[8]。目前，臨床常用的胸膜活檢、胸水內(nèi)脫落細(xì)胞等檢查敏感度較低，臨床診斷價(jià)值有限[9-10]。

近年來(lái)研究[5-6]發(fā)現(xiàn)，sST2、Fascin蛋白在惡性胸水中高表達(dá)，可作為判斷胸水性質(zhì)及患者病情的一種方法。sST2是由ST2蛋白脫落進(jìn)入胸水形成的可溶性物質(zhì)，可與ST2結(jié)合，拮抗IL-33，抑制CD8+T細(xì)胞的腫瘤殺傷功能[11-12]。Fascin是一種表達(dá)于人體上皮細(xì)胞的細(xì)胞骨架蛋白，能與肌動(dòng)蛋白結(jié)合，促進(jìn)細(xì)胞表面?zhèn)巫闩c微棘的生成，誘導(dǎo)細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、侵襲、遷移[13-14]。

癌細(xì)胞的增殖在癌癥的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中受到多種增殖基因的調(diào)控，包括促增殖基因與抑增殖基因[15]。BCL2、KI-67屬促增殖基因，BCL2能通過(guò)抑制線粒體凋亡途徑，阻滯下游caspase的級(jí)聯(lián)凋亡，對(duì)細(xì)胞的增殖具有促進(jìn)作用；KI-67參與細(xì)胞核內(nèi)DNA復(fù)制，對(duì)細(xì)胞的增殖發(fā)揮促進(jìn)作用[16-18]。LKB1、MTS1屬于抑增殖基因，LKB1是一種絲蘇氨酸蛋白激酶，在PTEN、p53等輔助下抑制細(xì)胞增殖；MTS1對(duì)CDK4具有激活作用，能有效抑制細(xì)胞增殖；sST2、Fascin含量與癌細(xì)胞的惡性增殖呈正相關(guān)[19-21]。促侵襲基因和侵襲抑制基因在癌癥發(fā)展過(guò)程中對(duì)腫瘤組織的浸潤(rùn)具有調(diào)控作用，在肺癌患者中，促侵襲基因MMP9、N-cadherin呈高表達(dá)；上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化調(diào)控分子Bin-1抑制MYC分子活性，阻滯腫瘤侵襲性生長(zhǎng)的重要環(huán)節(jié)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化，導(dǎo)致E-cadherin增多；TMSG-1抑制MMP9等的表達(dá)，對(duì)腫瘤細(xì)胞侵襲具有阻礙作用[22-24]。

本研究結(jié)果顯示，研究組患者的sST2、Fascin含量顯著高于對(duì)照組；研究組患者胸水中癌細(xì)胞的惡性增殖基因BCL2、KI-67及惡性侵襲基因MMP9、N-cadherin的表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組；研究組患者胸水中的sST2、Fascin含量與其癌細(xì)胞中惡性增殖基因LKB1、MTS1及惡性侵襲基因E-cadherin、TMSG-1、Bin-1的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)，與惡性增殖基因BCL2、KI-67及惡性侵襲基因MMP9、N-cadherin的表達(dá)水平呈正相關(guān)。結(jié)果提示，患者胸水中的sST2、Fascin含量、惡性增殖基因BCL2、KI-67及惡性侵襲基因MMP9、N-cadherin的表達(dá)水平與患者胸水的性質(zhì)密切相關(guān)，這對(duì)明確胸水性質(zhì)并對(duì)患者進(jìn)行正確診斷和治療具有重要的參考價(jià)值。