藍(lán)刺頭多糖提取物對小鼠抗氧化性能、免疫機(jī)能的影響及其急性毒性作用研究

薩茹麗 楊 斌 格根哈斯 錢琳娜

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院 內(nèi)蒙古自治區(qū)高校動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，內(nèi)蒙古呼和浩特010018；2.內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)所，內(nèi)蒙古呼和浩特010031；3.內(nèi)蒙古自治區(qū)錫林郭勒盟正藍(lán)旗旗委辦公室，內(nèi)蒙古上都鎮(zhèn)027200）

2020 年起我國開始全面禁止在飼料中添加抗生素。在此背景下，為保證家畜機(jī)體健康、生產(chǎn)性能提高、畜產(chǎn)品安全，尋找綠色、環(huán)保、安全、高效的抗生素替代品的研究刻不容緩。藍(lán)刺頭（Echinops latifolius Tausch，ELT）又名禹州漏蘆、藍(lán)星球，為菊科藍(lán)刺頭屬植物。主要分布于南歐、東歐、北非和亞洲，在我國主要分布在東北和西北地區(qū)。中醫(yī)記載藍(lán)刺頭根、花序、果實(shí)和種子皆可入藥，其味苦、性寒、歸胃經(jīng)具有清熱解毒、理氣、止痛、排膿止血、消癰下乳等功效。蒙醫(yī)藥典中記載藍(lán)刺頭具有固骨質(zhì)、接骨愈傷、清熱止痛等功效、用于治療骨折、骨熱、刺痛癥、瘡瘍、感冒、心熱、痢疾、血熱及傳染性熱等癥狀具有良好的功效[1-2]。近年國外對于藍(lán)刺頭的研究報(bào)道主要集中在用藍(lán)刺頭屬植物治療偏頭痛、肺結(jié)核病、麻風(fēng)病、血吸蟲病、梅毒、肝病、胃病等方面[3-4]。經(jīng)分析，藍(lán)刺頭中富含有噻吩類、黃酮類、生物堿類等諸多生物活性物質(zhì)，這些天然活性提取物分別發(fā)揮著其各自獨(dú)有的抗氧化、抗炎等生物活性功能[5-6]。研究報(bào)道指出，藍(lán)刺頭多糖(ETP)作為藍(lán)刺頭所含有的天然植物多糖具有體外抗氧化、抗菌和降血糖作用[7-8]。本文在前期研究的基礎(chǔ)上欲對藍(lán)刺頭多糖(ETP)對機(jī)體免疫機(jī)能、抗氧化機(jī)能的影響作用進(jìn)行試驗(yàn)研究的同時(shí)，通過急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)、骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)和精子畸形試驗(yàn)確定藍(lán)刺頭多糖(ELP)對昆明小鼠的毒性作用，為藍(lán)刺頭提取物相關(guān)生物活性的研究與開發(fā)提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

藍(lán)刺頭花絮采摘自內(nèi)蒙古呼和浩特市大青山南麓，由內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院臨床獸醫(yī)系中獸醫(yī)教研室楊英教授鑒定。新鮮藍(lán)刺頭采摘之后流水沖洗表面灰塵，自然風(fēng)干，收集花絮后備用。使用時(shí)稱取75 ℃烘干至恒重的藍(lán)刺頭500 g，加10倍水浸泡12 h，煮沸提取2 h，過濾收集濾液，濾渣再同法煎煮1次后過濾收集濾液，將2 次提取所得濾液合并，使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至1 000 ml。邊攪拌邊緩慢加入無水乙醇至乙醇終濃度為80%，4 ℃沉淀24 h，3 000 r/min離心30 min后收集沉淀。沉淀揮去乙醇后用熱水復(fù)溶，置于冷凍干燥機(jī)中凍干，得藍(lán)刺頭粗多糖[2]，經(jīng)檢測其中多糖含量可達(dá)到(298.32±2.73) mg/g。

1.2 主要儀器與試劑

環(huán)磷酰胺（CP，北京酷來搏科技有限公司）、Giem?sa（G1010，北京索萊寶科技有限公司）、精子活體染色液（G2582，北京索萊寶科技有限公司）、全自動(dòng)酶標(biāo)儀（Synergy-HT 型，美國BIOTEK 公司）、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）、電子天平（天津天馬衡基儀器有限公司）、顯微鏡（H600L，尼康）、灌胃針、解剖刀、眼科鑷、眼科剪、固定針與固定板、恒溫箱（上海亞榮生化儀器廠）、分析天平（上海方瑞儀器有限公司）、離心機(jī)（KLO4A，湖南凱達(dá)科學(xué)儀器有限公司）等，抗氧化指標(biāo)的試劑盒購買自南京建成生物技術(shù)有限公司，血清免疫指標(biāo)的檢測由北京華英生物技術(shù)有限公司完成。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物

清潔級(jí)昆明種小鼠，由內(nèi)蒙古大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXX（蒙）2015-0001，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)為SYXK（蒙）2014-0001。小鼠生長繁殖飼料由北京科澳協(xié)力飼料有限公司提供，批號(hào)為18123111，飼養(yǎng)過程中各試驗(yàn)組小鼠全天自由采食、自由飲水，試驗(yàn)期間動(dòng)物房環(huán)境溫度為22～24 ℃，濕度45%～50%。

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 藍(lán)刺頭多糖提取物對小鼠肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

試驗(yàn)選取50只胎次相近、體重為(20.00±1.20) g左右的清潔級(jí)昆明種小鼠，隨機(jī)分為五組，每組10 只，分別為空白對照組（灌喂蒸餾水）、陽性對照組（灌喂黃芪多糖1 g/ml）、藍(lán)刺頭多糖高劑量組（灌喂1 g/ml的藍(lán)刺頭多糖）、藍(lán)刺頭多糖中劑量組（灌喂0.5 g/ml的藍(lán)刺頭多糖）和藍(lán)刺頭多糖低劑量組（灌喂0.25 g/ml的藍(lán)刺頭多糖），每只每次灌胃劑量為0.2 ml。試驗(yàn)進(jìn)行21 d后，眼球采血，脫頸處死后分離肝臟，生理鹽水沖洗干凈后裝入凍存管中迅速放入液氮內(nèi)用于抗氧化指標(biāo)的測定。超氧化物歧化酶(SOD)活性采用黃嘌呤氧化酶法測定，丙二醛(MDA)含量采用硫代巴比妥酸法測定，總抗氧化能力(T-AOC)采用Fe3+還原法測定，過氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)活性采用比色法測定。指標(biāo)測定所用試劑盒均購自南京建成生物工程研究所，測定儀器為全自動(dòng)酶標(biāo)儀（Synergy-HT 型，美國BIOTEK 公司），具體操作步驟按試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4.2 藍(lán)刺頭多糖提取物對小鼠免疫相關(guān)指標(biāo)的影響

試驗(yàn)選取50只胎次相近、體重為(20.00±1.20) g左右的清潔級(jí)昆明種小鼠，隨機(jī)分為五組，每組10只，分別為空白對照組(灌喂蒸餾水)、陽性對照組（灌喂黃芪多糖1 g/ml）、藍(lán)刺頭多糖高劑量組（灌喂1 g/ml的藍(lán)刺頭多糖）、藍(lán)刺頭多糖中劑量組（灌喂0.5 g/ml的藍(lán)刺頭多糖）和藍(lán)刺頭多糖低劑量組（灌喂0.25 g/ml的藍(lán)刺頭多糖），每只每次灌胃劑量為0.2 ml。試驗(yàn)進(jìn)行21 d后，眼球采血，脫頸處死后解剖，分離并稱量小鼠脾臟、肝臟和胸腺等器官重量，分離血清后分裝并-20 ℃凍存，用于血清IgG、LZM、IL-2、IL-6以及TNF-α含量的測定，測定方法依據(jù)北京華英公司相關(guān)試劑盒操作說明書進(jìn)行。

1.4.3 藍(lán)刺頭多糖提取物對小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)

選取20 只、體重(22.82±3.90) g，體況良好的試驗(yàn)昆明種小鼠，雌雄各半，將試驗(yàn)小鼠稱重后隨機(jī)分兩組。通過最大耐受劑量以10 g/(kg·bw)體重的劑量將藍(lán)刺頭多糖提取物灌胃給予試驗(yàn)小鼠，灌胃容量為0.4 ml/20 g 體重，24 h 內(nèi)灌胃給藥2 次，灌胃間隔為8 h。在測試之前，小鼠禁食不禁水8 h，每個(gè)測試組根據(jù)體重計(jì)算每只小鼠的灌胃劑量。在灌藥后觀察動(dòng)物的一般狀態(tài)、體重變化、中毒和死亡等情況，并對死亡動(dòng)物和到期處死動(dòng)物進(jìn)行病理解剖，觀察組織病理變化，觀察期為兩周。

1.4.4 藍(lán)刺頭多糖提取物對小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)

選取70只、體重(23.34±6.40) g，體況良好的小鼠，雌雄各35只，采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)分為5組，每組14只小鼠，分成陽性對照組[環(huán)磷酰胺40 mg/(kg·bw)]、陰性對照組[蒸餾水20 g/(kg·bw)]和藍(lán)刺頭多糖低[2.5 g/(kg·bw)]、中[5 g/(kg·bw)]、高[10 g/(kg·bw)]劑量組。各測試組的劑量按照0.4 ml/20 g 小鼠體重計(jì)算灌胃量，在24 h內(nèi)，兩次經(jīng)口灌胃。第二次灌胃6 h后，脫頸處死小鼠并取兩側(cè)股骨，剪取骨骺的每個(gè)端部，用鑷子擠出骨髓溶液，將其點(diǎn)在載玻片上預(yù)先滴好的小牛血清中，混合后推片。將推好的片子放到染色缸中曬干，用甲醇固定3 min，用Giemsa染液染色20 min后沖洗片子上的染色液，曬干，油鏡下觀察。每只動(dòng)物計(jì)數(shù)1 000個(gè)嗜多染紅細(xì)胞（PCE），微核發(fā)生率根據(jù)含微核的PCE計(jì)算千分率。計(jì)數(shù)200個(gè)嗜多染紅細(xì)胞，并計(jì)算出嗜多染紅細(xì)胞與成熟紅細(xì)胞的比例（PCE/NCE），正常的PCE/NCE范圍在0.6～1.0之間。

1.4.5 藍(lán)刺頭多糖提取物對小鼠精子畸形試驗(yàn)

選取50 只、體重(22.34±6.40) g，體況良好的雄性小鼠，采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)分為5組，每組10只，分別為陽性對照組[環(huán)磷酰胺40 mg/(kg·bw)]、陰性對照組（蒸餾水[20 g/(kg·bw)]和藍(lán)刺頭多糖低[2.5 g/(kg·bw)]、中[5 g/(kg·bw)]、高[10 g/(kg·bw)]劑量組。各測試組的劑量根據(jù)每只小鼠的體重來計(jì)算灌胃量，每日1 次，連續(xù)5 d。將不同濃度的試驗(yàn)藥品根據(jù)0.4 ml/20 g體重給藥。于第一次給藥后第35 d，脫頸處死小鼠，取下兩側(cè)附睪，放入1 ml生理鹽水中，剪碎后靜置3～5 min，慢慢搖晃后用紗布將組織碎片除去，吸取精子濾液和精子活體染色液各1滴，滴在載玻片上，混勻，加蓋蓋玻片，放置30～60 s，立即在高倍鏡下觀察。每只動(dòng)物計(jì)數(shù)各類型的畸形精子數(shù)共1 000 個(gè)，并計(jì)算出精子畸形發(fā)生率。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均使用EXCEL 初步整理后，采用SAS9.0 軟件進(jìn)行方差分析，perdiff 法進(jìn)行多重比較，P<0.05視為差異顯著，P>0.05視為差異不顯著。

2 結(jié)果

2.1 藍(lán)刺頭多糖提取物對小鼠肝臟抗氧化指標(biāo)的影響（見表1）

由表1可知，藍(lán)刺頭各試驗(yàn)劑量組之間SOD酶活性無顯著差異（P>0.05），陽性對照組SOD活性顯著高于藍(lán)刺頭中劑量組（P<0.05）；藍(lán)刺頭多糖各個(gè)試驗(yàn)劑量組之間T-AOC含量無顯著差異（P>0.05），陽性對照組T-AOC含量顯著高于空白對照組和藍(lán)刺頭多糖處理組（P<0.05）；CAT 含量檢測結(jié)果顯示，隨著藍(lán)刺頭多糖添加劑量的增加，肝臟CAT 含量有增加趨勢，且藍(lán)刺頭中劑量組CAT 含量顯著高于空白對照組（P<0.05）；各試驗(yàn)組GSH-Px含量與空白對照組相比無顯著差異（P>0.05），均顯著低于陽性對照組（P<0.05）；各試驗(yàn)處理組之間MDA含量差異不顯著（P>0.05）。

表1 藍(lán)刺頭多糖對小鼠肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

2.2 藍(lán)刺頭多糖提取物對小鼠免疫器官指數(shù)的影響（見表2）

表2 藍(lán)刺頭多糖對小鼠免疫器官指數(shù)的影響

由表2可知，藍(lán)刺頭多糖中劑量組小鼠脾臟指數(shù)顯著高于其他試驗(yàn)組（P<0.05）；藍(lán)刺頭多糖高劑量組和陽性對照組小鼠肝臟指數(shù)顯著高于其他試驗(yàn)組（P<0.05），但藍(lán)刺頭多糖高劑量組與陽性對照組間肝臟指數(shù)差異不顯著（P>0.05）；藍(lán)刺頭高劑量組小鼠胸腺指數(shù)顯著高于其他試驗(yàn)組，高于陽性對照組，且差異顯著（P<0.05）。

2.3 藍(lán)刺頭多糖提取物對小鼠血清免疫指標(biāo)的影響（見表3）

由表3 可知，與空白對照組相比，藍(lán)刺頭多糖高中低劑量組血清IgG 含量均顯著提高（P<0.05），與陽性對照組相比差異不顯著（P>0.05），高中低添加劑量三組之間差異不顯著（P>0.05）；血清TNF-α含量僅藍(lán)刺頭高劑量組顯著高于空白對照組、中劑量組與低劑量組（P<0.05），與陽性對照組間差異不顯著（P>0.05）；空白對照組與陽性對照組的IL-6 含量顯著高于藍(lán)刺頭試驗(yàn)組（P<0.05），藍(lán)刺頭高中低劑量組之間的差異不顯著（P>0.05）；各試驗(yàn)組間血清IL-2含量無顯著差異（P>0.05）；藍(lán)刺頭低劑量組LZM含量顯著低于其他各組（P<0.05），藍(lán)刺頭高劑量組與陽性對照組LZM含量顯著高于其他各組（P<0.05），藍(lán)刺頭中劑量組與空白對照組間差異不顯著（P>0.05）；由此得知與空白對照組相比，高劑量的藍(lán)刺頭多糖提取物可顯著提高血清IgG、TNF-α、LZM 含量，對血清IL-2 無顯著影響，會(huì)使血清IL-6含量顯著降低。

表3 藍(lán)刺頭多糖提取物對小鼠血清免疫指標(biāo)的影響

2.4 藍(lán)刺頭多糖急性經(jīng)口毒性作用（見表4）

表4 藍(lán)刺頭多糖對小鼠的急性毒性

由表4 可知，根據(jù)10 000 mg/(kg·bw)劑量的藍(lán)刺頭多糖對雌、雄昆明種小鼠灌胃后未見明顯的中毒癥狀，觀察14 d 后無死亡；藍(lán)刺頭多糖對雌、雄昆明種小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)的最大耐受劑量(MTD)大于10 000 mg/(kg·bw)，屬實(shí)際無毒級(jí)。

2.5 骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)（見表5）

由表5可知，雄性小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核發(fā)生率在受試動(dòng)物各劑量組間無差異(P>0.05)，且與陰性對照組相比差異不顯著(P>0.05)，各試驗(yàn)劑量組雄性小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞的微核發(fā)生率顯著低于環(huán)磷酰胺陽性對照組（P<0.05）。各試驗(yàn)劑量組試驗(yàn)結(jié)果為陰性。雌性小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞的微核發(fā)生率在受試物各劑量組之間無顯著差異(P>0.05)，且與陰性對照組相比差異不顯著(P>0.05)，陽性對照組雌性小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核發(fā)生率顯著高于其他試驗(yàn)組（P<0.05），試驗(yàn)結(jié)果為陰性。由此可知藍(lán)刺頭多糖在本試驗(yàn)條件下對受試小鼠骨髓細(xì)胞無抑制作用。

表5 藍(lán)刺頭多糖對小鼠骨髓微核發(fā)生率的影響

2.6 精子畸形試驗(yàn)（見表6）

表6 藍(lán)刺頭多糖對小鼠精子畸形發(fā)生率的影響

由表6可知，藍(lán)刺頭多糖各劑量組與陰性對照組相比小鼠精子畸形發(fā)生率無顯著差異(P>0.05)，藍(lán)刺頭各劑量組小鼠精子畸形發(fā)生率顯著低于環(huán)磷酰胺組（P<0.05），表明藍(lán)刺頭多糖在本試驗(yàn)條件下對小鼠精子無致畸作用。

3 討論

植物提取物不同于化學(xué)合成藥物，它是一類從天然植物中獲取的，具有一種或多種生物活性功能的物質(zhì)。隨著研究的不斷深入，人們發(fā)現(xiàn)植物提取物所富有的生物活性物質(zhì)如多糖類、黃酮類、酚類、萜類、揮發(fā)油類等物質(zhì)不僅具有抗菌、抗氧化、提高機(jī)體免疫力等功能，其抗病毒、抗癌、抗病、抗炎等生物活性也不斷地被發(fā)現(xiàn)、被證實(shí)。但諸多天然植物提取物具有諸多受人矚目的生物活性的同時(shí)也具有一定的毒性，尤其是其提取過程中的如溶劑萃取等諸多工藝操作使其安全性問題不容忽視。藍(lán)刺頭多糖作為天然植物提取物，前期研究證明其具有較好的體外抗氧化活性與抗菌活性[2]。且藍(lán)刺頭多糖(ELP)作為藍(lán)刺頭所含有的天然植物多糖具有良好的降血糖作用[7-8]，具有廣泛的應(yīng)用前景。因此對其急性毒性作用的研究不可缺少。本研究依據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》2003版中規(guī)定的保健食品安全性毒理學(xué)評價(jià)的四個(gè)階段內(nèi)容，以及保健食品選擇毒性試驗(yàn)的原則，對藍(lán)刺頭多糖進(jìn)行第一階段和第二階段毒理學(xué)的安全性評價(jià)。第一階段的小鼠最大耐受劑量(maximum tolerated dose,MTD)為10 000 mg/(kg·bw)，大于500 mg/(kg·bw)，小于15 000 mg/(kg·bw)根據(jù)急性毒性劑量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)判斷，藍(lán)刺頭多糖屬于實(shí)際無毒級(jí)。本研究選擇小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)與小鼠精子畸形發(fā)生率試驗(yàn)作為藍(lán)刺頭多糖遺傳毒性檢測，檢測結(jié)果證明藍(lán)刺頭多糖無遺傳毒性，這也為后續(xù)的相關(guān)動(dòng)物試驗(yàn)研究奠定了試驗(yàn)安全基礎(chǔ)。

眾所周知，機(jī)體的免疫力是可以識(shí)別和消滅各種外來侵入的異物，形成機(jī)體特定的防御機(jī)制。健全的免疫系統(tǒng)通過處理衰老、損傷、死亡、自身變性細(xì)胞以及識(shí)別處理體內(nèi)突變細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞等來維持機(jī)體健康。在機(jī)體免疫機(jī)能的研究中，研究者們通常使用免疫器官指數(shù)大小來反映機(jī)體的健康程度及免疫機(jī)能的情況。本試驗(yàn)結(jié)果顯示灌胃中劑量藍(lán)刺頭多糖提取物的小鼠脾臟指數(shù)顯著高于其他試驗(yàn)組，灌胃高劑量藍(lán)刺頭多糖提取物試驗(yàn)組的肝臟指數(shù)和胸腺指數(shù)顯著高于其他幾組，證明藍(lán)刺頭多糖可提高機(jī)體免疫器官指數(shù)，促進(jìn)免疫器官的發(fā)育。通過進(jìn)一步對機(jī)體血清免疫指標(biāo)的測定，可以發(fā)現(xiàn)，灌胃高劑量藍(lán)刺頭多糖提取物后試驗(yàn)小鼠機(jī)體的血清IgG、TNFα和LZM 含量顯著提高，對血清IL-2 無顯著影響，血清IL-6含量顯著降低。研究表明血清IL-2、TNF-α含量的升高證明機(jī)體免疫功能的加強(qiáng)[9-10]。韋曉晨等[11]研究指出人參葉多糖可顯著提高粵黃雞的免疫器官指數(shù)和血清中IL-2、IL-12、TNF-α等因子的含量，從而起到提升粵黃雞的免疫性能的作用。孫守坤等[12]研究報(bào)道刺五加酸性多糖能增加環(huán)磷酰胺致免疫功能低下小鼠的免疫器官臟器指數(shù)、提高TNF-α和IFN-γ水平從而能夠明顯增強(qiáng)免疫抑制小鼠的免疫功能。馬吉鋒等[13]研究報(bào)道飼喂枸杞多糖免疫增效劑7 d后，肉牛免疫球蛋白IgG含量明顯提高、IL-2、IL-13、IL-17、IL-19等細(xì)胞因子的分泌得到促進(jìn)，從而提高肉牛機(jī)體免疫能力。這也證實(shí)，藍(lán)刺頭多糖也可以通過提高血清IgG、TNF-α和LZM含量起到一定的免疫增強(qiáng)效果。

隨著生命科學(xué)研究的逐步深入，人們逐漸認(rèn)識(shí)到，除了免疫系統(tǒng)，生物在其長期的進(jìn)化演變過程中，形成了一套完整抗氧化防御系統(tǒng)。在生命活動(dòng)的過程中，機(jī)體內(nèi)代謝反應(yīng)所產(chǎn)生大量的氧化自由基（ROS），如果不能及時(shí)清除這些代謝產(chǎn)物，過量自由基蓄積會(huì)導(dǎo)致機(jī)體DNA氧化損傷、蛋白質(zhì)變性，不僅損傷細(xì)胞組織功能，還會(huì)引起組織器官一系列的病變，目前研究認(rèn)為這也是諸多疾病的發(fā)病原因之一。機(jī)體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)的強(qiáng)弱直接受多種抗氧化酶活性的直接影響，體內(nèi)諸多的抗氧化酶中超氧化物歧化酶（SOD）是體內(nèi)唯一的一種以氧自由基為底物的抗氧化酶，其作用機(jī)理是歧化氧自由基生成H2O2，這樣不僅能有效地清除氧自由基，又能夠阻斷毒性更強(qiáng)的羥基自由基的生成，減少M(fèi)DA等過氧化物的產(chǎn)生，從而起到保護(hù)細(xì)胞避免氧化損傷的作用。GSH-Px特異性催化GSH 對H2O2的還原反應(yīng)，從而保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性；CAT 在一定條件下可直接分解H2O2，保護(hù)機(jī)體細(xì)胞穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境及細(xì)胞的正常生物活性；T-AOC則可以反映機(jī)體的健康程度以及機(jī)體抗氧化作用的強(qiáng)弱[14-16]。研究證實(shí)，植物多糖類提取物可通過提高機(jī)體抗氧化酶活性使機(jī)體抗氧化機(jī)能提高。如付昊等[17]研究報(bào)道指出實(shí)驗(yàn)小鼠連續(xù)服用不同劑量(150、300、550 mg/kg)的熟地黃多糖對小鼠肝臟和血清中SOD、GSH-Px的活性具有一定增強(qiáng)作用，對肝臟和血清中的MDA具有明顯降低效果。許女等[18]研究發(fā)現(xiàn)雞腿菇實(shí)體多糖可顯著升高實(shí)驗(yàn)小鼠心、肝、腎、血中GSH-Px、SOD、CAT、T-AOC的活性，顯著降低MDA 含量，具有較好的抗氧化作用。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，灌胃藍(lán)刺頭多糖后，試驗(yàn)小鼠肝臟CAT 酶活性有一定的增高趨勢，SOD、GSH-Px、T-AOC 活性和MDA 含量等無顯著變化，但隨著藍(lán)刺頭多糖提取物添加劑量的增加MDA 含量有下降趨勢。研究報(bào)道顯示藍(lán)刺頭多糖提取物對氧化損傷所致的I 型糖尿病小鼠胰島細(xì)胞具有一定的修復(fù)和保護(hù)作用，而對正常小鼠無此作用[19]，結(jié)合藍(lán)刺頭多糖體外抗氧化結(jié)果，認(rèn)為藍(lán)刺頭多糖提取物對正常的機(jī)體內(nèi)處于平衡狀態(tài)的氧化還原系統(tǒng)無明顯調(diào)節(jié)作用，因此其對于疾病或應(yīng)激狀態(tài)下機(jī)體內(nèi)的氧化還原系統(tǒng)的作用有必要進(jìn)行更深入的研究。

4 結(jié)論

藍(lán)刺頭多糖對小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)的最大耐受劑量超過10 000 mg/(kg·bw)，屬實(shí)際無毒級(jí)、對受試小鼠無致畸作用，同時(shí)還具有提高機(jī)體免疫功能的作用與抗氧化功能的潛力，可作為飼料添加劑、食品保健劑繼續(xù)深入研究與開發(fā)。