含山銀花-野菊花提取物防曬霜的初步研制*

高 端，葉 萍，王 艷，廖東娜，鄧建斌，陳 蓉，齊 娜,2

(1 桂林醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，廣西 桂林 541000；2 南方醫(yī)科大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，廣東 廣州 510315)

近些年來，紫外線導(dǎo)致的皮膚老化受到人們的持續(xù)關(guān)注。皮膚在長(zhǎng)期的紫外光輻射下，出現(xiàn)膚色加深、曬傷、皮膚炎癥性疾病甚至是皮膚癌[1]。紫外線中對(duì)人體皮膚造成傷害的主要是低頻長(zhǎng)波UVA(Ultraviolet radiation A，320～400 nm)和中頻中波UVB(Ultraviolet radiation B，280～320 nm)。穿透大氣層的紫外線中UVA占比95%，UVB僅占5%。但UVB能夠穿透表皮及真皮的上層，盡管占比較少但會(huì)導(dǎo)致更嚴(yán)重的皮膚損傷[2]。所以UVB是應(yīng)該重點(diǎn)預(yù)防的紫外線波段。

長(zhǎng)期的紫外光輻射下，皮膚組織細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生氧化應(yīng)激，產(chǎn)生過量的活性氧簇，能夠破壞細(xì)胞膜的完整性和細(xì)胞內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)，進(jìn)而引起細(xì)胞炎癥、細(xì)胞凋亡及腫瘤的形成[3]。防曬霜添加天然植物防曬成分是近年來的一種全新防曬理念，可同時(shí)滿足大眾對(duì)防曬和護(hù)膚的需求。相關(guān)文獻(xiàn)[4-5]報(bào)道了多種植物、水果等天然產(chǎn)物對(duì)紫外線的吸收，抗自由基和抗氧化作用。添加具有抗氧化活性的植物成分或許是防曬產(chǎn)品發(fā)展的新方向。

山銀花為忍冬科植物紅腺忍冬(LonicerahypoglaucaMip)、灰氈毛忍冬(L.macranthoidesHand.Mazz.)、華南忍冬(L.confusaDC.)和黃褐毛忍冬(LonicerafulvotomentosaHsuetSCCheng)的干燥花蕾或帶初開的花[6]。對(duì)環(huán)境要求較低，在我國(guó)山地丘陵地帶分布廣泛，野生資源豐富且人工栽培、種植發(fā)展較好[7]。綠原酸作為忍冬科植物山銀花的有效成分，該物質(zhì)可以抗菌、抗病毒，分子中的羥基因其不穩(wěn)定可形成抗氧化氫自由基，該自由基可以保護(hù)膠原免受活性氧等自由基的損害，從而降低紫外線對(duì)皮膚的殺傷力[8]。

野菊花為菊科植物野菊ChrysanthemumindicumL.的干燥頭狀花序[6]。野菊花資源豐富，廣泛分布于我國(guó)各地。黃酮是菊科植物野菊花的主要活性成分之一，臨床上用于清熱解毒、抗菌消炎、抵抗病毒、降血壓，黃酮類成分也是目前國(guó)內(nèi)外公認(rèn)的具有抗氧化活性的成分之一[9]。因此，推測(cè)山銀花-野菊花的提取物具有抗氧化活性，將其加入配方制備具有防曬作用的防曬霜以增加防曬效果，并評(píng)價(jià)制備的防曬產(chǎn)品在UVB區(qū)紫外光的吸收值以評(píng)價(jià)其防曬性能。

1 實(shí) 驗(yàn)

1.1 材 料

山銀花(Lonicera hypoglauca中藥材)、野菊花(Dendranthema indicum中藥材)，桂林吉爾康大藥房；單硬脂酸甘油酯(20150316，AR)，天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司；白凡士林，南京金陵石油化工公司化工一廠；十六醇(105120140202，藥用輔料)，湖南爾康制藥股份有限公司；液體石蠟、95%乙醇(180702)、丙三醇(150712)，西隴化工股份有限公司；油酸鈉(J24M6Y1，CP)，源葉生物；泊洛沙姆188(WPMG557C)，德國(guó)BASF公司；二氧化鈦，上海聯(lián)楷日用化工有限公司；尿囊素(029804)，山東省臨沂市蘭山區(qū)綠森化工有限公司；寇香香精(F00069)，青島優(yōu)索化學(xué)科技有限公司。

1.2 儀 器

SHB-III循環(huán)水式多用真空泵，鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司；RE-2000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，上海亞榮生化儀器廠；紫外分光光度計(jì)，上海美譜達(dá)儀器有限公司；BT224S電子天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 山銀花、野菊花醇提物的提取

根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道及預(yù)實(shí)驗(yàn)確定的提取條件，山銀花藥材加入75%乙醇用索氏提取器避強(qiáng)光回流處理4 h，將其提取液過濾，取濾液，在60～80 ℃，0.08 MPa，50～60 r/min條件下避強(qiáng)光旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，得醇提物膏[10]，稱重，計(jì)算產(chǎn)率，4 ℃密閉避光儲(chǔ)存，備用。

野菊花藥材用8倍量75%乙醇溶液先浸泡20 min，再利用超聲波清洗機(jī)超聲提取3次，功率為60 Hz，每次提取時(shí)間為30 min，濾過，合并濾液，在80～90 ℃，0.08 MPa，50～60 r/min條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，得醇提物膏，再加入95%乙醇溶液溶解，使乙醇濃度為70%，抽濾，取濾液，于80～90 ℃，0.08 MPa，50～60 r/min條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至無醇，得醇提物膏，稱重，計(jì)算產(chǎn)率，4 ℃密閉儲(chǔ)存，備用。

醇提物膏產(chǎn)率%=(醇提物膏量/藥材量)×100%

2.2 醇提物紫外吸收測(cè)定

將山銀花和野菊花醇提物膏用75%乙醇配成質(zhì)量濃度為0.2 g/L的樣品液，將兩樣品液按比例配成不同配比的混合液，在280～400 nm波長(zhǎng)處進(jìn)行紫外掃描。

2.3 防曬霜的制備

參考文獻(xiàn)[11]的方法，在室溫下稱量藥品，按照防曬霜配方分別將油相和水相原料加熱攪拌均勻，溫度為75～80 ℃，緩慢將油相倒入水相直至油相全部混溶入水相中，再乳化攪拌40 min，同時(shí)加入防腐劑尼泊金乙酯，降溫至50 ℃時(shí)加入香精，45 ℃時(shí)停止乳化，冷至室溫即為產(chǎn)品。為探討其最佳乳化溫度，在65 ℃、70 ℃、75 ℃、80 ℃、85 ℃五組不同的乳化溫度下乳化，取適量膏體觀察其狀態(tài)。

表1 質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5%防曬霜配方

2.4 防曬霜的性能測(cè)定

2.4.1 基本性狀

觀察產(chǎn)品外觀、細(xì)膩度，測(cè)量pH(稱取5.0 g樣品，加100 mL純化水，加熱微沸，攪勻，冷卻，過濾，測(cè)量pH)取適量于手背涂抹感受其粘稠度，是否易于涂抹等[12]。

2.4.2 離心實(shí)驗(yàn)

為評(píng)價(jià)其性狀，選擇適國(guó)人膚質(zhì)且防曬性能良好的國(guó)產(chǎn)市售產(chǎn)品美加凈和美膚寶防曬霜作為陽性對(duì)照組；以不加防曬成分的基質(zhì)作為空白輔料組，稱取不同濃度的樣品和對(duì)照品各10 g，裝入具有刻度的離心管內(nèi)，以2000 r/min離心30 min，觀察是否分層。

2.4.3 穩(wěn)定性測(cè)試

準(zhǔn)確稱取5.0 g防曬霜樣品和對(duì)照品各三份，分別密封裝于培養(yǎng)皿中并放置在40 ℃培養(yǎng)箱、4 ℃冰箱和常溫環(huán)境中。24小時(shí)后取出以恢復(fù)室溫，稍稍傾斜，觀察是否產(chǎn)生沉淀，油水分離是否發(fā)生[13]。并于常溫自然條件中長(zhǎng)期留存觀察有無色澤改變，有無霉變和油水分離現(xiàn)象。

2.4.4 防曬霜紫外吸收測(cè)定

為評(píng)價(jià)其防曬功效，選擇適國(guó)人膚質(zhì)且防曬性能良好的國(guó)產(chǎn)市售產(chǎn)品美加凈和美膚寶防曬霜作為陽性對(duì)照組；一般薄膜法、膠帶法適用于普通膏霜、奶液產(chǎn)品吸光度的檢測(cè)[14]，故選用適合膠帶法檢測(cè)吸光度的普通膏霜?jiǎng)┬汀⒖嘉墨I(xiàn)[14]中的方法取樣品和對(duì)照品各0.1 g均勻涂抹在3 M膠帶紙上，放置20 min，取出貼附于石英比色皿透光側(cè)，在200～400 nm波長(zhǎng)段掃描并得出該波長(zhǎng)段的紫外吸收值。根據(jù)吸收曲線，在280～320 nm(UVB區(qū))內(nèi)每隔10 nm紫外波長(zhǎng)獲得一個(gè)紫外吸收值[14]。某波段的紫外吸收值為該波段內(nèi)各點(diǎn)的算術(shù)平均值。根據(jù)QB/T2410-1998規(guī)定的防曬化妝品UVB區(qū)防曬效果的評(píng)價(jià)方法(表2)進(jìn)行效果評(píng)價(jià)。

表2 防曬霜UVB段防曬效果評(píng)價(jià)

3 結(jié) 果

3.1 醇提物性狀

索氏回流法提取的山銀花醇提物為黃綠色，有淡淡清香味，醇提物膏產(chǎn)率為19.4%；超聲法提取的野菊花醇提物為黃棕色，有較濃氣味，醇提物膏產(chǎn)率為6.3%。

3.2 醇提物紫外吸收?qǐng)D譜

將山銀花和野菊花醇提物膏配成的樣品液，將兩樣品液按比例配成不同配比的混合液，在280～400 nm波長(zhǎng)處進(jìn)行紫外掃描，結(jié)果如圖3所示。從紫外掃描圖譜可以看出，當(dāng)V(山銀花醇溶液)：V(野菊花醇溶液)=2:1時(shí)的紫外吸收效果最好，所以在制備防曬霜時(shí)兩者按質(zhì)量比2:1的比例加入即可，當(dāng)兩樣品液的比例超過2:1時(shí)，混合液的顏色過深且不利于進(jìn)行紫外掃描。

圖1 野菊花紫外掃描圖譜

圖2 山銀花紫外掃描圖譜

圖3 不同配比的混合液紫外掃描圖譜(山銀花醇溶液：野菊花醇溶液)

3.3 防曬霜的性狀和基本性能

空白輔料組：不含野菊花和山銀花提取物的防曬霜；

市售組：市售1——美加凈，SPF30 PA+++；

市售2——美膚寶，SPF45 PA+++；

樣品組：質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5%、1%、1.5%山銀花和野菊花提取物的防曬霜。

防曬霜成品如圖4所示。該霜?jiǎng)┵|(zhì)地均勻細(xì)膩、易于涂抹。按2.4.1項(xiàng)下的方法測(cè)定其pH，測(cè)得pH為6.5～6.9，符合外用乳劑pH小于8.3的要求，其他各項(xiàng)結(jié)果如表3所示。在不同乳化溫度下測(cè)定了其對(duì)產(chǎn)品性能的影響，結(jié)果見表4，根據(jù)表4的結(jié)果，選擇75～80 ℃作為防曬霜制備的乳化溫度。

表4 乳化溫度對(duì)產(chǎn)品性能的影響

圖4 含0.5%防曬成分的防曬霜

表3 防曬霜的性能指標(biāo)結(jié)果

3.4 紫外吸收測(cè)定結(jié)果

測(cè)定制備的防曬產(chǎn)品和在280～320 nm(UVB區(qū))紫外光的吸收值，吸光度的大小可以判斷產(chǎn)品在UVB區(qū)紫外光的吸收效果。表5為各組防曬霜在UVB區(qū)的平均吸光度，隨著山銀花-野菊花提取物加入量的增多，平均吸光度也隨之增大，即產(chǎn)品在UVB區(qū)紫外光的吸收效果越來越好。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)如表2所示，實(shí)驗(yàn)制備的防曬霜具有一定的防曬作用，滿足評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的部分使用條件。

表5 不同濃度的防曬霜及市售防曬霜在UVB區(qū)的紫外吸光度

4 討 論

4.1 乳化溫度對(duì)產(chǎn)品性能的影響

由表4可知，溫度對(duì)產(chǎn)品性能的影響較大。產(chǎn)品的乳化效果跟溫度的高低有關(guān)，乳化溫度過高，原料成分在高溫下活性增強(qiáng)導(dǎo)致一些物質(zhì)揮發(fā)或分解，使得配方失調(diào)，產(chǎn)品可能會(huì)因此變得粗糙；而溫度過低會(huì)使得部分物質(zhì)溶解不完全，從而使產(chǎn)品乳化不夠，膏體凹凸不平，且會(huì)發(fā)生分層。一般乳化溫度控制在產(chǎn)品的凝固點(diǎn)以上10 ℃左右，而本產(chǎn)品的凝固點(diǎn)在60～65 ℃，所以較適宜的溫度控制在75～80 ℃左右即可。

4.2 提取物含量對(duì)產(chǎn)品穩(wěn)定性的影響

實(shí)驗(yàn)制得的防曬霜膏體均勻細(xì)膩，稠度適中，易于涂抹，pH在6.5～6.9范圍內(nèi)，符合外用乳劑要求。由表3可以看出，當(dāng)提取物加入量在1%以上時(shí)該防曬霜耐熱性不夠好會(huì)產(chǎn)生油水分離現(xiàn)象，但耐寒性較好。離心實(shí)驗(yàn)中，提取物加入量在1%以上時(shí)容易產(chǎn)生分層，可能原因是提取物純度不夠，所含的有效防曬成分過低，而加入提取物的量過多破壞了該霜基質(zhì)的穩(wěn)定性從而破乳產(chǎn)生分層。自然條件下留存四個(gè)月后，除了1.5%樣品組的色澤有變化外其他樣品組均無變化，自然條件下的穩(wěn)定性較好。

4.3 防曬功效評(píng)價(jià)

由表3和表5的數(shù)據(jù)結(jié)果可以看出，當(dāng)山銀花和野菊花提取物的加入量為0.5%時(shí)，防曬霜的穩(wěn)定性較好且具有一定的防曬作用；當(dāng)加入量在1%以上時(shí)，防曬霜體系不穩(wěn)定但具有較好的防曬作用，可能是由于兩者中的黃酮等成分具有的抗氧化活性。同時(shí)加入山銀花和野菊花提取物的加入量越多，其防曬效果也越好。與市售防曬霜美加凈和美膚寶相比，實(shí)驗(yàn)所制得的防曬霜紫外吸光度較小，仍具有一定的防曬作用，依據(jù)表2的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，該防曬霜適于陰天或冬日使用。

5 結(jié) 論

本實(shí)驗(yàn)所制備的含質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5%的山銀花-野菊花提取物防曬霜，外觀為淡黃白色、質(zhì)地均勻細(xì)膩、易于涂抹、耐寒耐熱性和穩(wěn)定性均良好，具有一定的防曬效果，該防曬霜適于陰天或冬日使用。綜上，山銀花-野菊花提取物可用作防曬霜中的天然成分添加劑，山銀花和野菊花提取物在防曬產(chǎn)品中的應(yīng)用具有很大的開發(fā)潛能。