食品中脫氫乙酸的檢測(cè)方法概述

□ 黎良菊 王 川 尹 超 重慶市計(jì)量質(zhì)量檢測(cè)研究院

脫氫乙酸（簡(jiǎn)稱DHA）具有抗菌性，常被作為食品生產(chǎn)中的防腐劑使用。隨著人們對(duì)食品安全的重視，各類研究者也開始關(guān)注食品添加劑對(duì)人體健康的危害問題。戴有金等[1]通過脫氫乙酸鈉對(duì)于大小鼠的急性毒性試驗(yàn)研究確認(rèn)了脫氫乙酸及其鈉鹽屬于WHO化學(xué)物毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)中的低毒級(jí)別，對(duì)人體健康存在潛在威脅。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 2760—2014《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定了脫氫乙酸的使用范圍和最大使用量，但是仍有部分食品生產(chǎn)企業(yè)超范圍或超量使用脫氫乙酸。因此，快速準(zhǔn)確的定性定量檢測(cè)脫氫乙酸的含量尤為重要。目前常用的方法包括高效液相色譜法、氣相色譜法、紫外分光光度計(jì)法等。本文就此類方法進(jìn)行簡(jiǎn)要分析總結(jié)。

1 脫氫乙酸的檢測(cè)方法

1.1 高效液相色譜法

脫氫乙酸難溶于水，易溶于堿性水溶液，故在液相色譜法檢測(cè)脫氫乙酸的前處理過程中常用濃度為20 g/L的NaOH溶液來調(diào)節(jié)樣品溶液的pH值，使得溶液呈弱堿性，從而提取出樣品中的脫氫乙酸，然后進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)于富含蛋白質(zhì)的樣品，使用不同的沉淀劑對(duì)結(jié)果有不同的影響。楊海昕等[2]使用硫酸銅溶液和氫氧化鈉溶液作為沉淀劑，代替國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.121—2016中推薦的乙酸鋅和亞鐵氰化鉀溶液，實(shí)驗(yàn)結(jié)果良好，回收率在87%～92%。吳寧寧等[3]研究了不同流動(dòng)相對(duì)脫氫乙酸檢測(cè)結(jié)果的影響。結(jié)果表明，甲醇+0.1%磷酸水溶液(55+45)作為流動(dòng)相可以將脫氫乙酸的峰寬從1.5 min降低至0.5 min，明顯改善色譜峰拖尾問題。樣品在低、中、高濃度加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)中的加標(biāo)回收率也都在90%以上。磷酸替代流動(dòng)相中的乙酸銨，增強(qiáng)了流動(dòng)相的酸性，改善了色譜圖中目標(biāo)峰拖尾的問題，提高了定量的準(zhǔn)確度。

1.2 氣相色譜法

氣相色譜法檢測(cè)脫氫乙酸主要是利用其在酸性條件下會(huì)發(fā)生水解這一原理，將脫氫乙酸鈉鹽水解成脫氫乙酸，再利用乙酸乙酯提取，然后用氣相色譜儀分析檢測(cè)。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.121—2016的氣相色譜法中有推薦的檢測(cè)條件，但是并不是最優(yōu)條件。朱自德等[4]研究了初始溫度和升溫速率對(duì)色譜峰分離度的影響，較低的初始溫度和較慢的升溫速率能得到較好的分離度，升溫速率變快，分離度會(huì)下降。當(dāng)初始溫度為80 ℃，升溫速率為12 ℃/min時(shí)，脫氫乙酸的色譜峰分離度最好，為1.8。另外分流比也直接影響峰面積，分流比越小，峰面積越大，雜質(zhì)的影響也越大，柱子的使用壽命越短，故綜合考慮，分流比采用10∶1。

脫氫乙酸分子能發(fā)生烯醇式重排因而顯弱酸性，在沒有保護(hù)劑的情況下，很容易在氣相色譜中被吸附，出現(xiàn)拖尾或不出峰的情況。張敬波等[5]發(fā)現(xiàn)丙三酮和苯甲酸對(duì)脫氫乙酸具有保護(hù)作用，且苯甲酸效果更好，這可能是因?yàn)楸郊姿岬乃嵝越档土嗣摎湟宜岱肿拥闹嘏欧磻?yīng)，從而起到保護(hù)作用。隨著苯甲酸的添加濃度逐漸增大，脫氫乙酸的峰面積逐漸增大，峰寬逐漸減小，當(dāng)苯甲酸的添加濃度大于1.5 g/L時(shí)，脫氫乙酸的峰面積趨于飽和。保護(hù)劑的加入極大的提高了方法的靈敏度和重復(fù)性，為極性物質(zhì)的色譜分析提供了參考。

1.3 其他檢測(cè)方法

紫外分光光度法是利用脫氫乙酸對(duì)光的特征吸收來進(jìn)行檢測(cè)的。陳丹萍等[6]利用水蒸氣在酸性條件下蒸餾調(diào)味料制品中的脫氫乙酸，并用有機(jī)溶劑萃取后，用紫外分光光度計(jì)在308 nm波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè)，其加標(biāo)回收率在94.1%～103.7%，精度在0.4%～4.7%。該方法操作簡(jiǎn)單，不涉及大型儀器，檢測(cè)成本相對(duì)較低，比較合適一些簡(jiǎn)單樣品中脫氫乙酸的快速檢測(cè)。而面對(duì)基質(zhì)比較復(fù)雜的樣品，或多或少的雜質(zhì)都會(huì)影響最終的吸光度，進(jìn)而影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。因此該方法的適用范圍有限。

2 結(jié)論

總的來說，目前脫氫乙酸的檢測(cè)方法主要是氣相色譜法和高效液相色譜法，以及少量的其他方法。隨著人們對(duì)美食的不斷研發(fā)創(chuàng)新，食品種類越來越復(fù)雜，這給食品檢驗(yàn)也帶來了越來越多的挑戰(zhàn)，特別是在前處理方面。所以在今后的研究中需要通過不斷改進(jìn)前處理方法，優(yōu)化檢測(cè)條件，以建立高效、快捷的檢測(cè)方法，為食品安全管理提供更好的技術(shù)支持。