快速測試片在食品微生物檢測中的應(yīng)用

□ 李 燕 任中鋒 甘肅奇正實業(yè)集團有限公司

食品安全問題受到全社會的高度重視，尤其是在物質(zhì)生活條件逐步改善的趨勢下，人們對食品質(zhì)量與安全提出了更高的要求，防止微生物污染等問題的出現(xiàn)，切實保障人們的生命健康安全。微生物會在食品的生產(chǎn)加工、儲存運輸和銷售等環(huán)節(jié)對其造成污染，進而引起食物中毒或者食品變質(zhì)。病原菌種類較為豐富，當其在食品中的含量超標時，將會直接威脅食用者健康。開展有效的微生物檢測工作，是預防上述問題的關(guān)鍵，國家為此也制定了相應(yīng)的檢測標準，以實現(xiàn)對食品安全問題的有效控制，防止公共衛(wèi)生事件的發(fā)生。傳統(tǒng)檢測方法不僅效率低下，而且需要動用較多的人力、物力和財力?？焖贉y試片的應(yīng)用則能夠增強操作的便捷性，符合當前社會生產(chǎn)的快節(jié)奏特點。

1 快速測試片在食品微生物檢測中的應(yīng)用特點

在樣品檢測中應(yīng)用快速測試片，能夠大大提升檢測工作的效率，同時由于無需使用試劑輔助，提升了檢測的便捷性?？焖贉y試片的環(huán)保性也較好，不會產(chǎn)生較多的廢渣和廢液等，在室外檢測中的應(yīng)用較多?？焖贉y試片的應(yīng)用，能夠?qū)崿F(xiàn)取樣和接種的同步實施，保障檢測結(jié)果的可靠性，防止出現(xiàn)較大的誤差[1]。應(yīng)用快速測試片所需時間較少，因此能夠有效防止菌群繁殖對檢測結(jié)果造成的影響。

2 快速測試片在食品微生物檢測中的應(yīng)用措施

2.1 以濾紙為載體的測試片

2.1.1 菌落總數(shù)測試片

在選擇濾紙時應(yīng)該嚴格檢查其質(zhì)量，確保其無毒且具有較好的吸附力和密度，4.0 cm×5.0 cm為濾紙尺寸合理值。在無菌培養(yǎng)基當中加入TTC，應(yīng)用無菌濾紙進行吸附，在干燥處理后裝入聚丙烯口袋并密封。氧化還原性是TTC的基本特性，能夠與氫反應(yīng)生成紅色三苯甲酯，對其中的紅點數(shù)量進行計算，則能夠得到細菌數(shù)量。在應(yīng)用菌落總數(shù)測試片時，應(yīng)該嚴格控制TTC用量，防止對菌體形成抑制，增強檢測的靈敏性。培養(yǎng)箱溫度控制在37 ℃為宜，培養(yǎng)時間在17 h左右。

2.1.2 基于染色法的大腸菌群測試片

在制作浸液時，需要對乳化劑、乳糖、瓊脂、蛋白胨、TTC和溴甲酚紫等原材料的數(shù)量和濃度加以控制，將滅菌環(huán)境溫度、浸泡溫度和烘干溫度分別控制在115、60 ℃和55 ℃左右，6.8～7.0為合理的pH范圍，培養(yǎng)時間同樣控制在17 h左右。當有紅色斑點出現(xiàn)，同時外周有黃暈，紅色斑點存在于黃色背景當中時則為陽性。培養(yǎng)液的選擇性和生物酶作用的特異性，是影響大腸菌群測試片應(yīng)用效果的直接因素，在檢測工作當中應(yīng)該對TTC和瓊脂粉的用量加以嚴格控制。

2.1.3 基于熒光法的大腸桿菌紙片

細菌會產(chǎn)生代謝產(chǎn)物與代謝酶，應(yīng)用大腸桿菌紙片熒光法對食品微生物進行檢測時，主要是應(yīng)用酶-底物反應(yīng)法，對大腸菌落相關(guān)酶的活性進行檢測，能夠?qū)崿F(xiàn)對微生物的有效計數(shù)。培養(yǎng)溫度以37 ℃為宜，熒光燈的波長選擇365 nm，可以檢測濃度在0～4 cfu/mL的微生物，能夠起到良好的定性與定量分析效果。

2.2 以Petrifilm為載體的測試片

2.2.1 菌落總數(shù)測試片

在紙片中央滴入1 mL樣品并覆蓋，保持樣品的均勻性。為了保障凝膠的良好固化效果，需要靜置1 min，恒溫箱溫度控制在37 ℃，培養(yǎng)時間在48 h左右。

2.2.2 霉菌、酵母菌測試片

在霉菌、酵母菌測試片當中含有營養(yǎng)物質(zhì)和菌落生長指示劑等，為了對細菌的生長加以抑制，通常需要使用抗生素。培養(yǎng)環(huán)境溫度控制在21～25℃，培養(yǎng)時間通常在3～5 d左右。酵母菌的菌落一般較小，而且具有清晰可觀的外邊緣，在顏色上也具有良好的均一性特點，菌落通常隆起。霉菌菌落通常較大，邊緣不夠清晰，顏色呈現(xiàn)出一定的雜亂性，而且具有扁平性。

2.2.3 大腸菌檢測紙片

葡萄糖苷酸酶指示劑和改良的VRB培養(yǎng)基存在于大大腸桿菌檢測紙片當中，β-葡萄糖苷酸酶主要是由大腸桿菌產(chǎn)生，能夠在指示劑的作用下生成藍色沉淀物，氣體由發(fā)酵乳糖產(chǎn)生，在膠膜作用下連接各個氣泡，菌落一般呈深藍色或者藍色。由于大腸菌群菌落的存在，培養(yǎng)基會呈暗紅色，因此在檢測大腸菌群時則需要對氣泡進行計數(shù)。通過顏色和氣泡數(shù)，有效判斷大腸菌群和大腸桿菌及其含量。

3 結(jié)語

以濾紙為載體的測試片和以Petrifi lm為載體的測試片，是當前快速測試片的基本類型，對于食品微生物的檢測可以起到良好的效果，具有操作便捷、結(jié)果可靠的特點。在檢測工作當中，應(yīng)該明確不同測試片的應(yīng)用條件及要點，從而切實發(fā)揮其快速檢測的優(yōu)勢，保障食品安全。