骨肉瘤相關(guān)長鏈非編碼RNA調(diào)控腫瘤上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展

何思思（通訊作者） 張大權(quán) 賀旭 王彥哲

（1遵義醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤科 貴州 遵義 563003）

（2遵義醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院腫瘤科 貴州 遵義 563003）

（3遵義醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院放療中心 貴州 遵義 563003）

骨肉瘤是兒童及青少年中最常見腫瘤之一。在骨肉瘤疾病發(fā)展過程中，上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）發(fā)揮重要作用。長鏈非編碼RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)在腫瘤中存在異常表達(dá)。近年來很多報道通過進(jìn)一步探究骨肉瘤發(fā)生EMT的分子機(jī)制為有效治療提供新的證據(jù)。本文就LncRNA調(diào)控腫瘤上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1.EMT與lncRNA概述

非編碼RNA（non-coding RNA,lncRNA）作為保守的非蛋白質(zhì)編碼RNA，總長度超過200個核苷酸。lncRNA參與了腫瘤細(xì)胞的重要生物學(xué)行為和病理過程，包括細(xì)胞發(fā)育、凋亡、增殖，侵襲轉(zhuǎn)移及表觀遺傳調(diào)控。上皮-間充質(zhì)過程伴隨上皮細(xì)胞標(biāo)記分子的丟失和黏附連接蛋白的表達(dá)增強(qiáng)。EMT也被證實與更高的腫瘤復(fù)發(fā)率、預(yù)后差、生存率減低密切相關(guān)。近來大量研究提示骨肉瘤發(fā)生EMT的過程中l(wèi)ncRNA扮演重要角色。

2.與骨肉瘤EMT過程相關(guān)的lncRNA

2.1 FTX

長非編碼RNA Ftx是一個新發(fā)現(xiàn)的與癌癥的生長和轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因，定位于chrXq13。該基因高表達(dá)與骨肉瘤淋巴血管浸潤和臨床分期有關(guān)[1]。Bo Li等發(fā)現(xiàn)通過轉(zhuǎn)染lncRNA Ftx觀察到人骨肉瘤細(xì)胞株Saos2和HOS遷移和侵襲能力增強(qiáng)。經(jīng)蛋白印跡發(fā)證實高表達(dá)lncRNA Ftx組上皮標(biāo)志物E-cadherin和N-cadherin明顯下調(diào)。筆者認(rèn)為該研究更強(qiáng)調(diào)臨床預(yù)后的意義，并未進(jìn)一步展開動物實驗及治療模型。

2.2 AFAP1-AS1

肌動蛋白絲相關(guān)蛋白1-反義RNA 1（AFAP1-AS1）被證實在多癌種包括鼻咽癌、腸癌及膽管癌中均呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)。該基因誘導(dǎo)骨肉瘤EMT依賴于激活miR-4695-5p/TCF4-βcatenin信號通路[2]。雖然該研究提示AFAP1-AS1可作為骨肉瘤EMT的正向調(diào)控因素，但目前該基因調(diào)控骨肉瘤EMT過程的文獻(xiàn)尚少，需待進(jìn)一步研究。

2.3 CRNDE

CRNDE位于16號染色體上，被鑒定為大腸腺瘤和腺癌中高表達(dá)的新基因。轉(zhuǎn)移性骨肉瘤患者CRNDE明顯高表達(dá)。CRNDE耗竭抑制了腫瘤的生長，抑制Notch1信號通路傳導(dǎo)進(jìn)而降低EMT過程[3]。由此可見lncRNA CRNDE調(diào)控骨肉瘤EMT過程中Notch信號通路發(fā)揮了至關(guān)重要的作用。

2.4 PCAT1

一項納入30例骨肉瘤病例的研究表明，與正常骨組織相比，PCAT1在骨肉瘤組織中表達(dá)明顯上調(diào)[4]。PCAT1可作為骨肉瘤患者的總體生存期預(yù)測因素。MG-63細(xì)胞中PCAT1的過表達(dá)增強(qiáng)了細(xì)胞增殖、侵襲、遷移能力及EMT相關(guān)分子標(biāo)志物改變，明顯促進(jìn)了EMT過程，而敲低U2OS細(xì)胞中的PCAT1發(fā)揮了相反的作用。由此筆者推測PCAT1可能成為骨肉瘤治療的重要靶點(diǎn)。

2.5 DANCR

是一種在腫瘤中被發(fā)現(xiàn)的高表達(dá)的長鏈非編碼RNA。DANCR上游啟動子存在STAT3和NF-κB的轉(zhuǎn)錄結(jié)合位點(diǎn)。NianJiang等人的研究中證實lncRNA DANCR的過表達(dá)增加了骨肉瘤細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲和EMT過程，并在體內(nèi)促進(jìn)了肺轉(zhuǎn)移[5]，此項研究中更證實了DANCR的過表達(dá)增加了腫瘤細(xì)胞干性，這也進(jìn)一步證實了DANCR作為骨肉瘤EMT過程的正向調(diào)節(jié)作用。

2.6 miR210HG

作為miR210宿主基因，近來研究報道該基因在骨肉瘤中也發(fā)揮了重要作用。Jiang Li報道了miR210HG表達(dá)異常顯著增加患者預(yù)后不良，使生存率降低[17]。體外實驗中通過敲低miR210HG明顯抑制骨肉瘤細(xì)胞的增殖，侵襲以及上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)標(biāo)志物（N-鈣黏著蛋白和波形蛋白）的表達(dá)。該項研究表明，miR210HG可能是調(diào)控骨肉瘤EMT的關(guān)鍵指標(biāo)之一。

2.7 SPRY4

SPRY4內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄本1（SPRY4-IT1）在幾種癌癥中促進(jìn)細(xì)胞生長。近來研究提示SPRY4-IT1促進(jìn)骨肉瘤中的細(xì)胞增殖、遷移和侵襲，誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化表型[7]。該研究提示SPRY4-IT1/Snail1/E-鈣粘蛋白途徑可能在促進(jìn)骨肉瘤轉(zhuǎn)移中起關(guān)鍵作用。

2.8 HOTAIR

HOX反義基因間RNA（HOTAIR）是第一個首先被發(fā)現(xiàn)具有反式轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用的長鏈非編碼RNA，被正式與腫瘤轉(zhuǎn)移有關(guān)。大連醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院的研究通過選取2002年—2009年期間共40例骨肉瘤病理組織，檢測結(jié)果表明HOTAIR的過表達(dá)與晚期腫瘤組織學(xué)分級密切相關(guān)[8]。該研究指出HOTAIR可以通過激活MMP2和MMP9促進(jìn)腫瘤EMT過程。

2.9 SNHG家族相關(guān)成員

小核RNA宿主基因（SNHG）是一種新鑒定的LncRNA。Yiqi Deng最近報道了骨肉瘤中SNHG7水平與OS患者的高Enneking期，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和較短的總生存時間有關(guān)[9]。骨肉瘤腫瘤細(xì)胞中的SNHG7減低會顯著影響EMT過程。這些研究說明SNHG家族參與骨肉瘤EMT調(diào)控，仍尚需更加深入細(xì)致的實驗。

2.10 NBR2

作為非蛋白質(zhì)編碼基因，與腫瘤抑制基因BRCA1.12,13相鄰。一項納入株洲市附屬醫(yī)院62例骨肉瘤的研究表明NBR2表達(dá)下調(diào)的骨肉瘤表現(xiàn)出較短的總體生存時間[10]。研究者發(fā)現(xiàn)NBR2過表達(dá)抑制骨肉瘤細(xì)胞增殖、侵襲、遷移和EMT過程。裸鼠實驗中進(jìn)一步驗證了過表達(dá)NBR2調(diào)控N-鈣黏著蛋白、E-鈣黏著蛋白及波形蛋白水平。因此他們推測NBR2可能成為臨床骨肉瘤治療的重要切入點(diǎn)。

2.11 GAS5

生長停滯特異性5基因（GAS5）定位于染色體1q25，是多個癌腫的腫瘤抑制因子。Kaishan Ye等人報道了GAS5的過表達(dá)抑制了骨肉瘤細(xì)胞的增殖，遷移和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）[11]。該項研究的機(jī)制明確了lncRNA GAS5調(diào)控EMT過程中miR-221的參與。這一機(jī)制的闡明對骨肉瘤的治療方案提供了另一條新思路。

3.小結(jié)與展望

EMT是腫瘤發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移的重要機(jī)制，與預(yù)后密切相關(guān)。骨肉瘤的治療效果目前未有明顯改善。lncRNA已成為醫(yī)藥相關(guān)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)，其具有特殊的生物復(fù)雜性。本文從lncRNA調(diào)控骨肉瘤EMT這一角度出發(fā)，闡述了近年來lncRNA參與調(diào)控骨肉瘤EMT的相關(guān)研究。當(dāng)前的研究揭示促進(jìn)或抑制骨肉瘤EMT過程的相關(guān)lncRNA,為骨肉瘤的精準(zhǔn)治療提供了更多的研究數(shù)據(jù)。雖然關(guān)于lncRNA調(diào)控EMT的研究依然有限，但我們相信隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的蓬勃發(fā)展，其機(jī)制將會被闡明，骨肉瘤的療效會得到極大的改善。