牛人工授精技術(shù)操作要點(diǎn)

文│黃龍（貴州省黔西南布依族苗族自治州農(nóng)業(yè)農(nóng)村局）

1780年，意大利生理學(xué)家司拜倫謹(jǐn)尼（SpallanZanni）首次對狗進(jìn)行人工授精并獲得成功，迄今已有240年歷史，開創(chuàng)了動物繁育新技術(shù)。人工授精是指通過工具將公畜的精液取出，再用工具將精液輸入到發(fā)情母畜的生殖道內(nèi)，使母畜授精的一種配種方法。

一、牛人工授精的關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)

1.人工授精站的基本要求。工作室設(shè)置人工授精站必須具備專用工作室、凍精解凍檢查室、配種室、消毒器械和冷藏設(shè)備。

2.室內(nèi)工作規(guī)則。輸精員進(jìn)入工作室必須穿工作服；工作室內(nèi)保持整潔，要求無煙、無蠅、無異味、無雜物，干凈、衛(wèi)生；禁止在室內(nèi)燒火、吸煙；防疫、治療、消毒藥品、治療器械等不得與其他物品混用；非輸精員禁止進(jìn)入工作室內(nèi)。輸精員要嚴(yán)格執(zhí)行人工授精操作規(guī)程，熟練掌握人工授精技術(shù)和肉牛飼養(yǎng)管理技術(shù)，母牛發(fā)情和產(chǎn)犢情況，并做好登記。對畜主進(jìn)行科技宣傳培訓(xùn)，使畜主掌握牛的飼養(yǎng)和繁育基本知識，嚴(yán)格執(zhí)行人工授精設(shè)備的消毒制度和物資管理。認(rèn)真做好配種記錄，加強(qiáng)工作總結(jié)，找出工作中存在的問題，研究提高母牛受胎率、產(chǎn)犢率的有效措施和方法。

二、母牛受胎率影響因素

母牛受胎率影響因素有發(fā)情表現(xiàn)、精液質(zhì)量、畜主對牛的發(fā)情鑒定水平和配種員的輸精技術(shù)等。母牛受胎率=發(fā)情表現(xiàn)×精液質(zhì)量×發(fā)情鑒定×輸精技術(shù)×100%。

對輸精器械要進(jìn)行嚴(yán)格的清洗和消毒工作，輸精器械在消毒前先用肥皂水刷洗，再用清水沖凈擦干，然后按器械的性質(zhì)、種類分別包裝，放入高壓滅菌鍋內(nèi)消毒30分鐘，冷卻后置放瓷盤內(nèi)備用。潤滑劑、生理鹽水、棉球用前經(jīng)蒸氣消毒。新購置的玻璃器皿使用前先用2%碳酸鈉溶液浸泡，再用清水洗凈，放入80～120℃高溫干燥箱中消毒。凡與精液接觸的用具，使用前必須用滅菌生理鹽水或解凍液沖洗1～2次。

三、鮮精采集及凍精解凍

1.采精。對采精場的要求：寬敞、平坦、安靜、清潔、采光好，場內(nèi)設(shè)采精架以保定臺畜。

2.采精臺的準(zhǔn)備。

（1）臺畜。性情溫和的發(fā)情母牛。

（2）假臺畜。貌似牛樣的模型，將發(fā)情母牛尿液用麻袋片浸濕假臺畜，誘引公牛爬跨。

（3）公牛的調(diào)教。激素的作用：發(fā)情母牛陰道分泌物對公牛有刺激和引誘作用，激發(fā)公牛的性欲。視覺、“觀摩”：讓調(diào)教公?？雌渌Ｅ浞N，產(chǎn)生配種欲望。采精前的刺激：公牛和發(fā)情母牛拴在一起5～10分鐘，公母相互挑逗，但不讓其爬跨，使公牛性興奮不斷加強(qiáng)，待公牛陰莖充分勃起并伸出時(shí)，再讓公牛爬跨，使用假陰道進(jìn)行采精，約8～10秒。

（4）采精原則。完全收集到精液；保證精液品質(zhì)；不能損傷公牛生殖器官；對公牛的性反射不能有不良影響；方法簡單、實(shí)用、易操作。方法：假陰道法（牛、羊、馬、兔、豬均可）。采精頻率：每周采兩天，每天采兩次。

（5）精液品質(zhì)檢查。外觀檢查：色澤乳白色或灰白色；氣味：無味或淡淡腥味；精液量：5～8毫升。

（6）精子成活率。在顯微鏡下計(jì)數(shù)板觀察精液中直線前進(jìn)運(yùn)動的精子數(shù)占總精子數(shù)的百分率。精子成活率的檢查條件：溫度37～38℃，恒溫臺（箱）。精子成活率：鮮精≥0.6，凍精≥0.3，并執(zhí)行相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。

（7）凍精解凍。顆粒凍精解凍：每粒用2.9%檸檬酸鈉溶液5毫升試管中加熱30～37℃解凍（每粒0.5～0.25毫升），顆粒溶解完畢，輸精針、注射器吸入備用。

細(xì)管凍精解凍：放入3～37℃水中解凍（每支0.25毫升），發(fā)現(xiàn)冒氣泡時(shí)取出。凍精保存：在罐內(nèi)-176～-196℃液氮中保存，凍精離開液氮的時(shí)間不超過10秒，每周檢查兩次液氮，液氮量不低于罐容的1/3。

四、輸精

1.母牛的發(fā)情鑒定。指母牛特有的與排卵過程密切相關(guān)的周期性的性活動現(xiàn)象。發(fā)情表現(xiàn)：精神興奮、鳴叫、食欲減退、臥立不安、舉尾、頻頻排尿；性欲（交配欲）：主動接近公牛，爬跨其他母牛，接受爬跨，兩后腿分立，呈交配姿勢。

2.生殖道變化。陰道充血，分泌物增多，子宮頸口開張，子宮頸充血增大變軟，子宮與陰道收縮加強(qiáng)，陰門有黏液流出。黏液變化為：無色透明、米湯色、乳白色，在米湯色到乳白色時(shí)配種最佳。

3.卵巢變化。母牛發(fā)情周期為21天，分四個(gè)階段。

（1）發(fā)情前期。上一個(gè)周期的黃體迅速退化，卵泡迅速發(fā)育生長，沒有性欲表現(xiàn)。

（2）發(fā)情期。卵泡成熟，開始排卵，陰道上皮角質(zhì)化明顯，生殖道收縮加強(qiáng)，精液分泌增加，接受爬跨，有性欲，持續(xù)1～2天。

（3）發(fā)情后期。黃體開始形成，保護(hù)卵巢，母?；謴?fù)正常，不接受交配。

（4）間情期。卵巢上黃體成熟，分泌加強(qiáng)，抑制發(fā)情。一旦妊娠，黃體將維持到分娩，叫妊娠黃體；如果設(shè)有妊娠，黃體只維持在間情期，叫周期黃體。

4.發(fā)情母牛配種。發(fā)情母牛用保定架或拴在柱上保定后，用0.1%高錳酸鉀液擦洗外陰消毒，采用直腸把握輸精（輸精員需提前剪磨指甲，并清洗消毒），打上潤滑劑（如凡士林和肥皂水），手指呈錐狀緩慢從肛門伸入直腸，掏出腸內(nèi)貯存糞便，通過直腸壁輕輕下壓握住子宮頸，另一只手將裝好精液的輸精槍（管）向上與水平成30～40度角插入陰道，直腸內(nèi)手指感觸槍（管）頭，兩手配合引入子宮頸內(nèi)口進(jìn)入子宮角，將精液緩慢注入，輸精完成后，將輸精槍慢慢抽出。輸精時(shí)若母牛努責(zé)（初配母牛較常見），助手按壓母牛腰薦部，待努責(zé)停止后再將手伸入直腸內(nèi)。凍精劑量：細(xì)管0.25毫升，顆粒0.1毫升，有效精子數(shù)大于1200萬個(gè)。

5.配種記錄。應(yīng)做好配種記錄，如畜主、地址、母牛品種、年齡、外貌特征、發(fā)情狀況、配種時(shí)間、輸精日期、精液品種、公牛號等信息。

6.配種后觀察。配種后母牛下一情期再發(fā)情，說明未受胎，如不再發(fā)情，且食欲增加、溫和、貪睡，一般認(rèn)為已受胎。要加強(qiáng)懷孕期母牛飼養(yǎng)管理，黃牛懷孕期280天，水牛304天。產(chǎn)犢后跟蹤調(diào)查，測定犢牛體尺體重指標(biāo)、統(tǒng)計(jì)分析受胎率、產(chǎn)犢率及后代生產(chǎn)性能等，為今后配種提供技術(shù)依據(jù)。