超高效液相色譜法在藥物分析中的應用進展

趙珺睿 賀英 張嬌嬌

天津紅日藥業(yè)股份有限公司 天津 301700

超高效液相色譜法（UPLC）是一種應用于藥物檢測、食品檢測等檢測領域的一種化學成分分離技術，其與高效液相色譜法（HPLC）的原理相同，可對相關藥物進行快速檢測，具備分離速度快、適用范圍廣、自動化程度準確度高等特點。在藥物檢驗分析領域，UPLC比HPLC的應用優(yōu)勢更加突出，可快速、準確地分析出藥物的復雜組分，具備極高的推廣應用價值。

1 UPLC的優(yōu)勢

1.1 速度

超高效液相色譜法（UPLC）色譜柱多采用新型全多孔球形1.7μm反相固定相，該固定相是應用“雜化顆粒技術”合成的，并由此制備了高柱效的ACQUITY UPLC色譜柱。這使得在常規(guī)高效液相色譜需要30分鐘時間的樣品分析在超高效液相色譜短短為僅需5分鐘，并呈現出色譜柱柱效達20萬塊/m理論塔板數的超高柱效[1]。

1.2 靈敏度

我們知道UPLC色譜柱中使用的是1.7μm固定相，分離獲得的色譜峰半蜂寬小于1s，這就對檢測器的要求是極高的。通常情況下，對于光源而言，主要運用可變波長的紫外光或二極管陣列系統。在使用的檢測方法中，這一檢測方法與普通的檢測方法相似。然而，在實際的檢測中，會用到高效微粒固定相檢測法，與此同時，在高壓輸液泵等儀器的共同檢測下，在極大程度上，可以保證檢測結果的科學性、合理性。

1.3 自動化

對于UPLC的進樣系統，常規(guī)的手動進樣閥和自動進樣閥都不能滿足系統需求了。在UPLC中為保護色譜柱不受極端高壓力波動的影響，進樣過程應當相對無壓方波動，進樣系統的死體積必須足夠小，以降低樣品譜帶的擴展。針對這個問題，UPLC的自動化進樣器的設計有了新突破：針內針進樣探頭（XYZZ）為高速進樣機械裝里，可快速進樣。為了降低進樣時的交叉污染，采用一強、一弱的雙溶劑的進樣針清洗步驟，這兩種洗針溶劑需同時得到良好的脫氣。此技術可保證可靠、重現的進樣；在自動進樣器內，可安置96位或384位樣品盤。每個位置可放置2或4mL樣品瓶。新型的樣品組織器可接受21個樣品盤的編程。一般而言，對于快速進樣周期而言，在保證UPLC高樣品容量的情況下，能夠實現高速度，與此同時，能夠使無人照管，長時間運行的自動進樣得以實現，還具有極低交叉污染的小體積進樣能力。由于該技術的分離速度，靈敏度和自動化方面有更大的優(yōu)勢，相信會在各大實驗室得到認可[2]。

2 藥物分析現狀

當前，UPLC作為一種常用的檢驗分析技術，已經被應用于藥品分析、藥物代謝動力學、中藥成分分析中，其在藥物檢測分析領域取得了良好的應用效果。

2.1 應用于藥品定性與定量分析

在藥品檢驗分析中，樣品分離難度高、分析時間長一直是藥品檢驗分析的弊端。而應用UPLC進行藥品檢驗分析，可彌補上述弊端，提高藥品檢測的靈敏度和藥品分析準確性。如，利用UPLC可準確測定人凝血因子VII中枸櫞酸離子含量，從而可以保證精確測量，進而使人體的各項指標趨于平穩(wěn)[3]。除此之外，由于UPLC具有高分離度、高速度、高靈敏度的優(yōu)勢，因此，UPLC還被成功應用于松乳劑、曲安西隆乳劑等合成藥物，以及中間體、副產物的檢驗分析中，提高了檢測分析結果的準確性。

2.2 應用于藥物代謝動力學

目前，在醫(yī)藥學領域中，針對藥物代謝動力學方面的研究主要集中在以下幾個方面：藥物在體內的分布情況、藥物在人體內的吸收、代謝和排泄。研究內容包括藥物分析測定、藥物代謝和基質分離、代謝物定量分析等。相關研究結果表明，UPLC在藥物代謝產物檢測中的分離效率較高，不僅如此，UPLC還能對樣品進行定量分析。利用UPLC-MS/MS系統可以測定人體血漿當中的喹那普利和喹那普利拉的含量。UPLC檢驗分析過程的耗時較短且準確度高，便可測定出血清中氯氮平及去甲可待因的含量，從而計算出人體血漿中洛匹那韋和利托那韋的濃度，進而給后期的檢測工作奠定良好的基礎。綜上，在藥物代謝動力學的研究中，應用UPLC能夠使檢測分析結果更加精確[4]。

2.3 藥物分析在藥品研究的重要性

一般而言，藥物自身的結構和性質至關重要，通常情況下，能夠說成藥物結構影響了藥效，除此之外，還可以影響藥物在體內的吸收、分布過程。然而，因為人體在一定程度上，對藥物有具體的處理方式，并不是具有活性部位的分子都可以做藥物使用。藥物發(fā)揮藥理活性的僅僅是它結構的一部分，為了能發(fā)揮這種活性，還需要另外一些輔助結構保證該分子能經受人體的處理而到達靶部位[5]。

3 超高效液相色譜法在藥物成分分析中的應用

3.1 中藥制劑

對于中藥制劑來講，因為其所含成分相對較多，同時伴隨著目標檢測物的含量較低，以及加上相似物較多，因此，在實際的工作中，進行定量分析有一定的難度。但是，對于這一方法而言，其具有一定的優(yōu)勢，如：可以解決相應的難題，并且在具體的鑒定中，有顯著的成效。再者，其在復方中藥制劑中，也有顯著的成效，進而可以給藥品質量控制，帶來科學、有效的檢測方法。除此之外，其在化學藥物，生物制劑等領域也有所運用。

3.2 中藥材質量分析

根據相關的研究表明，這一方法在實際的分析中，擁有顯著的效果，與此同時，就有相關人士使用這一方法，對相應的成分進行有效的檢測。通常情況下，中藥指紋譜圖是首要的方法之一，并且有相關人士使用這一方法，制作了黃芪的指紋圖譜，再者，建立超高效液相色譜指紋圖譜，這一方法在實際的應用中，具有顯著的成效[6]。

3.3 檢測制藥廢水中的應用

一般而言，在制藥廢水中擁有許多殘留藥物成分，其會給環(huán)境帶來嚴重的危害，基于這一現狀，對于廢水的治理成為當今首要的任務。高效液相色譜儀可同時測定制藥廢水中的交沙霉素、茶堿和撲熱息痛的含量，通過檢測制藥廢水，尋找合適的方法去除制藥廢水中對環(huán)境有害的物質[7]。

4 結語

超高效液相色譜法在高速和高壓環(huán)境下可實現高效分離，保證藥物檢驗質量。而高效液相色譜法對檢驗環(huán)境的限制條件相對較多，一旦面臨檢驗環(huán)境變化，就會降低樣品分離效率，影響藥物檢驗分析質量?，F階段，隨著這一技術的不斷應用，與此同時，能夠給市場監(jiān)管帶來有效的輔助功能。特別是在相似藥品的檢測中，能夠有顯著的鑒別作用，希望通過本文的研究能夠給相關人士帶來一定的借鑒意義[8]。