微波-LDP 免疫組化技術(shù)在腫瘤病理快速診斷中的應(yīng)用

朱姝美

（常州市溧陽市中醫(yī)醫(yī)院病理科 江蘇 常州 213300）

近年來全球惡性腫瘤發(fā)病率以每年4%的速度快速增長，常見腫瘤類型包括肺癌、乳腺癌、前列腺癌等[1]。隨著國民生活方式的轉(zhuǎn)變和生活節(jié)奏的加快，國內(nèi)腫瘤病死率較高，嚴重威脅國民的身體健康[2]。臨床中早期檢出、及時治療是改善腫瘤患者預(yù)后的關(guān)鍵[3]。常規(guī)X 線、CT 等影像學(xué)檢查手段盡管能夠為醫(yī)師判斷腫瘤病例提供參考依據(jù)，但容易出現(xiàn)漏診、誤診情況。為了探討更加高效、準確的檢查方法，本文現(xiàn)就微波-標(biāo)記葡聚糖聚合法（LDP）免疫組化技術(shù)在腫瘤病理快速診斷中的應(yīng)用價值進行了探索。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取醫(yī)院2017 年7 月—2019 年7 月收治的腫瘤患者84 例?；颊吣?5 例，女39 例；年齡37 ～75 歲，平均（46.49±1.37）歲?；颊呔@知情權(quán)。使用材料包括德國Zeiss Libra 120透射電鏡；廣州萬孚生物有限公司提供的單（多）克隆抗體；DAKO 公司提供的第二抗體EnVision；上海佑科XSP-1CA 顯微鏡；浙江臨安電子器材廠提供的YWY78IA 型醫(yī)用微波爐。

1.2 方法

全部患者均行微波-LDP 免疫組化技術(shù)檢驗：①冰凍切片，經(jīng)PBS 洗30s×2 次；②視一抗?fàn)顟B(tài)對于消化處理切片，應(yīng)置入濕盒內(nèi)使用胰蛋白酶，經(jīng)微波爐低檔作用60s；對于需進行抗原修復(fù)的切片使用微波高檔煮沸后，再調(diào)整為低檔，作用10min，均使用蒸餾水洗、PBS 洗30s×2 次；③在3%雙氧水濕盒中微波低檔作用60s，消除其中的內(nèi)源性過氧化物酶，再PBS 洗30s×2次；④滴入一抗，置入濕盒中，微波低檔60s，PBS 洗30s×2 次；⑤滴入二抗，置入濕盒中微波低檔60s，PBS 洗30s×2 次；⑥常規(guī)顯色、水洗，使用HE 染色，脫水、封片。免疫組化陽性標(biāo)準：根據(jù)染色強度（光鏡分析結(jié)果）和陽性細胞數(shù)目（切片中顯色腫瘤細胞在全部腫瘤細胞中的占比評分）結(jié)果判定陽性：①陽性細胞數(shù)目：＞75%記3 分，30 ～75%記2 分，30%以下記1 分；②染色強度：細胞無色記0 分，淺黃色記1 分，棕黃色記2 分，棕褐色記3 分，積分=①×②，按照積分高低評價：陰性（-）（積分0 分）；弱陽性（+）（積分1 ～2 分）；中度陽性（++）（積分3 ～4 分），強陽性（+++）（積分＞4 分），陰性包括(-)、（+），陽性包括(++)、（+++）[5]。

1.3 觀察指標(biāo)

以病理電鏡觀察、組織學(xué)觀察結(jié)果為金標(biāo)準，分析微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷腫瘤患者的結(jié)果，評價該種檢驗技術(shù)診斷惡性腫瘤患者的效能。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS23.0 處理數(shù)據(jù)，以χ2檢驗計數(shù)資料（%，n），P＜0.05，表示有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷腫瘤的結(jié)果與金標(biāo)準對比

由金標(biāo)準可知，84 例腫瘤患者中良性31 例，惡性53 例，以此為參照，采用微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷惡性腫瘤的結(jié)果詳見表1。

表1 微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷腫瘤的結(jié)果與金標(biāo)準對比（n）

2.2 微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷惡性腫瘤的效能評價

由2.1 的結(jié)果可知，微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷惡性腫瘤的靈敏度、特異度、準確度、漏診率和誤診率，詳見表2，其中診斷準確度與金標(biāo)準比較（χ2=2.304，P=0.128）無顯著差異。

表2 微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷惡性腫瘤的效能評價

3.討論

病理技術(shù)作為診斷腫瘤的有效手段，在基層醫(yī)院得到了廣泛應(yīng)用。但一般免疫組化技術(shù)存在耗時長、步驟多、靈敏度低等缺陷，影響了診斷結(jié)果的可靠性[4]。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，微波-LDP 免疫組化技術(shù)成為了臨床常用的病理檢查手段[5]。本次研究結(jié)果顯示，微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷惡性腫瘤漏診率（5.66%）、誤診率（3.23%）較低，特異度（96.77%）、靈敏度（94.34%）和準確度（95.24%）較高，說明該種檢驗方法在腫瘤病理診斷中具有較高的診斷效能，可為醫(yī)師鑒別惡性腫瘤患者提供重要的參考依據(jù)。分析后可知，一般免免疫組化技術(shù)操作環(huán)節(jié)繁瑣，無法及時獲取檢測結(jié)果。而微波-LDP 免疫組化技術(shù)中的二抗可將特異性抗體與辣根過氧化物酶在葡聚糖聚合物上相結(jié)合，且葡聚糖分子較大，各骨架能夠與100 個酶分子、20 個抗體分子進行結(jié)合，提高顯色效果，改善漏診情況，有效提高了腫瘤病理檢驗的靈敏度。且在實際操作中無需阻斷其中的內(nèi)源性生物素，省略了血清封閉環(huán)節(jié)，從而縮短了切片染色時間，提升了檢驗效率。同時將微波技術(shù)應(yīng)用于LDP 免疫組化檢驗中，能夠在高頻電磁場中提高抗原抗體的作用面積，加快反應(yīng)速度，促進快速孵育，將反應(yīng)時間由原本的75min 壓縮至20min 以內(nèi)，并能夠減少非特異性染色反應(yīng)，改善了誤診情況，實現(xiàn)了快速、準確診斷的檢驗效果。

綜上所述，采用微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷腫瘤能夠為醫(yī)師判斷良惡性病例提供有力參照，準確檢出惡性腫瘤患者，診斷效能較高，具有重要的應(yīng)用價值。