合谷穴與面口部特異性聯(lián)系的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制研究

周海燕劉旭光陳 婷周奇志蔡定均唐 勇楊 馨楊慎峭

（1成都中醫(yī)藥大學(xué)，成都，610075；2四川省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，成都，610041）

合谷穴與面口部特異性聯(lián)系的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制研究

周海燕1劉旭光1陳 婷2周奇志1蔡定均1唐 勇1楊 馨1楊慎峭1

（1成都中醫(yī)藥大學(xué)，成都，610075；2四川省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，成都，610041）

“面口合谷收”是經(jīng)脈體表與體表之間聯(lián)系的重要體現(xiàn)，從神經(jīng)生物學(xué)角度闡釋針刺合谷穴對面口部影響的機(jī)制可能是研究“面口合谷收”理論內(nèi)涵的重要突破口之一。文章中作者針刺合谷穴，以后溪、外關(guān)作為對照，觀察其對面口部痛閾、肌電活動(dòng)、唾液分泌和腦中樞功能網(wǎng)絡(luò)響應(yīng)的影響，從不同層面揭示合谷穴與面口部特異性聯(lián)系的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制，以期為“面口合谷收”理論提供更豐富的科學(xué)依據(jù)。

針刺；合谷；面口部；神經(jīng)生物學(xué)

經(jīng)絡(luò)和腧穴是針灸理論的基礎(chǔ)和核心內(nèi)容。沒有經(jīng)絡(luò)和腧穴理論為指導(dǎo)，針灸的操作和治療即是無源之水、無本之木。因此，開展對經(jīng)脈、腧穴的研究對于揭示針灸的科學(xué)原理、促進(jìn)針灸走向世界等具有重要意義。雖然目前對經(jīng)穴效應(yīng)特異性的研究已經(jīng)取得了豐碩的成果［1-4］，但多基于經(jīng)脈與臟腑相關(guān)性的研究。經(jīng)脈體表特異性聯(lián)系是實(shí)現(xiàn)經(jīng)穴效應(yīng)特異性的重要方面，是針灸臨床循經(jīng)遠(yuǎn)道取穴的重要依據(jù)，如針灸臨床強(qiáng)調(diào)“求穴在乎按經(jīng)”“病隨經(jīng)所在，穴隨經(jīng)所取”?！懊婵诤瞎仁铡笔求w現(xiàn)經(jīng)脈體表之間聯(lián)系的典型代表，深入探究“面口合谷收”的生物學(xué)基礎(chǔ)依據(jù)，對豐富經(jīng)脈體表之間密切聯(lián)系的理論內(nèi)涵、促進(jìn)針灸臨床療效提高等具有重要的意義。

1 針刺合谷穴對正常人面口部痛閾的影響

針刺鎮(zhèn)痛是針灸走向世界的先導(dǎo)者，早在上個(gè)世紀(jì)70年代針麻研究中合谷就被列為主要研究的穴位之一［5］，如針刺合谷可以提高牙痛患者的痛閾，緩解疼痛，常用于牙痛的針麻手術(shù)。基于“面口合谷收”針灸理論，我們以痛閾為指標(biāo)觀察針刺合谷穴對正常人面口部的影響。分別針刺健康受試者合谷、后溪、外關(guān)穴，采取直觀、靈敏、可控的鉀離子測痛法檢測針刺前后受試者的面部痛閾，比較針刺合谷、后溪、外關(guān)穴對健康受試者面部痛閾的不同影響。研究發(fā)現(xiàn)：針刺健康受試者合谷穴對其面口部下頜區(qū)痛閾有明顯影響（P＜0.05），對額區(qū)、頰區(qū)、下頜區(qū)痛閾變化率的影響明顯強(qiáng)于針刺后溪、外關(guān)穴（P＜0.05）［6］，提示正常人合谷穴與面口部感覺功能之間存在相對特異性的聯(lián)系。

2 針刺合谷穴區(qū)對獼猴面口部肌電活動(dòng)的影響

骨骼肌的肌電活動(dòng)是肌肉運(yùn)動(dòng)單位在收縮時(shí)所產(chǎn)生的生物電活動(dòng)的集合，故肌電是神經(jīng)-肌肉興奮發(fā)放生物電的結(jié)果，肌電圖是活動(dòng)肌肉放電情況的記錄。因肌電可以多通道、無創(chuàng)、快速、動(dòng)態(tài)的反映局部肌肉生物電的情況，目前肌電測量已經(jīng)是對肌肉運(yùn)動(dòng)進(jìn)行研究的主要手段之一［7］。肌電檢測也被運(yùn)用于經(jīng)絡(luò)的實(shí)質(zhì)研究，特別是循經(jīng)感傳的研究［8-9］。

我們運(yùn)用神經(jīng)肌電檢測技術(shù)分別在生理狀態(tài)和麻醉狀態(tài)下觀察了針刺恒河猴合谷穴對面口部肌肉運(yùn)動(dòng)的影響。檢測部位是位于面部不同部位的額肌、顴肌及口輪匝肌，分別觀察針刺合谷、后溪、外關(guān)對恒河猴面口部肌肉肌電活動(dòng)的影響。研究發(fā)現(xiàn)：在生理狀態(tài)下，針刺合谷穴使額肌肌電的潛伏期降低（P＜0.01），峰峰值、面積增高（P＜0.05，P＜0.01）；顴肌肌電的面積增高（P＜0.01），峰峰值升高（P＜0.05）、潛伏期降低（P＜0.05）；口輪匝肌肌電的頻率增高（P＜0.01），潛伏期降低（P＜0.01）；針刺合谷穴前后額肌、顴肌、口輪匝肌的肌電頻率、峰峰值、面積及潛伏期變化率明顯高于針刺后溪、外關(guān)穴（P＜0.05、P＜0.01）［10］。在局麻狀態(tài)下，針刺合谷對額肌、顴肌肌電的峰峰值、面積均有顯著影響（P＜0.05、P＜0.01），對口輪匝肌肌電各參數(shù)均無顯著影響；針刺合谷對恒河猴面口部肌肉肌電的影響明顯強(qiáng)于針刺后溪和外關(guān)穴，其中針刺合谷對額肌肌電峰峰值、面積及潛伏期變化率顯著高于后溪、外關(guān)（P＜0.05），對顴肌肌電峰峰值、面積變化率也顯著高于后溪、外關(guān)（P＜0.05）［11］。提示合谷穴區(qū)與面口部肌肉運(yùn)動(dòng)之間存在相對特異性聯(lián)系，外周感覺神經(jīng)可能是實(shí)現(xiàn)這種特異性聯(lián)系的重要途徑之一。

3 針刺合谷穴對正常人唾液腺分泌的影響

唾液是口腔內(nèi)唾液腺所分泌的混合物，唾液淀粉酶是唾液中的一種水解酶，可作用于可溶性淀粉、直鏈淀粉、糖原等α-1，4-葡聚糖，水解α-1，4-糖苷鍵，屬于α-淀粉酶的一種。已有研究發(fā)現(xiàn)針刺能夠影響唾液淀粉酶的分泌和成分［12-13］，酶的活性在針刺不同穴位前后的改變可能直接反映副交感神經(jīng)的功能狀態(tài)［14］。唾液淀粉酶作為唾液中的生物標(biāo)志物，對牙周、口腔等疾病具有輔助診斷和預(yù)后評估作用［15］，唾液中的多種特異性抗體可代替外周血標(biāo)本，用于臨床診斷和流行病的研究，例如美國就已利用人血清及唾液來檢測HIV［16-17］。與血清相比，唾液的采集無侵入性，也無血源性疾病傳播的危險(xiǎn)，故患者更易接受，其診斷價(jià)值更受重視［18］。

我們以健康受試者為研究對象，針刺合谷穴，以后溪穴、外關(guān)穴作對照，運(yùn)用熒光分光光度檢測技術(shù)觀察針刺對唾液腺分泌的影響。研究發(fā)現(xiàn)：針刺合谷、后溪和外關(guān)對唾液α-淀粉酶活力均無明顯影響（P＞ 0.05）。但針刺不同穴位對唾液α-淀粉酶活力變化率有差異，其中針刺合谷明顯高于針刺后溪穴或外關(guān)穴（P＜0.05）［19］，提示合谷穴與面口部的腺體分泌功能活動(dòng)之間具有相對特異性聯(lián)系。

4 針刺合谷穴對正常人腦功能網(wǎng)絡(luò)連接響應(yīng)的影響

影像學(xué)為針灸的研究帶來了福音［20-21］。功能磁共振成像（fMRI）作為一項(xiàng)新興的影像學(xué)技術(shù)，其優(yōu)點(diǎn)突出，可以形象地展示大腦在處理和加工各類信息的活動(dòng)情況，讓研究者在無創(chuàng)條件下直接觀察腦的復(fù)雜功能，深入分析行為和腦活動(dòng)之間的密切關(guān)系，從而認(rèn)識腦在認(rèn)知活動(dòng)和發(fā)展中的作用。目前腦成像已被廣泛運(yùn)用于針灸的中樞機(jī)制研究［22-23］，也被運(yùn)用于合谷穴的研究［24］。

我們以健康受試者為研究對象，電針左側(cè)合谷穴，以左側(cè)后溪、外關(guān)為對照，運(yùn)用fMRI技術(shù)，檢測分析與面口部相關(guān)功能網(wǎng)絡(luò)的功能連接響應(yīng)特征。研究發(fā)現(xiàn)：針刺合谷相比針刺后溪的功能連接比較中出現(xiàn)右側(cè)面口區(qū)功能連接降低，右側(cè)感覺運(yùn)動(dòng)區(qū)功能連接增高，雙視覺區(qū)、小腦等腦區(qū)功能連接降低（P＜0.05，corrected，cluster size＞228）；針刺合谷相比針刺后溪的功能連接比較中出現(xiàn)右側(cè)感覺運(yùn)動(dòng)區(qū)功能連接增高，小腦等腦區(qū)功能連接降低（P＜0.05，corrected，cluster size＞228）。提示合谷與面口部在大腦中樞的功能連接網(wǎng)絡(luò)響應(yīng)中具有特異性聯(lián)系。

5 討論

合谷是手陽明大腸經(jīng)的原穴，大腸經(jīng)脈循行“其支者，從缺盆上頸貫頰，入下齒中；還出挾口，交人中，左之右，右之左，上挾鼻孔。”，絡(luò)脈“上循臂，乘肩髃，上曲頰偏齒；其別者，入耳，合于宗脈”，經(jīng)別“上循喉嚨，出缺盆。合于陽明也”，經(jīng)筋“其支者上頰，結(jié)于頄；直者上出于手太陽之前，上左角，絡(luò)頭，下右頷?！庇纱丝梢姶竽c經(jīng)脈、絡(luò)脈、經(jīng)別、經(jīng)筋循行均達(dá)于頭、面、口、齒、鼻、耳等處，故針刺合谷穴可以治療手陽明大腸經(jīng)循行所過頭面部的病證，“面口合谷收”既反映了“經(jīng)脈所過，主治所及”的特點(diǎn)規(guī)律，也是經(jīng)脈體表與體表特異性聯(lián)系的具體體現(xiàn)。

一個(gè)完整的神經(jīng)反射弧，一般包括五部分：感受器、傳入神經(jīng)纖維、中樞、傳出神經(jīng)纖維和效應(yīng)器，可歸納為三點(diǎn)：傳入、中樞、傳出。因此，從神經(jīng)生物學(xué)角度探討兩個(gè)不相鄰的部位之間的關(guān)系至少要涵蓋上述三點(diǎn)方可稱完整。因此我們從感覺傳入、中樞整合、運(yùn)動(dòng)傳出和腺體分泌等神經(jīng)生物學(xué)不同環(huán)節(jié)和層次研究合谷穴與面口部的特異性聯(lián)系現(xiàn)象與機(jī)制。

隨著“經(jīng)脈體表特異性聯(lián)系的生物學(xué)機(jī)制及針刺手法量效關(guān)系的研究”課題立項(xiàng)，各課題組均開展了“面口合谷收”的研究。回顧立項(xiàng)前后的研究成果，我們發(fā)現(xiàn)“面口合谷收”的研究主要圍繞形態(tài)學(xué)、針刺鎮(zhèn)痛、中樞原理、紅外熱像、腦功能磁共振成像、等方面［25-29］，但未檢索到有關(guān)針刺合谷穴對正常人唾液腺分泌功能和對面部肌電活動(dòng)的影響方面的文獻(xiàn)報(bào)道，也未檢索到電針針刺正常人合谷穴并分析與其他穴對面口部相關(guān)腦區(qū)功能網(wǎng)絡(luò)響應(yīng)的特征變化。而且之前的研究多是從一個(gè)方面對“面口合谷收”進(jìn)行研究，我們從感覺、中樞和運(yùn)動(dòng)三個(gè)層面分步驟系統(tǒng)完整的進(jìn)行了研究。

在檢測肌電活動(dòng)時(shí)，我們專門設(shè)立了生理狀態(tài)下和局麻狀態(tài)下，旨在通過局麻以阻滯穴位區(qū)域的感覺神經(jīng)傳入，以探索外周感覺傳入在合谷穴區(qū)與面口部相對特異性聯(lián)系中的作用意義。研究發(fā)現(xiàn)在局麻狀態(tài)下針刺合谷對面口部的肌電活動(dòng)仍有一定影響，但較生理狀態(tài)下明顯減弱，這與其他穴位，如足三里神經(jīng)阻滯后同樣只是減弱神經(jīng)放電的結(jié)果比較一致［30］。由于局麻藥的作用與神經(jīng)組織的結(jié)構(gòu)有關(guān)，細(xì)神經(jīng)纖維比粗神經(jīng)纖維更易被阻斷；而臨床得氣快、針感強(qiáng)、刺激興奮明顯的一般是中、粗神經(jīng)纖維，合谷穴位局麻后針刺合谷仍對面口部分肌肉的肌電活動(dòng)有一定影響可能與上述原因有關(guān)。同時(shí)也可推測：外周感覺神經(jīng)在針刺合谷影響面口部肌電活動(dòng)中具有重要作用，但不是唯一途徑，可能還有其他因素或物質(zhì)的參與，需待以后深入研究。

唾液由腮腺所分泌，故檢測唾液淀粉酶的活性可以間接反映對腮腺的作用影響。我們研究發(fā)現(xiàn)針刺合谷雖對唾液淀粉酶活性無影響，但與其他穴位比較，合谷針刺前后的活性變化率明顯高于其他兩穴，這同樣可以說明合谷與面口部腮腺功能相對其他兩穴關(guān)系更為密切。中醫(yī)理論認(rèn)為“脾開竅于口”“涎為脾液”，故目前關(guān)于唾液的研究主要圍繞脾胃功能方面，如脾虛泄瀉、肥胖等病證，并發(fā)現(xiàn)針灸或其他療法可以改變唾液的活性或成分［31］，但唾液也曾被作為檢測植物神經(jīng)功能狀態(tài)的指標(biāo)，用來觀察經(jīng)絡(luò)的感傳現(xiàn)象［32］。

針刺作用于外周，產(chǎn)生信號輸入腦內(nèi)進(jìn)行高端信息整合，進(jìn)而反饋信息輸出至外周靶點(diǎn)，這是通過穴位-經(jīng)絡(luò)-中樞-經(jīng)絡(luò)-靶器官發(fā)揮作用，故刺激穴位局部，通過腦功能成像技術(shù)觀察在中樞的變化可反映經(jīng)脈、經(jīng)穴以及穴-腦的特異性聯(lián)系。我們研究發(fā)現(xiàn)針刺正常人合谷在面口部相關(guān)腦功能網(wǎng)絡(luò)有響應(yīng)變化。這與其他關(guān)于合谷的腦功能成像研究結(jié)果有一些吻合之處。如陸欣玲等［33］研究發(fā)現(xiàn)針刺左側(cè)合谷可激活右側(cè)額內(nèi)側(cè)回、右側(cè)顳上回、右側(cè)顳中回、右側(cè)島葉、左側(cè)尾狀核，雙側(cè)額下回；針刺右側(cè)合谷可激活左側(cè)額內(nèi)側(cè)回、左側(cè)顳中回、左側(cè)額下回、右側(cè)輔助運(yùn)動(dòng)區(qū)，這發(fā)現(xiàn)針刺合谷穴可激活大腦皮層語言運(yùn)用中樞、面部反應(yīng)區(qū)、聽覺皮區(qū)，與合谷穴功能基本吻合。趙斌等［34］運(yùn)用靜息態(tài)腦功能連接方法發(fā)現(xiàn)針刺合谷穴能引起腦默認(rèn)網(wǎng)絡(luò)、面部感覺和運(yùn)動(dòng)網(wǎng)絡(luò)的變化，說明合谷穴與面口部存在著密切的聯(lián)系。但也有一些不同之處，這可能與針刺手段、刺激時(shí)間以及試驗(yàn)設(shè)計(jì)、數(shù)據(jù)分析方法和統(tǒng)計(jì)方法等不同有關(guān)。雖然之前也有關(guān)于合谷腦功能成像的研究，但大部分只停留于觀察激活的腦區(qū)，而未做腦功能網(wǎng)絡(luò)連接分析；趙斌雖做了功能連接分析，但主要在于觀察合谷的腦功能活動(dòng)情況，未設(shè)其他對照穴，若解釋合谷和面口部的特異性聯(lián)系則仍有欠缺之處。

6 未來工作展望

合谷作為臨床常用穴，在具體運(yùn)用中很少單獨(dú)使用，往往與他穴配伍使用，故今后的研究應(yīng)緊密結(jié)合臨床，開展合谷配穴的相關(guān)研究。而且合谷和他穴的配伍研究也將更能體現(xiàn)經(jīng)脈體表與體表的特異性聯(lián)系，研究結(jié)果不僅能為循經(jīng)取穴提供更可靠的依據(jù)，也將更加豐富“面口合谷收”的科學(xué)內(nèi)涵。

目前，基于經(jīng)脈臟腑相關(guān)的經(jīng)穴效應(yīng)特異性研究方法技術(shù)比較豐富，但基于經(jīng)脈體表與體表聯(lián)系的研究技術(shù)相對匱乏，今后可考慮開展多技術(shù)手段的結(jié)合研究。

我們目前雖然從神經(jīng)生物學(xué)幾個(gè)不同層面研究了合谷與面口部的特異性聯(lián)系，但主要著眼于宏觀，今后可考慮從微觀角度進(jìn)行深入研究。

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（2014-12-08收稿 責(zé)任編輯：洪志強(qiáng)）

Neurobiological mechanism of Relation between Orofacial and Hegu（LI4）

Zhou Haiyan1，Liu Xuguang1，Chen Ting2，Zhou Qizhi1，Cai dingjun1，Tang Yong1，Yang Xin1，Yang Shenqiao1
（1 Chengdu University of Traditional Chinese medicine，Chengdu 610075，China；2 Sichuan Integrated Chinese and Western medicine Hospital，Chengdu 610041，China）

“Orofacial diseases treated by Hegu（LI4）”is an important embodiment of the research on the links between meridians surface and surface.So to uncover the mechanism of Hegu（LI4）being effected for orofacial may be an important breakthrough point of“Orofacial diseases treated by Hegu（LI4）”from the angle of neurobiology.Pain threshold and EMG activity of Orofacial，the secretion of saliva and the central brain functional network response were observed when acupuncturing in Hegu（LI4），with HouXi（SI3）and Waiguan（SJ5）as control acupoints in this article，so as to explore the neurobiological basis of specific relation between Hegu（LI4）and orofacial from the different levels.

Acupuncture；Hegu（LI4）；Orofacial；Neurobiology

R245；R224

A

10.3969j.issn.1673-7202.2014.12.003

國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃（“973”計(jì)劃）項(xiàng)目（編號：2010CB530501）

周海燕（1979.05—），女，漢族，籍貫：浙江省諸暨市，職稱：講師，學(xué)位：博士，主要研究方向：經(jīng)穴效應(yīng)規(guī)律研究，E-mail：5014296＠qq.com，聯(lián)系地址：四川省成都市十二橋路37號成都中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院，郵編：610075

劉旭光（1965.11—），男，漢族，籍貫：四川資中，研究員，博士生導(dǎo)師，主要研究方向：針灸治療免疫性疾病的基礎(chǔ)研究和經(jīng)穴效應(yīng)規(guī)律研究