痛風濕熱蘊結(jié)型患者外周血淋巴細胞亞群特點分析

楊亞旭 張芳

【摘 要】目的：探究痛風濕熱蘊結(jié)型患者外周血淋巴細胞亞群特點。方法：選取2019年1月至2019年12月在南京中醫(yī)藥大學附屬中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院風濕免疫科門診就診的濕熱蘊結(jié)型痛風患者96例，健康體檢者50例。通過流式細胞分析儀檢測外周抗凝血淋巴細胞中總T淋巴細胞、輔助/誘導T淋巴細胞、抑制/細胞毒T細胞、NK細胞、B淋巴細胞等細胞數(shù)量。結(jié)果：濕熱蘊結(jié)型痛風組患者淋巴細胞、抑制/細胞毒T淋巴細胞與對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）;女性痛風患者總T淋巴細胞、輔助/誘導淋巴細胞明顯低于男性患者，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。排泄不良型患者NK細胞明顯低于生成過多型及混合型，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）;排泄不良型痛風患者B淋巴細胞明顯低于混合型，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。結(jié)論：不同性別患者淋巴細胞亞群分析具有差異;不同尿酸排泄類型濕熱蘊結(jié)型痛風患者間T淋巴細胞無明顯差異，但排泄不良型患者B淋巴細胞、NK細胞數(shù)目明顯低于另外2種類型。

【關(guān)鍵詞】 痛風;濕熱蘊結(jié)型;尿酸排泄;淋巴細胞亞群

痛風（gout）是一種慢性炎癥性疾病，主要由于嘌呤代謝失衡、血清尿酸升高而引起關(guān)節(jié)復發(fā)性炎癥和功能障礙，全世界范圍內(nèi)患病率近年來持續(xù)上升。美國國家健康和營養(yǎng)檢查調(diào)查，經(jīng)醫(yī)生診斷上報的痛風患病率從26.4‰（1988年至1994年）上升到37.6‰（2007年至2010年）[1]。如果不進行有效干預(yù)，反復發(fā)作可導致慢性痛風，最終可導致關(guān)節(jié)損傷、畸形、殘疾[2-3]。世界衛(wèi)生組織2010年全球疾病負擔研究表明，1990年至2010年，痛風的傷殘調(diào)整生命年（DALYs）延長了1倍[4]。淋巴細胞亞群可以有效反映機體的免疫功能情況，先天性免疫途徑在痛風的發(fā)病中至關(guān)重要。淋巴細胞依據(jù)其表面標志物及生物學功能大致分為T淋巴細胞（CD3+細胞）、B淋巴細胞（CD3-CD19+細胞）和NK細胞（CD3-CD16+/56+細胞）3個亞群，此外T淋巴細胞還可以進一步分為輔助/誘導T淋巴細胞（CD3+CD4+細胞）和抑制/細胞毒T淋巴細胞（CD3+CD8+細胞）[5]。痛風的中醫(yī)證型主要分為濕熱蘊結(jié)證、濕瘀阻痹證、濕熱夾瘀證、脾虛濕阻證、肝腎陰虛證5型。郭澤瑩等[6]對

172例痛風患者進行統(tǒng)計分析后發(fā)現(xiàn)，濕熱蘊結(jié)證比例達41.9%。目前，對淋巴細胞亞群分析的關(guān)注度越來越高，但對于痛風與淋巴細胞亞群的闡述較少，故本文主要分析濕熱蘊結(jié)型痛風患者的淋巴細胞亞群特點。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2019年1月至2019年12月在江蘇省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院風濕免疫科門診就診的濕熱蘊結(jié)型痛風患者96例為痛風組，男88例，女8例;平均年齡（52.53±17.32）歲;平均病程（5.81±4.59）年;平均尿酸水平（494.07±109.1）μmol·L-1[男（495.26±107.98）μmol·L-1，女（492.88±143.11）μmol·L-1];其中尿酸生成過多型5例（5.21%），排泄不良型80例（83.33%），混合型11例（11.46%）。同時選取50例健康體檢者為對照組，男34例，女16例;平均年齡（51.40±18.07）歲。所有痛風患者均滿足2015年美國風濕病學會（ACR）/歐洲抗風濕病聯(lián)盟（EULAR）痛風診斷標準[7]及2012年《中醫(yī)病證診斷療效標準》中痛風濕熱蘊結(jié)型診斷標準[8]。排除合并其他免疫性疾病或代謝性疾病者;合并嚴重的心、肝、肺、腎等臟器功能損害，惡性腫瘤，有病毒感染者，妊娠及哺乳期婦女;近2周有感染性疾病者。

1.2 研究方法 用抗凝采血管采集患者空腹靜脈血2 mL。使用美國貝克曼公司FC-500流式細胞分析儀檢測各部分細胞比例?？俆淋巴細胞為CD3+T細胞，輔助/誘導T淋巴細胞為CD3+CD4+細胞，抑制/細胞毒T細胞為CD3+CD8+細胞，NK細胞為CD3-CD16+/56+細胞，B淋巴細胞為CD3-CD19+細胞。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 24.0軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料符合正態(tài)分布以表示，2組間比較采用t檢驗，多組間進行單因素方差分析，組間進行多重比較;不符合正態(tài)分布者轉(zhuǎn)化為正態(tài)分布后行統(tǒng)計分析。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 濕熱蘊結(jié)型痛風患者與對照組淋巴細胞亞群比較 濕熱蘊結(jié)型痛風組患者的淋巴細胞、抑制/細胞毒T淋巴細胞高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。總T淋巴細胞、輔助/誘導T淋巴細胞、B淋巴細胞、NK細胞2組間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05）。見表1。

2.2 不同性別濕熱蘊結(jié)型痛風患者淋巴細胞亞群比較 女性痛風患者總T淋巴細胞、輔助/誘導細胞淋巴細胞明顯低于男性患者，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。淋巴細胞、抑制/細胞毒T淋巴細胞、B淋巴細胞、NK細胞2組間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05）。見表2。

2.3 不同尿酸排泄類型患者淋巴細胞亞群比較 排泄不良型痛風患者NK細胞明顯低于生成過多型及混合型，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）;其他細胞組間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05）。見表3。

2.4 不同尿酸排泄類型患者B淋巴細胞及NK細胞組間多重比較 排泄不良型痛風患者B淋巴細胞與混合型比較，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。排泄不良型痛風患者NK細胞與生成過多型及混合型比較，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。見表4。

3 討 論

痛風是炎癥性關(guān)節(jié)炎的最常見原因，發(fā)達國家和發(fā)展中國家的發(fā)病率和患病率均在增加[9]。2017年全球痛風估計為744萬例（發(fā)病率0.097%），患病率為0.54%，造成128萬DALYs（占所有DALYs的0.051%）。痛風的患病人群男性均高于女性，引起的經(jīng)濟負擔也呈線性增加[10]。痛風屬中醫(yī)學“痹病”“白虎病”“歷節(jié)風”范疇。張有為等[11]發(fā)現(xiàn)，濕熱蘊結(jié)證痛風占56.99%，提示濕熱蘊結(jié)是臨床痛風的常見中醫(yī)證型。體內(nèi)尿酸水平的平衡主要依靠尿酸生成和排泄來維持。尿酸的排泄主要通過腸道和腎臟，腎小球濾過、重吸收和分泌是個復雜的過程。一般情況下，約90%的腎小球濾過尿酸鹽被重吸收回血液中，只有10%左右被排泄。但是，大多數(shù)痛風患者的尿酸排泄效率低下，導致高尿酸血癥。超過90%的痛風患者屬于尿酸排泄不良型[12]。

T淋巴細胞介導細胞免疫，反映了機體總體細胞的免疫狀態(tài)，B淋巴細胞介導體液免疫，NK細胞介導固有免疫。NK細胞屬于固有淋巴樣細胞，其主要功能是為生物體提供針對感染、自體轉(zhuǎn)化細胞和同種異體細胞產(chǎn)生快速免疫反應(yīng)[13-14]。輔助/誘導T淋巴細胞輔助機體完成各種免疫活動，Th17細胞和Treg細胞是其中兩種亞型，Th17細胞通過分泌白細胞介素（IL）-17、IL-6等多種炎癥因子介導炎癥反應(yīng)，而Treg分泌IL-10等抑炎因子發(fā)揮抑制自身免疫應(yīng)答的作用，在機體受病毒侵襲時第一時間進行防御和消滅[15]。抑制/細胞毒T淋巴細胞可抑制機體的免疫應(yīng)答，只有兩者保持動態(tài)平衡才能維持機體正常的細胞免疫[16]。NK細胞不需要用抗原引發(fā)即可完全發(fā)揮功能，通過識別主要組織相容性復合體Ⅰ類分子或直接與細胞表面配體結(jié)合從而直接殺死靶細胞。NK細胞是最早到達組織炎癥部位并通過釋放大量包括γ干擾素等細胞因子來對抗感染、腫瘤等免疫應(yīng)答的固有免疫細胞[17]。

本研究發(fā)現(xiàn)，痛風患者輔助/誘導T淋巴細胞、NK細胞略低于對照組，而B淋巴細胞、抑制/細胞毒T淋巴細胞略高于對照組，可見痛風性關(guān)節(jié)炎疾病發(fā)展也與整體免疫失衡相關(guān)。余文戈等[18]同樣發(fā)現(xiàn)，痛風患者體內(nèi)NK細胞數(shù)量較正常對照組明顯減少，考慮可能與其參與體內(nèi)炎癥反應(yīng)有關(guān);同時發(fā)現(xiàn)，痛風患者CD4+T細胞較正常對照組升高，考慮可能與巨噬細胞釋放出抗原信息傳遞給CD4+

T細胞有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，痛風濕熱蘊結(jié)型患者輔助/誘導T淋巴細胞較對照組略減少;平時臨床觀察發(fā)現(xiàn)，男性吸煙患者輔助/誘導T淋巴細胞較正常組減少。痛風患者常合并不良飲食及煙酒等生活習慣，此結(jié)果可能也與此有關(guān)，但具體原因仍需后期進一步明確。痛風濕熱蘊結(jié)型患者抑制/細胞毒T淋巴細胞明顯高于對照組，考慮痛風使免疫功能調(diào)節(jié)發(fā)生障礙，抑炎因子分泌量隨之減少，使得機體處于免疫抑制狀態(tài)。排泄不良型患者NK細胞含量較另外2組下降更加明顯，具體原因是否與患者血尿酸水平、飲食生活習慣、病程、是否合并痛風石等相關(guān)，仍需后續(xù)進一步研究明確。劉炳等[19]對四川宜賓健康成人外周淋巴細胞亞群進行分析后發(fā)現(xiàn)，不同地區(qū)患者在年齡、性別間存在差異。本研究也發(fā)現(xiàn)，不同性別患者在淋巴細胞亞群間存在差異。但此次研究濕熱蘊結(jié)型痛風女性患者、混合型、生成過多型患者樣本量較少，仍需后續(xù)大樣本繼續(xù)研究。

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收稿日期：2020-03-21;修回日期：2020-05-01