系統(tǒng)性紅斑狼瘡孕婦IIF法呼吸道病原體抗體假陽(yáng)性1例報(bào)告

畢勝飛 高學(xué)智

酒鋼醫(yī)院，甘肅 嘉峪關(guān)735100

1 病例資料

患者，女，37歲，2017年于我院診斷為系統(tǒng)性紅斑狼瘡，以潑尼松片（30mg，po，qd）及硫酸羥喹片（0.2g，po，bid）規(guī)范治療，病情控制平穩(wěn)。2019年10月11日因全身關(guān)節(jié)痛、活動(dòng)受限入院治療。實(shí)驗(yàn)室檢查，血沉：41mm/h、RF：47、抗核抗體譜（ANA、ENA、RNP、SM、SSA、SSB）陽(yáng)性，尿蛋白定量0.67mg/24h，補(bǔ)體C3、C4明顯下降，其余未見(jiàn)異常。B超檢查：見(jiàn)宮內(nèi)13mm×6mm妊囊，提示宮內(nèi)早孕。2019年10月14日，患者自愿接受無(wú)痛人流術(shù)，次日出現(xiàn)發(fā)熱表現(xiàn)，多次采集痰培養(yǎng)及血培養(yǎng)，痰培養(yǎng)結(jié)果檢出正常菌群生長(zhǎng)，血培養(yǎng)未檢出細(xì)菌。靜滴頭孢曲松鈉、乳酸左氧氟沙星、鹽酸莫西沙星無(wú)效。

2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

2.1 間接免疫熒光法（IIF）檢測(cè)結(jié)果 患者呼吸道病原體IgM抗體MP、ADV、RSA、FluA、FluB、PIV呈現(xiàn)陽(yáng)性熒光模式，熒光亮度與陽(yáng)性對(duì)照相似。經(jīng)重新采集患者血清樣本，以相同試劑進(jìn)行復(fù)查，檢測(cè)結(jié)果與初次檢測(cè)結(jié)果相同。見(jiàn)表1。

2.2 MP、ADV、RSA、FluA、FluB、PIV抗原檢測(cè)結(jié)果 以病毒采樣管采集患者咽拭子，對(duì)間接免疫熒光法陽(yáng)性項(xiàng)目送檢外部檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)。本地疾控中心采用RT-PCR法檢測(cè)RSA、FluA、FluB，檢測(cè)結(jié)果為陰性。金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心采用RT-PCR法檢測(cè)MP、ADV、PIV，檢測(cè)結(jié)果為陰性。2.3 ELISA法檢測(cè)MP抗體結(jié)果 采集患者血清，送檢金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心，以ELSIA法檢測(cè)患者肺炎支原體IgM抗體、肺炎支原體IgG抗體，結(jié)果均為陰性。

表1 間接免疫熒光法檢測(cè)結(jié)果

2.4 治療與轉(zhuǎn)歸 結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，考慮患者呼吸道病原體抗體假陽(yáng)性，更改治療方案為口服醋酸潑尼松片（12.5mg，qd）、碳酸鈣D3顆粒（3g，tid），癥狀緩解。

3 討論

呼吸道感染在臨床上是一種比較常見(jiàn)的疾病，感染者多數(shù)在發(fā)病1周后血液中可以檢測(cè)到相應(yīng)特異性IgM抗體［2］。目前，對(duì)于呼吸道感染的疑似患者，進(jìn)行相應(yīng)的呼吸道病原譜檢測(cè)已成為臨床診斷的一種常用篩查手段。IIF多聯(lián)呼吸道病原體抗體檢測(cè)試劑對(duì)診斷呼吸道感染中具有重要價(jià)值，但其假陽(yáng)性報(bào)道極少，在檢驗(yàn)工作中，常將多種呼吸道病原體抗體陽(yáng)性判定為聯(lián)合感染。本報(bào)道所述病例，IIF法多種病原體IgM抗體陽(yáng)性，核酸檢測(cè)抗原陰性，ELSIA法檢測(cè)MP抗體陰性，提示IIF法檢測(cè)試劑可能存在假陽(yáng)性反應(yīng)，現(xiàn)將可能引起IIF檢測(cè)假陽(yáng)性因素總結(jié)如下：（1）特殊體質(zhì)或嗜異性抗體的存在雖未有報(bào)道提及特殊體質(zhì)或嗜異性抗體可能造成IIF假陽(yáng)性，但有研究顯示，某些疾病如惡性腫瘤、自身免疫性疾病等患者體內(nèi)含有某些治療性抗體、自身抗體、甲胎蛋白等會(huì)對(duì)多種免疫實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生非特異性反應(yīng)［3-6］；一些免疫實(shí)驗(yàn)也會(huì)受到特殊人群如孕婦、嬰幼兒、老年人等體內(nèi)嗜異性抗體的影響［6］。（2）標(biāo)本采集和方法學(xué)局限呼吸道病原體核酸檢測(cè)采樣多使用鼻咽拭子進(jìn)行病原體采樣，患者正確采樣以及醫(yī)務(wù)人員的規(guī)范操作難以保障。龔亞?wèn)|等［7］的報(bào)道顯示，咽拭子快速培養(yǎng)法和血清MP-IgM檢測(cè)法的敏感性均較高，雖然PCR的特異性是毋庸置疑的，但期檢測(cè)靈敏度僅4.15%。（3）存在某些自身抗體的干擾VIRCELL公司呼吸道病原體九項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)試劑中，MP孔包被物為小鼠纖維母細(xì)胞（MsCoy）中的肺炎支原體。與MP相似，本實(shí)驗(yàn)室IIF法陽(yáng)性的其余五項(xiàng)均以細(xì)胞作為基質(zhì)，如ADV、RSV以人喉表皮樣癌細(xì)胞（HEP-2細(xì)胞）作為基質(zhì)，F(xiàn)luA、FluB、PIV恒河猴腎細(xì)胞（LLC-MK2細(xì)胞）作為基質(zhì)；三項(xiàng)陰性檢測(cè)結(jié)果均未使用細(xì)胞作為基質(zhì)。以HEP-2細(xì)胞為例，其在檢測(cè)自身抗體時(shí)常作為細(xì)胞基質(zhì)。在Dellavance A［8］等對(duì)d70抗體的國(guó)際自身抗體參考標(biāo)準(zhǔn)中也提及，抗DFS70自身抗體在對(duì)HEp-2細(xì)胞進(jìn)行間接免疫熒光檢測(cè)時(shí)會(huì)產(chǎn)生特征性的密集斑點(diǎn)核模式。（4）假陽(yáng)性熒光偽影的干擾IIF測(cè)試的性能受到較多技術(shù)細(xì)節(jié)的影響，包括細(xì)胞培養(yǎng)條件，細(xì)胞固定、標(biāo)記抗體的來(lái)源和滴度、封閉介質(zhì)，洗滌緩沖液等。這些因素都可能在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中引起假陽(yáng)性熒光偽影產(chǎn)生，為了避免假陽(yáng)性熒光偽影的形成，在每次測(cè)定中均應(yīng)使用陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)

照［9］。

本報(bào)道表明，使用IIF檢測(cè)呼吸道病原體抗體存在諸多干擾因素，可能帶來(lái)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的假陽(yáng)性，這些因素在檢驗(yàn)工作中可能被忽視，因此，建立合理的檢測(cè)和分析流程尤為重要。檢驗(yàn)科作為醫(yī)院的重要組成部分，負(fù)責(zé)對(duì)疾病的輔助診斷工作，但檢驗(yàn)不應(yīng)脫離臨床，檢驗(yàn)科通過(guò)與臨床的有效溝通，可促進(jìn)臨床標(biāo)本的正確采集、檢驗(yàn)結(jié)果的正確解讀和分析［10］。此外，檢驗(yàn)人員的操作和處理問(wèn)題的能力在工作中尤為重要，嚴(yán)格按照操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行規(guī)范操作，合理的設(shè)置陰性和陽(yáng)性對(duì)照，對(duì)不符合臨床的陽(yáng)性結(jié)果進(jìn)行其他方法學(xué)的比較，都可能避免因某種方法學(xué)性能限制引起假陽(yáng)性結(jié)果對(duì)臨床病例判斷的誤導(dǎo)。