制備工藝對維生素B1片溶出行為的影響

劉思聰，韓 丹，張大軍，張 俊，肖 燃*

（1.沈陽醫(yī)學院藥學院2018級藥學專業(yè)，遼寧沈陽 110034；2.沈陽醫(yī)學院藥學院2016級藥學專業(yè)，遼寧沈陽 110034；3.沈陽醫(yī)學院藥學院化學教研室，遼寧沈陽 110034；4.沈陽醫(yī)學院法醫(yī)司法鑒定所，遼寧沈陽 110034）

維生素B1（VitB1，VB1）是人體所需營養(yǎng)素之一，維生素B1不僅與心臟，神經(jīng)及消化系統(tǒng)的正常運轉(zhuǎn)有密切的聯(lián)系，也是碳水化合物新陳代謝不可缺少的必要底物[1-3]。維生素B1在酸性環(huán)境中比較穩(wěn)定，在堿性溶液中不穩(wěn)定，易被氧化和受熱破壞。維生素B1有引濕性，露置在空氣中，易吸收水分，遇光和熱效價下降。此外，紫外線也可使維生素B1分解。維生素B1的不穩(wěn)定性為其片劑的制備帶來了困難，因此制備工藝的選擇對于片劑的質(zhì)量可能具有重要的影響[4-5]。本研究擬采用溶出度和溶出曲線作為指標，考察粉末直壓法、干法制粒壓片法和濕法制粒壓片法三種制備工藝對維生素B1片質(zhì)量的影響，為維生素B1片劑一致性評價提供參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器和設備

RC12AD 溶出試驗儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司），BSA124S-CW Sartorius 電子天平（陽杰龍儀器有限公司），UV1102紫外-可見分光光度計（上海天美科學儀器有限公司），KQ-250B 型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），pH計BANTE，ZP-5旋轉(zhuǎn)壓片機（上海天和制藥機械有限公司），WGL-65B 電熱鼓風干燥箱（天津市泰斯特儀器有限公司），金屬篩網(wǎng)（浙江上虞區(qū)華豐五金儀器有限公司），YD-1片劑硬度測試儀（天津市精拓儀器科技有限公司），GL 系列干法制粒機（江蘇張家港市開創(chuàng)機械制造有限公司）。

1.2 材料

磷酸二氫鉀（分析級，天津市恒興化學試劑制造有限公司），氫氧化鈉（分析級，天津市瑞金特化學品有限公司），無水乙酸鈉（分析級，天津市恒興化學制劑制造有限公司），冰醋酸（分析級，天津市永大化學試劑有限公司），鹽酸（分析級），蔗糖（安徽山河，批號161704），乳糖（安徽山河，批號170801），玉米淀粉SH-M（安徽山河，批號20070002），預膠化淀粉SH-NY-J（安徽山河，批號180108），善達預膠化淀粉（上?？房?，批號IN534607），硬脂酸鎂SH-YM-CM（安徽山河，批號170214），滑石粉300目（桂林桂廣滑石開發(fā)有限公司，批號2013002），維生素B1片（東北制藥廠，批號5170302）。

2 方法與結果

2.1 處方組成

一水乳糖30g，蔗糖15g，VB1 10g，玉米淀粉25g，預膠化淀粉19g，硬脂酸鎂0.5g，滑石粉0.5g，制得1 000片。

2.2 片劑的制備工藝

2.2.1 粉末直壓法

將維生素B1、淀粉、預膠化淀粉、蔗糖、乳糖混勻，過80目篩，加硬脂酸鎂和滑石粉混勻，6號沖壓片，片劑硬度4N 左右。

2.2.2 干法制粒壓片

將維生素B1、淀粉、預膠化淀粉、蔗糖、乳糖混勻，過80目篩，經(jīng)過干法制粒機制粒，6號沖壓片，片劑硬度4N 左右。

2.2.3 濕法制粒壓片

將維生素B1、淀粉、預膠化淀粉、蔗糖、乳糖混勻，過80目篩，蒸餾水適量制軟材，30目篩制粒，60℃干燥2～3h（顆粒水分為5%～6%），40目篩整粒，加硬脂酸鎂和滑石粉混勻，6號沖壓片，片劑硬度4N 左右。

2.3 溶出樣品中維生素B1含量測定方法[6-7]

2.3.1 對照品溶液制備

精密稱取維生素B1 25mg 置于100mL 棕色容量瓶中，以水溶解，定容，搖勻制得250μg/mL 維生素B1儲備液。精密量取儲備液2.5mL 于50mL 棕色容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度為12.5μg/mL 維生素B1溶液，得對照品溶液，備用。

2.3.2 檢測波長的選擇

使用紫外分光光度計對維生素B1對照品溶液進行全波長掃描，在200～600nm，維生素B1在246nm 波長下有較大的吸收，因此本研究選擇246nm 作為檢測波長。

2.3.3 線性與范圍

精密吸取1、1.5、2、2.5、3、3.5 和4mL 維生素B1 儲備液于50mL 棕色容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，配制成濃 度 為5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、17.5 和20.0μg/mL 的 維生素B1系列標準溶液，采用紫外分光光度法在246nm 處測定吸光度，以吸光度（Y）為縱坐標、標準溶液濃度（X）為橫坐標繪制標準曲線。得回歸方程Y=0.031X+0.0681，相關系數(shù)R2＞0.999。結果表明，維生素B1 在5.1～20.4μg/mL 范圍內(nèi)，線性關系良好。

2.3.4 精密度試驗

取12.5μg/mL VB1對照品溶液，在246nm 處連續(xù)測定6次，記錄吸光度。結果維生素B1吸光度RSD 為1.59%，表明儀器的精密度良好。

2.3.5 回收率試驗

精密吸取250μg/mL VB1儲備液2、2.5、3mL 于50mL 棕色容量瓶中，蒸餾水定容，制成10.0、12.5 和15.0μg/mL 低中高3種濃度樣品液，每種濃度平行制備3份。使用紫外分光光度法在246nm 處測定吸光度并代入標準曲線，計算其濃度，將此測定濃度與理論濃度相比得方法回收率。結果顯示，低中高三個濃度下的回收率分別為（98.6±1.2%），（100.1±1.1%），（100.7±1.3%），表明該方法的回收率良好。

2.3.6 穩(wěn)定性試驗

取維生素B1 1份，溶解于蒸餾水后，分別放置于室溫和37℃水浴中放置24h，于0、1、2、3、4、6、8、10、12、24h取樣，按上述紫外分光光度法進行測定，以維生素B1吸光度計，在室溫和37℃下RSD 分別為1.78%和1.53%。表明藥物在室溫和37℃下24h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.4 溶出度及溶出曲線的測定

測定不同工藝制得對維生素B1片的溶出度及溶出曲線的影響。溶出度方法參照中國藥典2015年版通則“0931 溶出度與釋放都測定法”第二法（槳法）進行測定。各樣品隨機抽取片劑6片，分別選擇蒸餾水、pH=1.0、pH=4.0、pH=6.8的4種溶液900mL 為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50r/min，避光操作，分別在5、10、15、20、30、45、60min 時取樣1mL（同時立即補充10mL 相同溫度的溶出介質(zhì)），微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液為供試品溶液，按紫外分光光度法進行測定。

本研究選擇了水、pH=1.0、pH=4.0、pH=6.8的4種溶液作為溶出介質(zhì)，考察溶出介質(zhì)對于市售維生素B1片及自制片劑溶出度的影響。結果表明，除水外的3種溶出介質(zhì)中藥物溶出度無顯著差異，而以水為溶出介質(zhì)時，市售參比制劑與自制片劑具有區(qū)分度，故使用水為溶出介質(zhì)進行下一步研究。三種工藝制得的片劑在蒸餾水中的溶出度如表1所示。結果表明，三種工藝制得的維生素B1片60min 內(nèi)溶出度均＞95%，符合規(guī)定。

表1 不同樣品溶出度測定結果（n=6）

不同制備工藝對維生素B1溶出曲線的影響結果如圖1所示。結果表明，粉末直壓法和干法制粒壓片法制得的片劑在蒸餾水中的溶出行為基本一致，而濕法制粒壓片法得到的片劑與參比制劑溶出行為更接近。使用前20min 的溶出數(shù)據(jù)計算溶出曲線相似因子，結果粉末直壓法、干法制粒壓片法、濕法制粒壓片法得到的片劑與參比制劑在蒸餾水中溶出曲線相似因子分別是22、22、55，表明濕法制粒壓片法得到的片劑與參比制劑溶出行為相似，但相似因子為55，可能增加BE 實驗不成功的風險。

圖1 不同制備工藝的樣品與參比制劑在蒸餾水中溶出曲線比較（n=6）

3 結論

通過上述結果分析，不同制備工藝對產(chǎn)品的溶出行為有較大的影響。干法制粒壓片法和粉末直接壓片法得到的片劑溶出速度快，但是與市售參比制劑溶出行為有較大的差異，且粉末直接壓片法對于輔料和工藝要求較高，十分容易影響產(chǎn)品質(zhì)量。按傳統(tǒng)的濕法制粒壓片工藝制備的維生素B1片，由于被包裹在顆粒中，不宜崩解釋放，從而導致釋放緩慢，但與其他兩種制備工藝相比，其釋放行為與市售參比制劑較為相似，且濕法制粒壓片工藝過程中維生素B1穩(wěn)定性良好。本研究為維生素B1片質(zhì)量和療效一致性評價工作奠定了基礎。