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    紫花苜蓿對銅鉛復(fù)合污染土壤的修復(fù)效應(yīng)研究

    2020-11-14 11:21:02呂力欣閆霄珂郭后慶張祖麟
    金屬礦山 2020年10期
    關(guān)鍵詞:結(jié)合態(tài)凈光合重金屬

    呂力欣 閆霄珂 郭后慶,3 楊 列,2 吳 麗,2 張祖麟,2

    (1.武漢理工大學(xué)資源與環(huán)境工程學(xué)院,湖北武漢430070;2.礦物資源加工與環(huán)境湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖北武漢430070;3.荊門市詠泉水質(zhì)檢測有限公司,湖北荊門448000)

    根據(jù)2014年《全國土壤污染狀況調(diào)查公報(bào)》顯示,工礦業(yè)廢棄地土壤環(huán)境問題突出[1],Pb、Cu復(fù)合污染是銅礦區(qū)常見的污染類型,重金屬污染具有隱蔽性、長期性、危害性強(qiáng)等特點(diǎn)[2]。Cu是生物生長發(fā)育所必須的微量營養(yǎng)元素,但過量的Cu會(huì)對產(chǎn)物產(chǎn)生較高的毒害效應(yīng),或者在農(nóng)作物中累積并通過食物鏈影響人類的身體健康[3]。Pb是植物生長非必需的營養(yǎng)元素,具有較強(qiáng)的環(huán)境生態(tài)毒性。土壤修復(fù)技術(shù)有很多種,主要包括工程修復(fù)法、物理化學(xué)修復(fù)法、化學(xué)修復(fù)法、生物修復(fù)法等[4]。植物修復(fù)技術(shù)是利用植物對重金屬的富集作用,降低土壤中的重金屬含量或毒性,是一種環(huán)境親和性修復(fù)技術(shù)[5],具有安全、經(jīng)濟(jì)、低耗等優(yōu)點(diǎn),且相較于其他修復(fù)技術(shù),植物修復(fù)可以修復(fù)復(fù)雜的土壤污染,達(dá)到對土壤的綜合修復(fù),植物修復(fù)技術(shù)正在成為土壤重金屬修復(fù)的主要手段之一[6,7]。本研究以紫花苜蓿做修復(fù)植物,采取室內(nèi)盆栽實(shí)驗(yàn)方法,探究Cu、Pb復(fù)合污染對紫花苜蓿生長發(fā)育的影響以及紫花苜蓿對Cu、Pb復(fù)合污染土壤的修復(fù)作用。以期為銅礦區(qū)復(fù)合重金屬污染土壤治理技術(shù)的發(fā)展提供理論依據(jù)。

    1 實(shí)驗(yàn)材料和研究方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)材料

    實(shí)驗(yàn)所用土壤為武漢理工大學(xué)馬房山校區(qū)杜鵑園表層土壤,無重金屬污染史。其理化性質(zhì):pH=7.46,有機(jī)質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.472%,總磷和總氮的質(zhì)量比分別為0.834 mg/g和0.232 mg/g。實(shí)驗(yàn)前置于陰涼通風(fēng)處晾干,每日進(jìn)行翻土處理,去除玻璃碎石及草根等雜質(zhì),并過10目篩。用超純水分別配制CuCl2溶液和PbCl2溶液,使其濃度分別為31.875 mg/mL和4.25 mg/mL,并將其均勻噴灑至土樣,混合制得實(shí)驗(yàn)所需污染土壤,在避光處存放20 d。

    實(shí)驗(yàn)所用試劑 CuCl2·2H2O、PbCl2、MgCl2、濃硝酸、濃鹽酸、H2O2、酒石酸鉀、醋酸銨、去離子水等均為分析純試劑。實(shí)驗(yàn)所采用的紫花苜蓿種子購自武漢市科農(nóng)農(nóng)業(yè)服務(wù)專業(yè)合作社。

    1.2 測定方法

    (1)發(fā)芽率。試驗(yàn)中每盆播種50顆種子,并于播種7 d后觀察記錄種子發(fā)芽數(shù),計(jì)算發(fā)芽率。

    (2)植物凈光合速率的測定。植物葉片的凈光合速率采用Li-6400XT光合儀進(jìn)行檢測。

    (3)土壤總氮含量測定。土壤總氮含量采用微波消解—納氏試劑比色—分光光度法測定[8]。

    (4)植物體內(nèi)重金屬含量測定。植物用純水沖洗干凈后,置于恒溫電熱干燥箱中,在105℃條件下完全烘干,取出磨碎,采用微波消解法消解完全,使用火焰原子吸收分光光度法測定。

    (5)土壤中重金屬形態(tài)測定。采用Tessier五步法進(jìn)行提取,并用火焰原子分光光度法進(jìn)行測定。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)

    本實(shí)驗(yàn)使用室內(nèi)盆栽的方法,進(jìn)行模擬修復(fù)研究,分別準(zhǔn)確稱取12份850 g風(fēng)干過篩土樣于12個(gè)塑料花盆中,按污染水平分為4組,其金屬含量分別為:Cu 0 mg/kg 、Pb 0 mg/kg,Cu 375 mg/kg、Pb 50 mg/kg,Cu 750 mg/kg、Pb 75mg/kg,Cu 1 125 mg/kg、Pb 100 mg/kg,分別記為T0、T1、T2、T3,每組設(shè)置3個(gè)平行樣,分別編為a、b、c,在每種污染水平,編號a、b均為平行對照組,c為無植物對照組。有植物組播種量為50顆/盆。實(shí)驗(yàn)期間,所有盆栽不施肥,所受光照時(shí)間、去離子水澆灌量均充足且相等,待植物生長穩(wěn)定后開始從盆栽底部取土,7 d為1周期進(jìn)行測定。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    本實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)采用Microsoft Office2016、SPSS20.0和Origin2020進(jìn)行基礎(chǔ)處理、統(tǒng)計(jì)分析和繪圖。

    本實(shí)驗(yàn)涉及計(jì)算公式如下:

    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論

    2.1 Cu、Pb金屬復(fù)合污染對紫花苜蓿生長發(fā)育的影響

    2.1.1 金屬污染對紫花苜蓿種子的影響

    在Cu、Pb復(fù)合污染的條件下,供試紫花苜蓿種子的發(fā)芽率如表1所示。Cu、Pb金屬離子濃度較低時(shí),對紫花苜蓿種子萌發(fā)的抑制作用并不顯著。隨著濃度的增加,污染土壤對種子萌發(fā)的抑制作用便開始顯現(xiàn),且抑制作用隨Cu、Pb濃度升高而增強(qiáng)。在Cu 1 125 mg/kg、Pb 100 mg/kg的條件下,種子發(fā)芽率僅為無污染對照組的56.45%。其他植物也表現(xiàn)出相似特性,青葙種子在銅離子濃度較低時(shí)表現(xiàn)出一定的耐銅能力,濃度升高后,濃度越大抑制作用越明顯[9];鉛脅迫下小麥種子發(fā)芽率低[10];Pb、Cu復(fù)合處理對南蛇藤種子具有低濃度下的刺激作用,隨著濃度的增加,轉(zhuǎn)變?yōu)橐种谱饔?,并不斷加?qiáng)[11]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,隨著Cu、Pb濃度升高,Cu、Pb污染土壤對種子萌發(fā)呈現(xiàn)顯著的抑制效應(yīng)。

    2.1.2 金屬污染對紫花苜蓿凈光合速率的影響

    在不同濃度的復(fù)合金屬污染條件下,各實(shí)驗(yàn)組植株隨時(shí)間變化的凈光合速率如圖1。復(fù)合金屬離子濃度較低時(shí)(T1),實(shí)驗(yàn)后期其對植物凈光合速率沒有明顯的抑制作用,當(dāng)復(fù)合金屬離子濃度超過一定值時(shí)(T2、T3),實(shí)驗(yàn)后期植物的光合作用受到抑制。類似的抑制現(xiàn)象在其他植物研究中也被發(fā)現(xiàn)。張文韜等研究發(fā)現(xiàn),Pb、Cu兩種重金屬在抑制蕹菜凈光合速率方面也表現(xiàn)出相似的規(guī)律,當(dāng)施加較少重金屬時(shí),凈光合速率有一定幅度上升,而施加濃度較高時(shí),凈光合速率大幅度下降且證明了Pb、Cu存在協(xié)同作用[12]。李燕研究發(fā)現(xiàn)低濃度Pb、Cu對葉綠素合成有刺激效應(yīng),隨處理濃度增高,葉綠素含量逐漸降低,葉綠素含量高低一定程度上反映光合作用水平[11]。研究表明,高濃度 Pb、Cu對苜蓿光合作用存在抑制作用。

    2.1.3 金屬污染對紫花苜蓿氮吸收的影響

    不同實(shí)驗(yàn)條件下土壤總氮含量的變化曲線如圖2,圖2(a)~圖2(d)分別對應(yīng) T0、T1、T2、T3組土壤總氮的變化曲線,其中,對照組均為無植物對照。根據(jù)圖2(a)和圖2(b)可以明顯地看出,當(dāng)金屬污染物濃度較低時(shí)(Cu 375 mg/kg、Pb 50 mg/kg),植物對氮的吸收未出現(xiàn)顯著抑制效應(yīng)。說明植物氮吸收對金屬污染有一定的耐受性。隨著金屬濃度的增加,植物對氮的吸收量呈下降趨勢,說明較高濃度的金屬污染抑制植物氮吸收,且金屬濃度越高,抑制效應(yīng)越顯著,氮素吸收效率越低。

    紫花苜蓿為豆科植物,可通過結(jié)瘤固氮作用,將空氣中的氮轉(zhuǎn)化為氨,但植物生長所需氮素的33%到80%為根瘤菌提供[13],其固氮量無法滿足植物生長對氮的需求,因此土壤也是苜蓿另一重要的氮來源。土壤中植物可利用氮素主要有硝態(tài)氮、氨態(tài)氮等無機(jī)氮、自由態(tài)氨基酸等低分子有機(jī)質(zhì)[14]。土壤重金屬達(dá)到一定濃度會(huì)影響植物氮素吸收,一方面,高濃度的Cu污染會(huì)損傷豆科植物根部,干擾固氮的正常生理過程[15];另一方面,Pb抑制根系對硝態(tài)氮的吸收和由硝態(tài)氮向氨態(tài)氮轉(zhuǎn)化的過程[16],影響植物獲取氮素營養(yǎng)。

    2.2 植物體內(nèi)Cu、Pb含量分析

    植物根部及地上部Cu、Pb積累量如表2所示,植物體內(nèi)Cu、Pb積累量隨外源Cu、Pb處理量的增加而增加。各污染級實(shí)驗(yàn)組扣除空白組重金屬含量,Cu的生物富集系數(shù)分別為 0.194 7、0.173 1、0.154 7,隨土壤Cu含量的增加而減小,Pb的生物富集系數(shù)分別為0.154 4、0.205 2、0.298 8,隨土壤Pb含量的增加而增加。重金屬Cu的提取效率分別為1.91%、1.91%、3.05%,Pb的提取效率分別為2.98%、5.43%、7.27%。Cu的轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù)分別為0.097 9、0.110 6、0.197,Pb的轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù)分別為0.193、0.264 5、0.243 3。植物對重金屬污染土壤中重金屬離子的富集和遷移能力是其修復(fù)能力的主要體現(xiàn)[17],植物體內(nèi)各部位 Cu、Pb濃度與土壤Cu、Pb投加量成正相關(guān),轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù)基本隨污染程度的增加而增加,說明紫花苜蓿對于Cu、Pb復(fù)合污染土壤的2種重金屬均具備較好的修復(fù)能力。

    2.3 植物根際土壤Cu、Pb形態(tài)分析

    2.3.1 Pb的形態(tài)分析

    根據(jù)Tessier五步法對植物根際土壤進(jìn)行提取,Tessier將金屬形態(tài)分為可交換態(tài)、碳酸鹽結(jié)合態(tài)、鐵—錳氧化物結(jié)合態(tài)、有機(jī)物結(jié)合態(tài)和殘?jiān)鼞B(tài)5種形態(tài)[18]。如圖3所示,植物根際土壤中5種形態(tài)均存在,可交換態(tài)含量最低,隨Pb污染程度的增加而少量增加。植物修復(fù)初期,碳酸鹽結(jié)合態(tài)>有機(jī)態(tài)>鐵—錳化合物結(jié)合態(tài)>殘?jiān)鼞B(tài)>可交換態(tài);植物修復(fù)后期,殘?jiān)鼞B(tài)>碳酸鹽結(jié)合態(tài)>有機(jī)態(tài)>鐵-錳氧化物結(jié)合態(tài)>可交換態(tài)。

    其中,可交換態(tài)、碳酸鹽結(jié)合態(tài)遷移性強(qiáng),活性大,生物毒性強(qiáng),鐵—錳氧化物結(jié)合態(tài)和有機(jī)態(tài)被稱為相對穩(wěn)定態(tài),有可能轉(zhuǎn)化為可交換態(tài)和碳酸鹽結(jié)合態(tài),殘留態(tài)的生物活性和毒性最?。?,19]。本研究中,在植物生長周期內(nèi),殘留態(tài)比例逐漸升高,生長末期是初期的4.12倍,其他形態(tài)比例均有所降低,碳酸鹽結(jié)合態(tài)比例是生長初期比例的72.12%,鐵—錳氧化物結(jié)合態(tài)是初期的60.24%,有機(jī)態(tài)是初期的56.84%。

    可移動(dòng)態(tài)(可交換態(tài)、碳酸鹽結(jié)合態(tài))Pb被植物吸收,遷移至植物體內(nèi),即植物提取,或者植物通過根系活動(dòng)促使根際土壤重金屬形態(tài)進(jìn)行重新結(jié)合和分配,使得重金屬離子以更加穩(wěn)定的形態(tài)存在,即植物修復(fù)的穩(wěn)定效應(yīng)[20]。紫花苜蓿通過吸收Pb或者促進(jìn)可移動(dòng)態(tài)Pb向穩(wěn)定態(tài)轉(zhuǎn)化,實(shí)現(xiàn)了對金屬污染土壤的修復(fù)作用,可緩解Pb污染對環(huán)境生物的毒害作用。

    2.3.2 Cu的形態(tài)分析

    植物根際土壤Cu形態(tài)含量分析如圖4所示,5種形態(tài)均存在,可交換態(tài)含量極低。植物生長初期,碳酸鹽結(jié)合態(tài)>有機(jī)態(tài)>殘?jiān)鼞B(tài)>鐵—錳氧化物結(jié)合態(tài)>可交換態(tài);生長后期,碳酸鹽結(jié)合態(tài)>殘?jiān)鼞B(tài)>有機(jī)態(tài)>鐵—錳氧化物結(jié)合態(tài)>可交換態(tài)。本研究中,根際土壤中重金屬Cu的碳酸鹽結(jié)合態(tài)、鐵—錳氧化物結(jié)合態(tài)以及有機(jī)態(tài)比例均降低,殘?jiān)鼞B(tài)比例不斷升高。其原理類似于Pb污染修復(fù),土壤中Cu受植物影響,逐漸轉(zhuǎn)化為更加穩(wěn)定的結(jié)合態(tài),即部分Cu被固定在土壤中,從而降低了Cu的生物有效性,實(shí)現(xiàn)了紫花苜蓿對于土壤Cu污染的修復(fù)。

    3 結(jié)論

    (1)土壤中低濃度的Cu、Pb對植物的生長發(fā)育未呈現(xiàn)顯著抑制作用,高濃度的Cu、Pb對植物生長發(fā)育具有明顯抑制作用。

    (2)紫花苜蓿在Cu、Pb復(fù)合污染土壤的修復(fù)方面具有良好的應(yīng)用潛力,其修復(fù)原理主要有植物提取和植物穩(wěn)定2種。部分金屬被提取到紫花苜蓿的上部,部分可移動(dòng)性金屬受到植物根系的影響,促進(jìn)其形態(tài)重新結(jié)合和分配,以更加穩(wěn)定的形態(tài)固定在土壤中,可有效降低土壤中殘余Cu、Pb的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。

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