應(yīng)雨妍
在進(jìn)行咽拭子核酸檢測(cè)時(shí),采樣人員一般會(huì)讓大家微微仰頭,張大嘴巴。然后,他們會(huì)用一根長棉簽在雙側(cè)扁桃體和舌根后較深處的咽后壁刮擦采樣。采集結(jié)束之后,采樣人員會(huì)把棉簽放進(jìn)有采樣液的采樣管里,然后擰緊蓋子。過程非常簡(jiǎn)單,受試者可能會(huì)有干嘔、咳嗽的反應(yīng),不過采集結(jié)束后很快就可以恢復(fù)。
核酸檢測(cè)可以采集的部位或分泌物有很多,如鼻咽部位、支氣管和肺泡灌洗的灌洗液、痰液和血液。那么,為什么要采用咽拭子核酸檢測(cè)呢?
在這些方法中,血液通常不大能檢測(cè)出新冠病毒。血液能檢測(cè)到的是身體針對(duì)新冠病毒產(chǎn)生的抗體,但產(chǎn)生抗體只能說明受試者感染過病毒,不能判斷他目前是否是感染者。而且抗體的產(chǎn)生需要時(shí)間,在感染之初,可能無法檢測(cè)到抗體的存在。因此,用血液樣本進(jìn)行篩查是不可行的。
其余的幾種方法中,支氣管和肺泡灌洗液的敏感性最高,可以達(dá)到93%;痰液樣本稍弱,為72%。通俗地說,敏感性評(píng)判的是檢測(cè)方法準(zhǔn)確判斷感染者的成功率,93%就相當(dāng)于在100個(gè)感染者中,通過支氣管和肺泡灌洗液檢測(cè)可以成功發(fā)現(xiàn)93個(gè)。
但這三種方法顯然都更適合已經(jīng)確診且住院的患者,而且采樣人員需要更高級(jí)別的安全防護(hù),對(duì)于大規(guī)模的篩查來說并不太現(xiàn)實(shí)。根據(jù)研究,新冠病毒的受體ACE2在上皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞上有豐富的表達(dá),在上呼吸道(包括鼻、咽、喉部)中,病毒有很高的復(fù)制水平。因此,鼻拭子和咽拭子提取的上呼吸道上皮細(xì)胞和分泌物中可以捕捉到病毒。
很多人在網(wǎng)上看過鼻拭子采集示意圖。進(jìn)行鼻拭子采集時(shí),采樣人員要把棉簽插入到受試者的鼻腭處,還要轉(zhuǎn)動(dòng)拭子,充分采樣后鼻拭子再退出。如果達(dá)不到足夠的深度,很可能采集不到足夠的病毒,無法檢測(cè)受試者是否受到感染。鼻拭子可能導(dǎo)致的不適反應(yīng)包括疼痛、嘔吐反射和流淚,相對(duì)咽拭子來說,生理上的不適感和心理上的抵觸感會(huì)更強(qiáng)烈,而且對(duì)采樣人員也有更高的專業(yè)要求。
根據(jù)目前的研究,鼻拭子與咽拭子的準(zhǔn)確程度一般是等同的,或略高于咽拭子?!蹲匀弧冯s志上的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn),在患者感染病毒剛剛出現(xiàn)輕微癥狀時(shí),咽拭子檢測(cè)就已經(jīng)呈陽性了,在之后的7天里,咽拭子提取到的病毒載量都很高,峰值在第4天出現(xiàn)。而在整個(gè)病程中,鼻拭子和咽拭子的病毒載量和檢出率是沒有差異的。
因?yàn)樾鹿诓《镜母腥就緩街饕?jīng)由上呼吸道,這表明,在感染之初,病毒可能在上呼吸道中大量復(fù)制,然后隨著疾病的進(jìn)程,通過呼吸道黏膜進(jìn)入人體,深入到其他器官。在上呼吸道中病毒載量下降,載量過低的情況下,就無法呈現(xiàn)陽性結(jié)果了,所以,在接觸病毒后的感染早期,單次咽拭子采樣結(jié)果作為大規(guī)模初篩的方式是可行的,但不能用于最終確診的依據(jù)。
為什么咽拭子核酸檢測(cè)可以幫助我們判斷是否感染新冠病毒?實(shí)際上,僅僅依靠咽拭子本身是不行的,我們需要依靠的是PCR,也就是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。它的原理主要是把拭子采集到的遺傳物質(zhì)RNA提取出來,經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄變成與RNA互補(bǔ)的DNA(cDNA),然后用PCR進(jìn)行擴(kuò)增。PCR體系里包含一段由特異性序列組成的探針,被熒光基因標(biāo)記,遇到要檢測(cè)的代表病毒的靶序列時(shí),就會(huì)與它結(jié)合,發(fā)出熒光。每擴(kuò)增一條這樣的DNA鏈,就會(huì)產(chǎn)生一個(gè)熒光分子。
檢驗(yàn)人員用熒光定量PCR儀進(jìn)行檢測(cè)時(shí),會(huì)設(shè)置一個(gè)熒光分子數(shù)的閾值,監(jiān)測(cè)達(dá)到閾值需要多少次循環(huán)擴(kuò)增,需要的循環(huán)次數(shù)越少,樣本中病毒核酸濃度越高。在檢測(cè)中循環(huán)次數(shù)小于某個(gè)固定值的,就會(huì)被判定為陽性結(jié)果。
當(dāng)然,PCR的檢測(cè)結(jié)果也有假陰性或假陽性的可能,畢竟當(dāng)樣本量足夠大時(shí),沒有檢測(cè)方法可以做到100%的準(zhǔn)確率。所以,對(duì)于核酸檢測(cè)之后呈陽性的樣本,還要進(jìn)行二次核酸檢測(cè),如有必要,還要通過影像學(xué)的方法共同進(jìn)行診斷;而如果呈陰性,也建議患者隔離14天,盡量避免出現(xiàn)假陰性的情況。
(編輯? ? 林? ? 妙)