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    犬泌尿道處方糧對(duì)犬膀胱炎的防治調(diào)理效果研究

    2020-11-12 07:10:04申茂玉曹利趙杰謝昕朱雷周凡馮士彬李玉吳金節(jié)阮崇美辜麗川王希春
    畜牧與獸醫(yī) 2020年11期

    申茂玉,曹利,趙杰,謝昕,朱雷,周凡,馮士彬,李玉,吳金節(jié),阮崇美,辜麗川,王希春*

    (1.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,安徽 合肥 230036;2.上海比瑞吉寵物用品股份有限公司,上海 201100;3.安徽科技學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,安徽 鳳陽(yáng) 233100;4.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)信息與計(jì)算機(jī)學(xué)院,安徽 合肥 230036)

    隨著生活水平的提高,飼養(yǎng)寵物犬的家庭越來(lái)越多,但由于大部分寵物主人的飼養(yǎng)管理經(jīng)驗(yàn)不足,對(duì)寵物疾病防治缺乏了解,導(dǎo)致在臨床上寵物犬泌尿道疾病的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。泌尿系統(tǒng)疾病是寵物犬的高發(fā)病之一,其中膀胱炎尤為常見(jiàn)[1]。膀胱炎是指膀胱黏膜及黏膜下層的炎癥,是常見(jiàn)的犬下尿路感染性疾病[2],臨床癥狀有尿頻、尿痛、尿液混濁帶血伴有氨臭味,尿沉渣檢測(cè)多見(jiàn)紅細(xì)胞、白細(xì)胞、膀胱上皮細(xì)胞,B超影像可顯示膀胱壁腫脹增厚或表面粗糙皺樣變化[2]。引發(fā)膀胱炎的病因有很多,如尿路的細(xì)菌感染;膀胱結(jié)石或尿潴留過(guò)度壓迫膀胱壁造成膀胱機(jī)械性刺激及損傷;腎炎、輸尿管炎等鄰近器官的炎癥蔓延;有毒物質(zhì)或強(qiáng)烈藥物刺激等[3]。犬膀胱炎的治療一般通過(guò)抗菌消炎藥、利尿、止血止痛或清熱利濕的中藥等對(duì)癥治療,當(dāng)寵物犬出現(xiàn)泌尿系統(tǒng)疾病時(shí),積極遵醫(yī)囑配合治療的,同時(shí)要改善飼養(yǎng)管理,保證安靜無(wú)刺激驚嚇的環(huán)境,給予充足的水分,飲食上選用高營(yíng)養(yǎng)無(wú)刺激易消化的犬糧,適當(dāng)限制高蛋白質(zhì)的食品。調(diào)整飲食結(jié)構(gòu)減少對(duì)泌尿道的刺激和負(fù)擔(dān),以防復(fù)發(fā)[4]。寵物犬出現(xiàn)泌尿系統(tǒng)疾病時(shí),處方糧作為具有一定食療效果的犬糧,其輔助治療、方便快捷的特點(diǎn)被越來(lái)越多的寵物主人認(rèn)可,泌尿道處方糧針對(duì)性的添加改善泌尿系統(tǒng)問(wèn)題的食療成份,作為寵物的“病號(hào)餐”能全面改善患犬飲食結(jié)構(gòu),輔助泌尿系統(tǒng)疾病的治療。

    為探究犬泌尿道處方糧對(duì)膀胱炎的防治調(diào)理效果,本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)膀胱灌注75%的醫(yī)用酒精來(lái)建立犬膀胱炎癥的模型[5-8],在建模的過(guò)程中飼喂泌尿道處方糧監(jiān)測(cè)其對(duì)發(fā)病期的干擾情況,并對(duì)膀胱炎模型犬飼喂處方糧探究其對(duì)膀胱炎的治療調(diào)理效果,為今后犬處方糧的臨床應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    選取24只無(wú)泌尿系統(tǒng)病史的健康比格犬作為試驗(yàn)犬,公母各半,體重(13±1.5)kg,年齡(2±0.2)歲,購(gòu)于南京亞?wèn)|實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究開(kāi)發(fā)中心公司。

    1.2 犬糧選擇

    普通犬糧、犬泌尿道處方糧,由上海比瑞吉寵物用品股份有限公司提供,處方糧的主要成分配比為粗蛋白質(zhì)≥19.0%、粗脂肪≥14.0%、粗纖維≤5.0%、粗灰分≤10.0%、鈣≥0.6%、總磷0.5%、賴氨酸≥0.63%、水溶性氯化物≥0.09%、水分≤10.0%,此外還添加了陳皮、茯苓、車前子、澤瀉及麥冬等中藥成分。

    1.3 動(dòng)物分組與管理

    在造模及預(yù)防調(diào)理試驗(yàn)中,將24只比格犬隨機(jī)分為對(duì)照組6只、預(yù)防組6只、造模組12只,試驗(yàn)前對(duì)所有試驗(yàn)犬只做臨床常規(guī)檢查后確定健康、精神狀態(tài)良好,并進(jìn)行體內(nèi)外驅(qū)蟲,疫苗免疫。每?jī)芍辉囼?yàn)犬在8 m2的半開(kāi)敞犬舍內(nèi)圈養(yǎng),以保證其正常的活動(dòng)量,整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程全部飼喂犬糧,無(wú)其他食物投喂,飲用清潔水。

    1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    對(duì)照組、造模組每只犬飼喂基礎(chǔ)犬糧35 g/(kg·d),預(yù)防組每只犬飼喂泌尿道處方犬糧35 g/(kg·d)。采用75%的醫(yī)用酒精對(duì)造模組和預(yù)防組膀胱灌注建立犬的膀胱炎癥,每周1次,連續(xù)灌注兩次,每次每只0.6 mL/kg。第14天造模犬出現(xiàn)血尿、食少納呆,尿液中白細(xì)胞呈陽(yáng)性,超聲檢查膀胱壁明顯增厚,即判定膀胱炎造模成功。保留對(duì)照組和造模組,將造模組平均分成自然組和治療組各6只,自然組犬飼喂普通犬糧35 g/(kg·d),治療組犬飼喂泌尿道處方犬糧35 g/(kg·d)。試驗(yàn)期間沒(méi)有介入任何藥物,沒(méi)有飼喂其他食物,早晚飼喂犬糧各1次,自由飲水。

    1.5 樣品的采集與處理

    分別在試驗(yàn)開(kāi)始的第0、7、14、21和28天,通過(guò)前肢靜脈采血,取新鮮EDTA抗凝血檢測(cè)血常規(guī),將抗凝血以3 000 r/min離心3 min,取上層血漿檢測(cè)C反應(yīng)蛋白;取非抗凝血在室溫中傾斜放置30 min,以3 000 r/min離心10 min,取上清液用于檢測(cè)腎功能指標(biāo)與炎癥因子水平;收集第0、7、14、21和28天的尿液,以1 000 r/min離心5 min,取尿沉渣鏡檢。

    1.6 指標(biāo)檢測(cè)

    1.6.1 臨床癥狀

    試驗(yàn)期間觀察犬的食欲、飲食量、飲水量、精神狀況、排尿量,觀察排尿姿勢(shì)、排尿次數(shù)、排尿量及尿液的感官狀態(tài),并做記錄。

    1.6.2 血液指標(biāo)

    采用獸用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定犬血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo),用熒光C反應(yīng)蛋白分析儀檢測(cè)犬血漿中的C反應(yīng)蛋白(CRP)的濃度,將分離好的血清用BS-220全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)犬腎功能生化指標(biāo)檢查,用MK3型酶標(biāo)儀檢測(cè)犬血清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素6(IL-6)的濃度。

    1.6.3 尿液檢查

    將當(dāng)天收集的尿液做尿液4項(xiàng)指標(biāo)(白細(xì)胞、pH、尿潛血和尿蛋白)檢測(cè);對(duì)尿沉渣做Diff-Quik染色觀察尿沉渣中細(xì)胞情況。

    1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

    應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件的獨(dú)立樣本將試驗(yàn)組不同試驗(yàn)時(shí)間點(diǎn)的測(cè)定數(shù)據(jù)與對(duì)照組進(jìn)行比較,試驗(yàn)結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 各組犬的臨床表現(xiàn)

    造模組和預(yù)防組犬只在75%的醫(yī)用酒精灌注后出現(xiàn)了精神不振,厭食,尿頻,尿液略微泛紅,舔舐生殖器,預(yù)防組在第5天癥狀減輕,正常飲水進(jìn)食。在第二次灌注后,造模組和預(yù)防組組犬體溫升高、尿頻,其中造模組公犬只出現(xiàn)生殖器滴血情況,尿淋漓,生殖器紅腫可見(jiàn)膿性分泌物,尿液渾濁呈暗紅色。

    在治療調(diào)理階段,治療組犬只在飼喂處方糧后食量增加,飲水次數(shù)增多,精神狀態(tài)明顯轉(zhuǎn)好,尿頻、尿淋漓狀況開(kāi)始緩解,排尿變得順暢,尿液變得清澈,自然恢復(fù)組犬精神倦怠、食欲差。尿液仍渾濁呈琥珀色,排尿時(shí)間長(zhǎng)。第28天,治療組犬只的臨床癥狀基本消失,對(duì)照組癥狀略有緩解,但精神食欲較差,尿液仍渾濁并伴有刺鼻氨臭味。

    2.2 血常規(guī)檢查

    在預(yù)防調(diào)理試驗(yàn)中,第0天各組間指標(biāo)并無(wú)明顯差異;在第7天,造模組犬血液中紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白含量顯著降低(P<0.05),造模組和預(yù)防組犬只血液中的白細(xì)胞數(shù)量顯著增高(P<0.05),中性粒細(xì)胞數(shù)量極顯著增高(P<0.01);第14天造模組的紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白含量均顯著低于對(duì)照組和預(yù)防組(P<0.05),白細(xì)胞數(shù)顯著高于對(duì)照組和預(yù)防組(P<0.05),中性粒細(xì)胞數(shù)極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),預(yù)防組中性粒細(xì)胞顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

    表1 預(yù)防調(diào)理階段不同處理組犬血常規(guī)指標(biāo)的比較

    治療調(diào)理試驗(yàn)階段,第14天自然組和治療組紅細(xì)胞和血紅蛋白含量均顯著低于對(duì)照組(P<0.05),白細(xì)胞數(shù)顯著高于對(duì)照組(P>0.05),中線粒細(xì)胞數(shù)極顯著高于對(duì)照組(P<0.01);第21天 治療組紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白含量與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05),自然組紅細(xì)胞數(shù)仍顯著低于對(duì)照組和治療組(P<0.05),血紅蛋白含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05),但與治療組無(wú)明顯差異(P>0.05),自然組和治療組的白細(xì)胞數(shù)和中性粒細(xì)胞數(shù)仍顯著高于對(duì)照組(P>0.05);第28天治療組和對(duì)照組各指標(biāo)均無(wú)顯著性差異(P>0.05),自然組血紅蛋白含量顯著低于對(duì)照組和治療組(P<0.05),紅細(xì)胞數(shù)顯著低于對(duì)照組(P<0.05),中性粒細(xì)胞數(shù)極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),白細(xì)胞數(shù)顯著高于對(duì)照組和治療組(P<0.05)。見(jiàn)表2。

    表2 治療調(diào)理階段不同處理組犬血常規(guī)指標(biāo)的比較

    2.3 各組犬血清腎功能指標(biāo)的變化

    預(yù)防調(diào)理階段,第0天各組指標(biāo)均無(wú)顯著差異,酒精灌注后7 d造模組尿素氮含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05),肌酐含量顯著高于對(duì)照組與治療組(P<0.05);第14天造模組尿素氮、肌酐含量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),預(yù)防組肌酐和尿素氮含量也略有升高但與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)。見(jiàn)表3。

    表3 預(yù)防調(diào)理階段不同處理組犬腎功能指標(biāo)的比較

    治療調(diào)理階段,第14天自然組和治療組尿素氮含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05),肌酐含量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01);第21~28天,自然組和治療組尿素氮、肌酐含量都有所降低,但自然組尿素氮含量顯著高于對(duì)照組和治療組(P<0.05),自然組和治療組肌酐含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表4。

    表4 治療調(diào)理階段不同處理組犬腎功能指標(biāo)的比較

    2.4 各組犬尿常規(guī)指標(biāo)的變化

    在預(yù)防調(diào)理試驗(yàn)中,第0天各組的白細(xì)胞、尿潛血、尿蛋白檢測(cè)均為陰性;第7天預(yù)防組和造模組犬只尿液中白細(xì)胞、尿潛血、尿蛋白檢測(cè)呈陽(yáng)性;第14天造模組尿液中白細(xì)胞出現(xiàn)大量白細(xì)胞(+++),各組間尿液pH值無(wú)明顯變化。在治療調(diào)理試驗(yàn)第21天,自然恢復(fù)組犬尿液常規(guī)檢測(cè)中白細(xì)胞、尿潛血、尿蛋白含量逐漸減少,治療組尿潛血、尿蛋白檢測(cè)轉(zhuǎn)為弱陽(yáng)性。治療組犬只尿液的pH值與對(duì)照組略有下降但差異不顯著(P>0.05)。見(jiàn)表5、6。

    表5 預(yù)防調(diào)理階段不同處理組犬尿常規(guī)的比較

    表6 治療調(diào)理階段不同處理組犬尿常規(guī)的比較

    2.5 炎性因子的變化

    在預(yù)防調(diào)理試驗(yàn)中,第0天各組犬指標(biāo)無(wú)顯著差異,造模組犬血清中的TNF-α的濃度在第7 ~14天顯著高于對(duì)照組(P<0.05),而預(yù)防組在TNF-α濃度在第7 ~14天略有升高與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05);犬血清中IL-6含量第7天造模組顯著高于對(duì)照組(P<0.05),治療組與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05),第14天造模組和預(yù)防組均極顯著高于對(duì)照組(P<0.01);犬血液中CRP含量造模組7~14天持續(xù)上升與對(duì)照組差異極顯著(P<0.01),預(yù)防組犬血液中CRP含量在第7天極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),第14天顯著高于對(duì)照組(P<0.05)并極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)。見(jiàn)表7。

    表7 預(yù)防調(diào)理階段不同處理組犬炎性因子的變化

    治療調(diào)理試驗(yàn)中,經(jīng)過(guò)1周處方糧飼喂在第21天治療組犬血清TNF-α、IL-6的濃度與自然組相比顯著下降(P<0.05),CRP濃度與自然組相比極顯著下降(P<0.01),自然組犬TNF-α的濃度仍顯著高于對(duì)照組(P<0.05),IL-6和CRP濃度極顯著高于對(duì)照組(P<0.01);第28天自然恢復(fù)組IL-6濃度仍顯著高于對(duì)照組和造模組,TNF-α和CRP濃度各組無(wú)顯著差異(P>0.05)。見(jiàn)表8。

    表8 治療調(diào)理階段不同處理組犬炎性因子的變化

    2.6 各組犬尿沉渣檢測(cè)

    在試驗(yàn)第0天,各組犬只尿沉渣并無(wú)太多細(xì)胞內(nèi)容物(圖1A);試驗(yàn)第7天,造模組和預(yù)防組犬的的尿沉渣中均出現(xiàn)少量細(xì)胞形態(tài)不明顯的內(nèi)容物(見(jiàn)圖1B、1C);試驗(yàn)第14天,造模組犬尿沉渣染色后在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)大量的細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)形態(tài)特征判斷,其中有細(xì)胞核小而圓、細(xì)胞大而多角的的扁平膀胱上皮細(xì)胞和大量白細(xì)胞(見(jiàn)圖1D),預(yù)防組少量的白細(xì)胞和紡錘型的尿路上皮細(xì)胞(見(jiàn)圖1E);試驗(yàn)第21天自然恢復(fù)組有外形不規(guī)則,結(jié)構(gòu)模糊,漿內(nèi)充滿粗大顆粒,細(xì)胞腫脹成團(tuán)、界限模糊的膿細(xì)胞(見(jiàn)圖1F),治療組犬經(jīng)過(guò)1周治療調(diào)理后,尿沉渣中的白細(xì)胞和膀胱上皮細(xì)胞減少(見(jiàn)圖1G);第28天自然恢復(fù)組仍存在少量的膀胱上皮細(xì)胞(見(jiàn)圖1H),治療組尿沉渣內(nèi)容物基本消失(見(jiàn)圖1I)。

    A.對(duì)照組0天;B.造模組第7天;C.預(yù)防組第7天犬;D.造模組第14天;E.預(yù)防組第14天;F.自然恢復(fù)組第21天;G.治療組第21天;H.自然恢復(fù)組第28天;I.治療組第28天圖1 各試驗(yàn)組犬尿沉渣檢查結(jié)果 (400×)

    3 討論

    利用復(fù)制的犬膀胱炎癥模型,通過(guò)對(duì)犬的臨床癥狀、血常規(guī)、腎功能、致炎因子、尿常規(guī)、尿沉渣等的檢測(cè),將犬泌尿道處方糧對(duì)犬膀胱炎的預(yù)防調(diào)理效果和治療調(diào)理效果進(jìn)行了一系列的試驗(yàn)研究。在預(yù)防調(diào)理試驗(yàn)中,用75%醫(yī)用酒精進(jìn)行膀胱灌注后,造模組和預(yù)防組犬只都出現(xiàn)了體溫升高、尿血、尿淋漓、厭食、精神不振等癥狀,而造模組比預(yù)防組臨床癥狀明顯且持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),預(yù)防組犬只第5天癥狀減輕,而預(yù)防組血清中的炎性因子以及尿液中白細(xì)胞的結(jié)果顯示炎癥并沒(méi)有消除。由此推斷在致病因素下,處方糧并不能阻止炎癥的發(fā)生發(fā)展,也不能像消炎藥物一樣短時(shí)間內(nèi)消除炎癥,但具有清熱舒緩、減輕犬的不適癥狀的作用。

    中醫(yī)認(rèn)為膀胱濕熱癥屬里熱癥,因濕熱下行引起,需清下焦?jié)駸?,處方糧中添加的茯苓、澤瀉是中醫(yī)臨床上常用的滲濕利水藥[9]。處方糧中添加了陳皮、茯苓、車前子、澤瀉及麥冬等中藥成分,其中,茯苓、澤瀉有利尿作用;車前子、麥冬、茯苓、澤瀉均有抗炎抗腫瘤功效;陳皮、澤瀉有瀉熱化濁等功效;茯苓、車前子、麥冬還可增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用[10-14],從利尿、抗炎抗菌、清熱去火、增強(qiáng)機(jī)體免疫力的角度解決膀胱的濕熱之癥。

    為進(jìn)一步探究炎癥的情況,再次對(duì)犬血清中TNF-α、IL-6、CRP濃度進(jìn)行檢測(cè)。CRP對(duì)全身性炎癥的反應(yīng)更迅速,相比于白細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)炎癥的提示更為靈敏,尤其是在炎癥的加劇階段[15-16];TNF-α作為炎癥反應(yīng)的主要誘導(dǎo)劑,在炎癥反應(yīng)過(guò)程中出現(xiàn)最早;IL-6作為反映機(jī)體炎癥和組織損傷嚴(yán)重程度的重要指標(biāo),也是炎癥反應(yīng)的誘發(fā)劑[17]。在前14 d預(yù)防組、造模組犬只經(jīng)過(guò)兩次醫(yī)用酒精膀胱灌注后,白細(xì)胞數(shù)只是正常范圍內(nèi)上升,而CRP濃度在第7天就已經(jīng)達(dá)到重度炎癥范圍,第14天CRP的濃度仍持續(xù)顯著上升,犬只血清中TNF-α、IL-6的濃度也迅速升高,犬血液中TNF-α、IL-6的濃度和CRP的濃度與炎癥反應(yīng)正相關(guān),同時(shí)結(jié)合犬只有體溫升高、頻尿、有紅色尿液等臨床癥狀表明造模組犬的膀胱炎已經(jīng)形成,預(yù)防組犬只血液中CRP、TNF-α濃度在第14天顯著低于造模組。

    在治療調(diào)理試驗(yàn)中,治療組犬只沒(méi)有使用抗炎藥物的情況下經(jīng)過(guò)1周的處方糧飼喂,血液中CRP濃度率先下降至輕度炎癥范圍;血清中TNF-α的濃度與自然恢復(fù)組相比顯著降低;尿液沉渣染色后觀察到的大量白細(xì)胞和膀胱上皮細(xì)胞等有機(jī)沉渣大幅度減少,第2周治療組癥狀基本消失,而自然組在第2周癥狀才有所減輕,表明泌尿道處方糧中的車前子、麥冬、茯苓、澤瀉等中藥成分對(duì)治療組膀胱炎癥有一定的利尿消炎調(diào)節(jié)作用。

    由此可見(jiàn),處方糧可以幫助治療組犬只減少致炎因子對(duì)機(jī)體過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的損害和消耗,因此,在臨床上如果在使用抗菌消炎藥物治療犬膀胱炎癥的同時(shí)飼喂犬泌尿道處方糧,會(huì)加速炎癥的消除,縮短致炎因子對(duì)泌尿系統(tǒng)黏膜的損害時(shí)間,更有利于日后的恢復(fù),在犬只出現(xiàn)輕度膀胱炎癥問(wèn)題或發(fā)病幼犬不建議使用消炎藥時(shí),可飼喂犬泌尿道處方糧進(jìn)行保守治療調(diào)理。

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