AECOPD 患者外周血嗜酸性粒細(xì)胞水平與IgE 及FeNO 的相關(guān)性分析

田文景

（河南省神火集團(tuán)職工總醫(yī)院呼吸內(nèi)科，河南 永城476600）

慢性阻塞性肺疾病 （chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一種全球范圍內(nèi)常見的多發(fā)病，全球40 歲以上人群發(fā)病率高達(dá)9%～10%，且病死率和致殘率較高[1]。 COPD 以持續(xù)性氣流受限為主要特征，表現(xiàn)為慢性氣道炎癥和肺氣腫。 目前研究表明，其病因多于吸煙、化學(xué)物質(zhì)、粉塵、空氣污染等外部因素和氣道高反應(yīng)性、遺傳等內(nèi)部因素有關(guān)，發(fā)病機(jī)制涉及CD8+T 淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等[2]。 近年來研究報(bào)道，慢性阻塞性肺疾病急性加重期（Acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD） 患者外周血中嗜酸性粒細(xì)胞（eosinophil，EOS）增多，而嗜酸粒細(xì)胞氣道炎癥預(yù)示著患者對吸入性或系統(tǒng)性糖皮質(zhì)激素反應(yīng)良好，與預(yù)后改善有關(guān)[3]。 呼出氣一氧化氮（fractional exhaled nitric oxide，F(xiàn)eNO）由 EOS、中性粒細(xì)胞等產(chǎn)生，是氣道炎癥情況的靈敏檢測指標(biāo)[4]。 免疫球蛋白 E（immuneglobulin E，IgE）是介導(dǎo)超敏反應(yīng)的介質(zhì)，研究表明，氣道高反應(yīng)性、超敏反應(yīng)可能是AECOPD 患者糖皮質(zhì)激素有效治療的重要基礎(chǔ)[5]。目前尚未見有關(guān)AECOPD 患者外周血EOS 與FeNO、IgE 的關(guān)系研究，本研究分析AECO PD 患者外周血 EOS%與 FeNO、IgE 的相關(guān)性，探討其意義，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇 2017 年 1 月-2018 年 3 月本院收治的83 例AECOPD 患者作為病例組， 男56例，女 27 例，年齡 42～76 歲，平均年齡 60.53±11.81歲，其中全身炎癥表型45 例，頻發(fā)急性加重表型38 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴均符合慢性阻塞性肺疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；⑵呼吸道癥狀急性加重；⑶患者及家屬知情并自愿參與;⑷經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。 排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴因AECOPD 再次住院者；⑵支氣管哮喘、肺結(jié)核、肺炎、肺癌等其他肺部疾?。虎呛喜⑿呐K、腎臟、肝臟等其他臟器慢性疾??；⑷合并自身免疫系統(tǒng)及血液系統(tǒng)疾病; ⑸近期內(nèi)使用過糖皮質(zhì)激素。另選擇 50 例健康者為對照組，男 32 例，女 18 例，年齡 40～80 歲，平均年齡 61.15±12.76 歲。 兩組性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

1.2 方法

1.2.1 外周血EOS 和IgE 檢測 采集患者外周血5 ml，分成兩份：一份采用流式細(xì)胞術(shù)檢測EOS，方法:加入 4～10mol/L 茶堿、4～10mol/L 地塞米松中，37℃下預(yù)處理 24h， 然后加入 20μl CD16 PEmAb 和20μl CD62L mAb-FITC 中進(jìn)行雙標(biāo)記染色，準(zhǔn)確找到EOS， 采用FAC SCalibur 流式細(xì)胞儀 （美國BD公司）分析EOS 陽性比例。 根據(jù)EOS 檢測結(jié)果，將患者分為兩組：EOS%≤2%組40 例，EOS%＞2%組43 例，兩組性別、年齡、體重、吸煙史等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），最大呼氣第一秒呼出的氣量容積占預(yù)估值的百分?jǐn)?shù)（FEV1%）、FEV1與用力肺活量FVC 比值（FEV1/FVC）等一般資料比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。另一份離心后收集血清， 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測IgE 水平，人IgE ELISA 試劑盒購于上海樊克生物科技有限公司。

1.2.2 FeNO 檢測 采用Niox Mino FeNO 檢測儀檢測患者FeNO，方法參照美國胸科學(xué)會/歐洲呼吸學(xué)會推薦的FeNO 標(biāo)準(zhǔn)化測定指南。 患者在檢測前1h 禁食、禁水、禁劇烈運(yùn)動，測定時(shí)控制流速50 ml/s，呼出時(shí)間 10 s，反應(yīng) 90 s～100 s 后讀數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS22.0 用于統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)，外周血IgE 和FeNO 水平等計(jì)量資料用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示， 兩組比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，死亡率、再住院率等計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)表示，組間行 χ2檢驗(yàn)，Pearson 相關(guān)系數(shù)（r）法分析 AECOPD 患者外周血 EOS%與 IgE 和 FeNO 的相關(guān)性，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

表1 EOS%不同分組臨床資料

2.1 病例組和對照組外周血EOS、IgE 和FeNO 水平 病例組外周血EOS 比例高于對照組，IgE 和FeNO 水平高于對照組， 病例組和對照組外周血EOS、IgE 和 FeNO 水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見表2。

2.2 EOS%不同分組IgE 和FeNO 水平 EOS%＞2%組患者外周血IgE 水平高于EOS%≤2%組患者，兩組外周血IgE 水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05）； EOS%＞2%組患者外周血 FeNO 水平高于EOS%≤2%組患者，但兩組外周血FeNO 水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見表3。

表2 病例組和對照組外周血EOS、IgE 和FeNO 水平比較

2.3 病例組 EOS 與 IgE、FeNO 的關(guān)系 病例組外周血EOS%與IgE 水平呈顯著正相關(guān)關(guān)系(r=0.655，P=0.000)， 與 FeNO 呈顯著正相關(guān)關(guān)系 (r=0.501，P=0.006)。 見圖1。

表3 EOS%不同分組IgE 和FeNO 水平比較

圖1 病例組EOS%與IgE、FeNO 的相關(guān)性

2.4 病例組EOS%與患者預(yù)后的關(guān)系 83 例AECOPD 患者經(jīng)治療，死亡8 例，死亡率9.64%，治療后隨訪1 年，再次住院45 例，再次住院率54.22%。其中EOS%≤2%組，死亡7 例，死亡率17.50%，再次住院27 例， 再次住院率67.50%；EOS%＞2%組，死亡1 例，死亡率2.33%，再次住院18 例，再次住院率41.86%。 EOS%≤2%組死亡率和再次住院率均高于EOS%＞2%組，兩組死亡率和再次住院率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

全球COPD 流行病學(xué)調(diào)查顯示，2010 年全球COPD 患病率為11.7%，其中城市居民患病率13.6%高于農(nóng)村居民9.7%， 成年男性總患病率14.3 %高于女性7.6%，預(yù)計(jì)至2020 年COPD 將上升成為全球疾病死因的第三位[7]。 COPD 急性加重對患者肺功能、疾病進(jìn)展產(chǎn)生嚴(yán)重不良影響，是COPD 患者死亡的重要原因。 以往研究表明，AECOPD 與中性粒細(xì)胞性炎癥有關(guān)，近年來研究發(fā)現(xiàn)，10%～45%的AECOPD 患者存在嗜酸粒細(xì)胞性炎癥， 且誘導(dǎo)痰EOS 增多與患者吸入糖皮質(zhì)激素治療效果有關(guān)[8，9]。 但臨床上誘導(dǎo)痰 EOS 檢測不適合誘導(dǎo)咳痰困難、呼吸困難患者，存在一定局限性。 外周血EOS便于檢測， 研究報(bào)道，AECOPD 患者外周血EOS%≥2%預(yù)測誘導(dǎo)痰EOC≥3%的ROC 曲線下面積為0.85，敏感性為90%，特異性為60%，證實(shí)外周血EOS 能夠高效識別 AECOPD 患者嗜酸性炎癥[10，11]。

氣道慢性炎癥反應(yīng)是COPD 進(jìn)展的重要原因之一， 炎癥反應(yīng)過程中T 淋巴細(xì)胞分泌白細(xì)胞介素，可調(diào)節(jié)氣道IgE 和EOS，產(chǎn)生氣道高反應(yīng)，同時(shí)B 淋巴細(xì)胞產(chǎn)生 IgE 可使 EOS 活化[12，13]。 IgE 是淋巴細(xì)胞等與變應(yīng)原接觸后，引發(fā)漿細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的免疫球蛋白，IgE 升高提示過敏性反應(yīng)。COPD 急性發(fā)作時(shí)，多種細(xì)胞在肺部感染因子的刺激下過表達(dá)誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶， 導(dǎo)致一氧化氮合成增多，造成氣道炎癥及組織損傷，研究表明，F(xiàn)eNO 是評估氣道嗜酸性炎癥的臨床指標(biāo)[14]。 本研究結(jié)果，AECOPD 患者外周血 EOS%、IgE 和 FeNO 均顯著高于對照組，證實(shí) AECOPD 患者 EOS、IgE 和 FeNO增多，與以往研究結(jié)果一致。 本研究根據(jù)外周血E OS%將AECOPD 患者分為兩組，EOS%＞2%組患者外周血IgE 顯著高于EOS%≤2%組患者，F(xiàn)eNO 高于EOS%≤2%組但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 病毒等病原體刺激機(jī)體，引起漿細(xì)胞分泌IgE 可作用于肥大細(xì)胞，使其脫顆粒產(chǎn)生白三烯、組胺等炎性介質(zhì)，并使EOS 增多，機(jī)體處于致敏狀態(tài)。當(dāng)機(jī)體再次受到變應(yīng)原刺激后，EOS 活化產(chǎn)生氣道高反應(yīng)、呼吸困難、 咳嗽加劇等。 本研究相關(guān)性分析顯示，AECOPD 患者外周血EOS%與IgE、FeNO 分別呈顯著正相關(guān)關(guān)系。

臨床研究表明，EOS 減少標(biāo)志著COPD 患者細(xì)菌感染強(qiáng)度增加，與COPD 急性期患者預(yù)后不良有關(guān)[15]。 何浪濤等研究報(bào)道，EOS 減少與AECOPD患者病死率、 再入院率及機(jī)械通氣率增加有關(guān)[16]。提示EOS 可用于預(yù)測AECOPD 患者預(yù)后。 本研究結(jié)果，AECOPD 患者外周血EOS%≤2%組，治療期間死亡發(fā)生率17.50%，治療后再次住院率67.50%，而EOS%＞2%患者，治療期間死亡發(fā)生率2.33%，再次住院率41.86%，EOS%≤2%患者死亡率和再次住院率均顯著高于EOS%＞2%患者， 與何浪濤、張瑩瑩等研究結(jié)果一致[17]。越來越多的研究證實(shí)，EOS水平與COPD 患者病情嚴(yán)重程度有關(guān)。 George 等研究表明，EOS 計(jì)數(shù)在穩(wěn)定期和急性期COPD 患者之間存在明顯差異， 痰EOS 增多患者表現(xiàn)出對皮質(zhì)類固醇治療的良好反應(yīng)[18]。 吳艷等研究報(bào)道，血EOS 增多的AECOPD 患者對糖皮質(zhì)激素治療反應(yīng)較快， 血EOS 檢查有助于對患者病情進(jìn)行分層，以優(yōu)化治療方案，提高治療效率[19]。

綜上所述，AECOPD 患者外周血EOS 比例升高，IgE 和 FeNO 水平升高， 且 EOS 比例與 IgE 和FeNO 水平呈顯著正相關(guān)關(guān)系，提示AECOPD 患者嗜酸粒細(xì)胞性炎癥水平可能與氣道炎癥反應(yīng)、過敏反應(yīng)有關(guān)。 高EOS 比例患者對糖皮質(zhì)激素等治療反應(yīng)增強(qiáng)，可有效降低氣道炎癥和過敏反應(yīng)，改善預(yù)后，降低AECOPD 患者死亡率和再入院率。本研究不足之處在于納入樣本量較少，未進(jìn)行綜合因素分析，下一步將繼續(xù)擴(kuò)大樣本量，探討外周血EO S 水平在COPD 進(jìn)展中的意義，及對AECOPD 患者臨床治療的指導(dǎo)意義。