食管癌患者術(shù)中輸入濃縮紅細(xì)胞對免疫球蛋白和T 細(xì)胞亞群的影響

岳彩娟，王婧婧，孫真真，徐瑩瑩

（河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院1.輸血科；2.檢驗科，河南 洛陽 471000）

臨床消化道腫瘤中食管癌是常見的腫瘤之一，由于采取手術(shù)治療后造成的創(chuàng)口較大，術(shù)中伴大量出血，需在手術(shù)中輸血[1，2]。目前相關(guān)研究提示，前列腺癌、結(jié)直腸癌、膽管癌等患者圍術(shù)期異體輸血與術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)、 轉(zhuǎn)移甚至高死亡率具有相關(guān)性，其原因主要是輸血使受血者發(fā)生免疫抑制[3-5]。通常免疫抑制反應(yīng)是由于受體接受血液中免疫活性細(xì)胞及受體免疫系統(tǒng)有機反應(yīng)，進(jìn)一步誘發(fā)免疫應(yīng)答。 因此，本文旨在探討食管癌患者術(shù)中輸入濃縮紅細(xì)胞對免疫球蛋白與T 細(xì)胞亞群的影響，進(jìn)一步為臨床安全用血提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取 2012 年 5 月至 2013 年 5 月我院收治的食管癌病人128 例，其中圍術(shù)期輸注濃縮紅細(xì)胞患者68 例（輸血組），圍術(shù)期未輸注濃縮紅細(xì)胞患者60 例（未輸血組），均經(jīng)臨床鋇餐造影、胃鏡、病理切片證實為食管癌。 納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴所有入選患者治療期間無輸注除濃縮紅細(xì)胞外的其他血液制品；⑵輸血期間無免疫調(diào)節(jié)劑藥物使用史；⑶所有入選患兒皆為自愿參與本研究，且簽署知情同意書。 排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴非腫瘤患者；⑵免疫功能缺陷患者； ⑶肝腎功能嚴(yán)重障礙。 本研究經(jīng)納入排除、 隨訪總樣本數(shù)據(jù)過程中符合要求的總共128例，無一例患者失訪。兩組患者性別、年齡、TNM 分期，術(shù)前平均血紅蛋白水平（Hemoglobin，Hb）、平均白蛋白（Albumin，Alb）及術(shù)中失血量比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法 輸注濃縮紅細(xì)胞前所有受試者術(shù)后1、3、7、14d 采集外周靜脈血，T 細(xì)胞亞群 （CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）采用流式細(xì)胞儀檢測，分別于術(shù)后7d 抽取2mL 血清采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）及免疫球蛋白M（IgM）。

隨訪5 年，以患者手術(shù)當(dāng)天時間為隨訪起點，復(fù)發(fā)包括局部復(fù)發(fā)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移， 通過 B 超、CT、內(nèi)鏡及手術(shù)診療發(fā)現(xiàn)而確診，將發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)的時間或超過 5 年未復(fù)發(fā)定為隨訪終點，以 1 年、3 年、5 年為復(fù)發(fā)統(tǒng)計時段。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 本觀察數(shù)據(jù)資料均采用SPSSP22.0 統(tǒng)計展開分析，采用百分比為計數(shù)資料，并進(jìn)行卡方檢驗。 計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，進(jìn)行t 檢驗。 P＜0.05 為差異有統(tǒng)計意義。

2 結(jié)果

表1 兩組一般資料

2.1 兩組不同時間病人外周血中T 淋巴細(xì)胞亞群變化 輸血前兩組T 淋巴細(xì)胞亞群無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），輸血組術(shù)后 1d、3d、7d、14d CD3+、CD4+、CD4+/CD8+明顯低于未輸血組，且輸血組CD8+明顯高于未輸血組， 組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。 見表2。

表2 兩組不同時間病人外周血中T 淋巴細(xì)胞亞群變化(±s)

表2 兩組不同時間病人外周血中T 淋巴細(xì)胞亞群變化(±s)

T 細(xì)胞亞群（%） 時間 輸血組（n=60）未輸血組（n=68）t P CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+輸血前術(shù)后1d術(shù)后3d術(shù)后7d術(shù)后14d輸血前術(shù)后1d術(shù)后3d術(shù)后7d術(shù)后14d輸血前術(shù)后1d術(shù)后3d術(shù)后7d術(shù)后14d輸血前術(shù)后1d術(shù)后3d術(shù)后7d術(shù)后14d 61.23±5.97 44.97±5.63 48.61±10.52 53.98±8.62 54.69±5.11 31.87±3.21 16.85±3.28 20.87±7.63 24.08±4.75 27.69±2.67 26.91±3.35 30.64±3.05 30.64±5.38 31.15±4.64 29.64±3.13 1.08±0.18 0.49±0.19 0.82±0.12 0.68±0.18 0.89±0.18 62.67±4.81 52.61±6.18 56.72±11.68 61.14±9.17 57.90±6.01 32.69±3.18 22.36±4.15 29.14±8.01 30.25±3.98 34.10±3.01 27.63±2.85 27.71±2.91 24.69±5.97 28.69±3.93 24.98±2.64 1.12±0.14 0.78±0.21 1.01±0.11 1.21±0.20 1.27±0.21 1.489 7.318 4.133 4.551 3.265 1.272 8.378 5.978 7.906 12.768 1.300 62.278 5.931 3.213 9.038 1.389 8.202 9.293 15.780 11.023 0.139＜0.001＜0.001＜0.001 0.001 0.206＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001 0.196＜0.001＜0.001 0.002＜0.001 0.167＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

2.2 兩組患者術(shù)后7d 免疫球蛋白的影響 輸血組術(shù)后7dIgG、IgA、IgM 免疫球蛋白明顯低于未輸血組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。 見表3。

2.3 兩組患者預(yù)后情況比較 輸血組1 年、3 年、5年生存率明顯低于未輸血組， 且兩組1 年、3 年、5年生存率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。 見表4，生存曲線見圖1。

表3 兩組患者術(shù)后7d 免疫球蛋白的影響(±s)

表3 兩組患者術(shù)后7d 免疫球蛋白的影響(±s)

組別 n輸血組未輸血組68 60 t P IgG IgA 5.75±1.21 8.63±1.05 14.289＜0.001 0.27±0.18 0.91±0.15 21.685＜0.001 IgM 0.39±0.15 0.51±0.12 4.953＜0.001

表4 兩組患者預(yù)后情況對比[n（%）]

圖1 兩組患者生存分析

3 討論

臨床中采取輸血被認(rèn)為是補充血容量、搶救生命，確保手術(shù)成功后的關(guān)鍵治療方式[6]。 近年來研究發(fā)現(xiàn)，圍術(shù)期輸血是影響惡性腫瘤患者預(yù)后的獨立危險因素[7-9]。 早在既往研究腎移植患者采取異體輸血成功率升高后，就指出了異體輸血可參與受體免疫抑制過程的觀點。 異體輸血過程中與免疫抑制機理較為復(fù)雜，但其本質(zhì)是異體血液本身含有免疫活性細(xì)胞會與受體的免疫系統(tǒng)反應(yīng)，進(jìn)一步出現(xiàn)免疫應(yīng)答[10，11]。 SOCS-1、SOCS-3 是免疫應(yīng)答中重要分子，SOCS-1、SOCS-3 參與 T 細(xì)胞分化，發(fā)揮調(diào)節(jié)功能，進(jìn)一步誘發(fā)不同的免疫反應(yīng)[12]。 T 細(xì)胞按照標(biāo)志性主要由CD4+與CD8+細(xì)胞亞群組成，CD4+T 細(xì)胞主要由Th1 與Th2 細(xì)胞組成。在健康生理基礎(chǔ)中，Th1/Th2 細(xì)胞處于平衡狀態(tài)中，一旦失去平衡使正常的免疫應(yīng)答被破壞，發(fā)生疾病[13-15]。 臨床中常采取T 淋巴細(xì)胞亞群診斷患者的免疫功能狀態(tài)， 本研究中分別監(jiān)測輸入濃縮紅細(xì)胞前、 術(shù)后1d、3d、7d、14d 的 T 淋巴細(xì)胞亞群，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，輸血前兩組T 淋巴細(xì)胞亞群無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義 （P＞0.05）， 輸血組術(shù)后 1d、3d、7d、14d CD3+、CD4+、CD4+/CD8+明顯低于未輸血組，且輸血組CD8+明顯高于未輸血組，組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）； 提示輸入濃縮紅細(xì)胞患者T 淋巴細(xì)胞亞群顯著降低，輸血誘發(fā)的相關(guān)免疫抑制明顯；輸血組術(shù)后 1d、3d、7d、14d CD3+、CD4+、CD4+/CD8+明顯下降，CD4+/CD8+下降表明免疫功能紊亂，同種異體血液是外源性蛋白抗原，具備抑制CD4+細(xì)胞作用，造成T 淋巴細(xì)胞分化功能衰退， 同時影響部分淋巴因子參與B 淋巴細(xì)胞形成抗體的功能下降。 相關(guān)研究提示， 血液制品儲存階段產(chǎn)生白細(xì)胞凋亡導(dǎo)致免疫抑制的作用機理需進(jìn)一步研究， 但輸注階段采用去白細(xì)胞血液可有效改善受試者的免疫抑制狀態(tài)[16，17]。相關(guān)研究提示，惡性腫瘤患者輸血后血清IgA、IgG、IgM 含量產(chǎn)生變化是因體液免疫是誘發(fā)機體感染的原因之一，體液免疫功能減弱應(yīng)首先考慮患者血清 IgG、IgA、IgM 水平降低[18，19]。 本研究發(fā)現(xiàn)輸血組術(shù)后7dIgG、IgA、IgM 免疫球蛋白明顯低于未輸血組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。 本研究中針對術(shù)后患者采取的5 年的隨訪， 發(fā)現(xiàn)輸血組1、3、5 年生存率顯著低于未輸血組。 臨床中針對術(shù)中輸血影響癌癥術(shù)后生存率降低的結(jié)論在大量文獻(xiàn)中均有報道， 可能因異體血液中淋巴細(xì)胞與患者本身免疫系統(tǒng)產(chǎn)生反應(yīng)， 進(jìn)一步誘發(fā)患者免疫功能受限，影響疾病預(yù)后[20]。

綜上所述，食管癌手術(shù)過程中，需減少輸注濃縮紅細(xì)胞，由于其可造成患者術(shù)后免疫功能降低，使患者術(shù)后康復(fù)受到影響。