基因二代測(cè)序檢測(cè)登革熱1例

劉龍群 吳可人 楊艷 唐敏 張維維 趙秋良

病例資料

患者，青年男性，23歲，外地學(xué)生，因右下腹痛伴發(fā)熱2天于2019年8月19日入住普外科?；颊?天前無明顯誘因下出現(xiàn)右下腹疼痛，伴有惡心、嘔吐，全身酸痛，畏寒、發(fā)熱，自測(cè)體溫38.5℃，無腹瀉，無咳嗽、咳痰。至我院急診就診，血常規(guī):WBC 5.69×109/L，N 82%，CRP 11.31 mg/L。急診予“頭孢曲松”抗感染及補(bǔ)液治療后無改善。普外科擬“闌尾炎”收住入院。查體：T 38.2℃，血壓129/76mmHg，神志清，無皮疹，全身淺表淋巴結(jié)未及明顯腫大。心肺陰性。腹部無壓痛。完善檢查腹部B超右下腹闌尾區(qū)未見包塊。胸部CT未見異常。血常規(guī)：WBC 2.84×109/L，N 73.1%，PLT 113×109/L。PCT 0.127 ng/ml。出凝血時(shí)間:APTT 34.7S，余無異常。肝功能示:CRP 23.5mg/L，尿酸466 umol/l。甲流、乙流核酸陰性。予頭孢哌酮舒巴坦、奧司他韋治療，治療3天后仍有發(fā)熱，最高體溫39.8℃。8月21日擬發(fā)熱待查轉(zhuǎn)呼吸內(nèi)科。入呼吸科后患者持續(xù)高熱，最高體溫40.2℃，出現(xiàn)皮疹，雙上肢明顯，皮疹逐漸遍及全身，部分有融合伴有瘙癢，頸部皮膚充血，雙手及顏面部稍水腫(見圖1～3)。皮膚科考慮過敏可能？病毒疹不能排除。經(jīng)家屬同意后抽血外送二代基因測(cè)序。治療：奧司他韋、莫西沙星抗感染，抗過敏治療。完善心臟彩超:心臟各房室大小正常，左室收縮功能正常，瓣膜未見贅生物。PCT0.347ng/ml。血常規(guī)：WBC 1.51×109/L，N 63.5%，PLT 102×109/L。外周血細(xì)胞圖片:部分粒細(xì)胞漿內(nèi)顆粒增多。風(fēng)疹病毒IgG陽性。單純皰疹病毒IgG陽性。EB病毒DNA:1.39×103copies/m。巨細(xì)胞病毒DNA<500 copies/m?？购丝贵w譜、類風(fēng)濕因子、甲狀腺功能、T-spot、流感抗原、柯薩奇病毒核酸、腸道病毒核酸、出血熱抗體、弓形蟲抗體、血培養(yǎng)、肥達(dá)氏反應(yīng)、尿常規(guī)、糞常規(guī)正常。治療后仍有發(fā)熱，發(fā)熱前有畏寒。復(fù)查血常規(guī):WBC 2.54×109/L，N 28.3%，PLT 55×109/L。出凝血時(shí)間:D-2聚體0.64mg/L feu，Aptt：46.7s，TT 23.1S。8月24日二代基因測(cè)序檢查結(jié)果回報(bào)：登革熱病毒1型。疾控登革熱IgM、IgG抗體陽性。立即采取隔離、病房滅蚊，匯報(bào)疾控，對(duì)家屬進(jìn)行血樣檢測(cè)。治療上暫?？垢腥?，予補(bǔ)液對(duì)癥支持治療。根據(jù)傳染病防治要求轉(zhuǎn)傳染病醫(yī)院繼續(xù)診治，治療后體溫正常，9月6日復(fù)查登革熱血清IGM抗體陰性后出院。1月后隨訪，無明顯不適。

圖1～3 患者胸腹部及背部、下肢針尖樣皮疹，局部有融合。

討 論

登革熱由登革熱病毒引起的急性傳染病，主要流行于熱帶及亞熱帶地區(qū)。傳染源主要是登革熱患者、陰性感染者、帶病毒的非靈長(zhǎng)類動(dòng)物，人群普遍易感，感染后有部分人發(fā)病[1]。傳播途徑主要是蚊蟲叮咬傳播，譚麗梅發(fā)現(xiàn)母嬰垂直傳播[2]。近幾年在我國廣東、云南、廣西、福建等地報(bào)道較多，但內(nèi)陸地區(qū)亦有零星報(bào)道[3]。登革熱的潛伏期一般1～14天，大都數(shù)5～9天，臨床表現(xiàn)以發(fā)熱、頭痛、肌肉酸痛，多數(shù)3天后出現(xiàn)皮疹伴有瘙癢(頸、胸腹、四肢為甚)為主[4-7]，多數(shù)患者為普通登革熱，少數(shù)患者可發(fā)展為重癥登革熱。重癥登革熱的臨床特征除了發(fā)熱、頭痛、肌痛等癥狀外，常合并嚴(yán)重出血、嚴(yán)重血漿滲漏所致休克或呼吸困難、嚴(yán)重器官損傷[8]。目前登革熱病原體及血清學(xué)檢測(cè)主要應(yīng)用Ig M捕捉酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Mac-ELISA)檢測(cè)登革病毒Ig M抗體、應(yīng)用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)登革病毒Ig M 抗體、酶聯(lián)免疫法檢測(cè)登革病毒NS1抗原、用免疫熒光法(FA/IFA)檢測(cè)登革病毒Ig G抗體、Taq Man探針實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)登革病毒RNA、RT-PCR技術(shù)檢測(cè)登革病毒RNA及型別鑒定[1]。

二代基因測(cè)序是近年來應(yīng)用于微生物的一種新型檢測(cè)技術(shù)，通過基因序列對(duì)比準(zhǔn)確的鑒定微生物的種屬，臨床應(yīng)用于重癥感染、不明原因感染等疾病的診治[9-10]。本例患者否認(rèn)疫區(qū)、疫水接觸，且后期當(dāng)?shù)丶部貙?duì)親屬、周圍同學(xué)血液檢測(cè)未見異常，早期癥狀不典型，臨床癥狀與流感類似，增加了登革熱診斷難度，運(yùn)用二代基因測(cè)序技術(shù)及時(shí)發(fā)現(xiàn)，避免其他人員感染。因此對(duì)于不明原因感染患者，及早送檢二代基因測(cè)序，有助于提高臨床診斷準(zhǔn)確性。