淋巴細胞亞群絕對計數(shù)與難治性肺炎支原體肺炎患兒的早期預(yù)測關(guān)系分析

楊志允 李學明 廖志輝

肺炎支原體(MP)屬于臨床上較為常見的引起兒童呼吸系統(tǒng)感染的病原菌之一，由MP感染引起的肺炎支原體肺炎往往病情較輕，但其所致的難治性肺炎支原體肺炎(RMMP)往往病情危重，預(yù)后不良，可能對肺外臟器造成損害，甚至引發(fā)多臟器、多器官受累及，嚴重威脅患兒的生命健康安全[1-2]。近年來，因受多種因素的共同影響，RMMP的發(fā)病率正呈逐年升高趨勢，其所致的兒童病死率亦明顯上升。相關(guān)研究報道[3-4]，RMMP的熱程較長，臨床癥狀較重，病情進展迅速，往往在短時間內(nèi)會導致肺部出現(xiàn)大面積受累，增加了胸腔積液以及肺不張等并發(fā)癥的發(fā)生風險，從而引起病程的遷移，部分患者可伴有全身炎癥反應(yīng)綜合征或嚴重肺外并發(fā)癥，甚至發(fā)展為重癥肺炎。由此可見，早期有效診斷RMMP顯得尤為重要，可能是阻斷病情進展、改善預(yù)后的關(guān)鍵。另有研究學者表明[5-6]，RMMP患者預(yù)后和肺外并發(fā)癥均和宿主免疫反應(yīng)特點，程度及免疫功能強弱直接或間接相關(guān)。鑒于此，本文通過研究淋巴細胞亞群絕對計數(shù)與RMMP患兒的早期預(yù)測關(guān)系并予以分析。旨在為臨床RMMP患兒的早期預(yù)測尋找一種有效的指標，繼而為臨床治療提供參考依據(jù)，以期達到改善患兒預(yù)后的目的，現(xiàn)作以下報道。

資料與方法

一、一般資料

納入我院從2018年5月～2019年5月收治的肺炎支原體肺炎(MPP)患兒100例進行研究。納入標準：(1)所有患兒均符合《諸福棠實用兒科學(第8版)》[7]以及兒童社區(qū)獲得性肺炎管理指南[8]中所制定的MPP診斷標準；(2)年齡處于1～10歲范圍內(nèi)；(3)入院前并未實施任何救治；(4)無臨床病歷資料缺失。排除標準：(1)合并其他嚴重感染性疾病、自身免疫性疾病、惡性腫瘤者；(2)心、肝、腎等重要臟器發(fā)生嚴重損害者；(3)正參與其他研究者；(4)研究過程中因各種原因退出者。其中男性患兒59例，女性患兒41例，年齡1～9歲，平均年齡(5.23±1.56)歲；病程1～13d，平均病程(6.52±1.45)d；肺實變23例，胸腔積液24例。所有受試者及其監(jiān)護人均在知情同意書上簽字，并獲批于醫(yī)院倫理委員會。

二、研究方法

(1)采用我院自制的患兒基線資料調(diào)查表對所有患兒的基線資料進行統(tǒng)計、記錄，主要內(nèi)容涵蓋年齡、病程、住院天數(shù)、肺實變以及胸腔積液等。(2)分組方式：將其按照類型的不同分為RMMP組26例與普通MPP組76例。RMPP定義如下：明確診斷為MPP，且實施大環(huán)內(nèi)酯類藥物連續(xù)治療>7d仍無改善，甚至病情進展的一類MPP。(3)外周血淋巴細胞絕對計數(shù)的檢測：標準內(nèi)參選取為已知總數(shù)的熒光微球Beads。將其滴加入血，并滴加熒光抗體，借助流式細胞儀完成CD3+，CD4+，CD8+，CD19+及CD56+細胞的絕對計數(shù)。(4)外周血C反應(yīng)蛋白(CRP)、降鈣素原(PCT)、乳酸脫氫酶(LDH)水平的檢測：分別采集所有受試者的空腹靜脈血5mL，通過離心機獲取血清。采用酶聯(lián)免疫吸附法完成檢測，操作遵循試劑盒說明書完成，試劑盒均由上海酶聯(lián)生物科技有限公司提供。

三、評價指標

比較兩組年齡、病程、住院天數(shù)、肺實變以及胸腔積液，外周血淋巴細胞絕對計數(shù)，外周血CRP、PCT、LDH水平。

結(jié) 果

一、兩組基線資料對比

RMMP組年齡以及肺實變、胸腔積液發(fā)生率均顯著高于普通MPP組，且住院時間長于普通MPP組(均P<0.05)(見表1)。

表1 兩組基線資料對比(例，

二、兩組外周血淋巴細胞絕對計數(shù)對比

RMMP組外周血CD3+、CD56+絕對計數(shù)均顯著高于普通MPP組，而CD4+、CD19+絕對計數(shù)均顯著低于普通MPP組(均P<0.05)(見表2)。

表2 兩組外周血淋巴細胞絕對計數(shù)對比(個

三、外周血淋巴細胞絕對計數(shù)預(yù)測RMMP的ROC曲線分析

經(jīng)ROC曲線分析可得：CD3+、CD4+、CD19+、CD56+絕對計數(shù)預(yù)測RMMP的敏感性分別為87%、90%、83%、74%，特異性分別為76%、71%、80%、64%，而上述指標聯(lián)合診斷RMMP的敏感性、特異性分別97%、91%(見表3)。

表3 外周血淋巴細胞絕對計數(shù)預(yù)測RMMP的ROC曲線分析

四、兩組外周血CRP、PCT、LDH水平對比

RMMP組外周血CRP、LDH水平均顯著高于普通MPP組(均P<0.05)(見表4)。

表4 兩組外周血CRP、PCT、LDH水平對比

討 論

近年來，RMPP已然得到國內(nèi)外廣大醫(yī)務(wù)人員共同關(guān)注的熱點之一，但關(guān)于其具體發(fā)病機制仍未完全明確[9-10]。RMPP早期臨床癥狀表現(xiàn)往往不典型，X線胸片亦可無特征性改變，部分患兒早期亦可無呼吸道癥狀，大部分患者主要是以其他多系統(tǒng)損傷表現(xiàn)為首發(fā)癥狀，因此早期誤診率較高，繼而導致患者治療時機的延誤，進一步促進了病情的進展，甚至對患者的生命造成威脅[11-13]。有學者指出，宿主免疫包括下述免疫應(yīng)答：①巨噬細胞；②肥大細胞；③自然殺傷細胞；④中性粒細胞；⑤淋巴細胞；⑥體液免疫應(yīng)答。且隨著細胞因子的刺激逐漸強烈，宿主的肺損害越嚴重[14-15]。相關(guān)研究報道證實，宿主的潛在細胞免疫在MP相關(guān)疾病的進展過程中起著至關(guān)重要的作用，IL-12以及干擾素-γ等均參與了MP感染[16-17]。

本文結(jié)果發(fā)現(xiàn)，RMMP組年齡以及肺實變、胸腔積液發(fā)生率均顯著高于普通MPP組，且住院時間長于普通MPP組(均P<0.05)。這在一定程度上反映了RMMP患兒的宿主細胞可能存在過度的免疫反應(yīng)。這提示了在臨床實際工作中應(yīng)重點關(guān)注發(fā)生肺實變、胸腔積液以及年齡較大、住院時間較長的MMP患兒，予以針對性預(yù)防措施干預(yù)，以達到降低RMMP發(fā)生幾率的目的。此外，RMMP組外周血CD3+、CD56+絕對計數(shù)均顯著高于普通MPP組，而CD4+、CD19+絕對計數(shù)均顯著低于普通MPP組(均P<0.05)。經(jīng)ROC曲線分析可得：CD3+，CD4+，CD19+及CD56+絕對計數(shù)預(yù)測RMMP的敏感性分別為87%、90%、83%、74%，特異性分別為76%、71%、80%、64%，。RMMP組外周血CRP、LDH水平均顯著高于普通MPP組(均P<0.05)。這說明了CD3+、CD4+、CD19+、CD56+絕對計數(shù)可作為RMPP患兒的預(yù)測指標。究其原因，MP感染的發(fā)生，會促使淋巴細胞的多克隆活化，進一步損害T淋巴細胞亞群的內(nèi)環(huán)境被，尤其是CD4+T淋巴細胞在MPP的的發(fā)生、發(fā)展過程中起著至關(guān)重要的作用。另有研究報道顯示，Th細胞直接介導了抗支原體感染的效應(yīng)機制，對機體的抗支原體感染能力以及炎癥病變均有不同程度的影響[18]。因此，CD3+、CD4+、CD19+、CD56+絕對計數(shù)對于鑒別診斷RMMP與普通MMP均有較高的價值。與此同時，而CD3+，CD4+，CD19+及CD56+絕對計數(shù)聯(lián)合診斷RMMP的敏感性、特異性分別97%、91%，明顯高于上述各項指標單獨檢測。其中主要原因可能在于：聯(lián)合多項指標檢測具有一定的協(xié)同互補作用，繼而達到提高臨床診斷價值的目的。提示了我們在臨床實際工作中可能通過聯(lián)合檢測上述各項指標，繼而達到有效診斷RMMP的目的。另外，朱影等人[19]的研究結(jié)果指出，CRP≥40mg/L或LDH>410IU/L應(yīng)用于RMPP的早期識別中具有極其重要的意義。梅淑芬等人[20]的研究報道亦發(fā)現(xiàn)，CRP≥19.5mg/L或LDH≥474.5IU/L可用以鑒別診斷RMPP與普通MPP。中華醫(yī)學會兒科學分會呼吸學組所制定的《兒童肺炎支原體肺炎診治專家共識(2015年版)》[21]亦指出，RMPP患兒的LDH顯著升高，可作為全身糖皮質(zhì)激素治療的有效參考指標。而本文結(jié)果顯示：RMMP組外周血CRP、LDH水平均顯著高于普通MPP組(均P<0.05)。這與上述研究相似，提示了隨著外周血CRP、LDH水平的不斷升高，患兒進展為RMMP的風險隨之增加。然而，關(guān)于外周血CRP、LDH水平預(yù)測RMMP的價值尚需進行ROC曲線風險以及大樣本研究，這為我們今后的研究提供了方向。

綜上所述，外周血CD3+、CD4+、CD19+、CD56+絕對計數(shù)預(yù)測RMMP具有較高的敏感性以及特異性，可作為RMMP的潛在預(yù)測指標，臨床應(yīng)用價值較高。而外周血CRP、LDH亦有助于RMMP的預(yù)測，但其具體預(yù)測能效仍需進一步研究確定。