慢性丙型肝炎患者血小板及其相關(guān)參數(shù)與HCV RNA 載量的相關(guān)性研究

邵林楠 ,劉 銘 ,周世航*

1.大連市血液中心 血型室,遼寧 大連 116001;2.大連醫(yī)科大學(xué) 細(xì)胞生物學(xué)教研室,遼寧 大連 116044

慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染是全球性公共衛(wèi)生問題。大部分慢性患者會(huì)逐漸發(fā)展為肝硬化、肝癌和肝功能衰竭,只有15%～45%的感染者會(huì)自動(dòng)消除病毒[1]。根據(jù)最新全國(guó)病毒性肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查,我國(guó)HCV 感染的流行率約為0.43%,各地區(qū)間存在差異,長(zhǎng)江以北 (0.53%) 高于長(zhǎng)江以南地區(qū)(0.29%)[2]。

HCV RNA 是HCV 病毒復(fù)制的直接標(biāo)記,可以用作HCV 活動(dòng)性感染的重要確認(rèn)性診斷。HCV RNA 載量水平也是評(píng)估HCV 感染患者病毒負(fù)荷、監(jiān)測(cè)抗病毒治療效果的標(biāo)準(zhǔn)。血小板(PLT)及其相關(guān)參數(shù)[平均血小板體積(MPV)、血小板分布寬度(PDW)、大血小板比率(P-LCR)、血小板壓積(PCT)和平均血小板體積與血小板計(jì)數(shù)比率(MPR)]有著易于測(cè)量、經(jīng)濟(jì)簡(jiǎn)便等特點(diǎn)。一些研究報(bào)告[3-5]證實(shí),PLT 及其參數(shù)可提供有關(guān)慢性HCV 感染患者肝纖維化嚴(yán)重程度的信息。然而在慢性HCV 感染患者中,PLT 及其參數(shù)與HCV RNA 載量的關(guān)系卻知之甚少。本研究旨在分析慢性HCV 患者PLT 及其參數(shù)和病毒RNA 載量的關(guān)系,為臨床治療提供了參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

研究對(duì)象為192例大連地區(qū)慢性HCV 感染患者,其中男103 例、女89 例,平均年齡(53.86±13.96)歲,無其他肝臟腎臟等疾病。所有患者均符合丙型病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)(WS213-2008)。

1.2 設(shè)備儀器

所有血液樣本均以相同方式采集:在室溫(約22 ℃)下采集2 mL外周全血于EDTA 抗凝管中保存。在1 h內(nèi)用自動(dòng)血液分析儀(XT-1800i,日本Sysmex公司)檢測(cè)PLT 指數(shù)。HCV RNA 病毒載量采用全自動(dòng)核酸分離純化及檢測(cè)系統(tǒng)COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan 及其配套試檢測(cè),嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行,用以10為底的對(duì)數(shù)形式表示。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

通過SPSS 21.0 統(tǒng)計(jì)軟件 Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn)驗(yàn)證數(shù)據(jù)是否符合正態(tài)分布。對(duì)于符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以±s形式表示,兩組數(shù)據(jù)差異采用t檢驗(yàn)進(jìn)行比較,偏態(tài)數(shù)據(jù)則以中位數(shù)(四分位間距)形式表示,比較兩組數(shù)據(jù)差異采用Mann-Whitney U 秩和檢驗(yàn)。使用Spearman相關(guān)分析進(jìn)行兩參數(shù)相關(guān)性分析。P<0.05 認(rèn)為差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

HCV 患者臨床指標(biāo)見表1。HCV RNA 載量與PLT 及其相關(guān)指標(biāo)間的相關(guān)性分析結(jié)果見圖1。HCV RNA 載量與PLT、PDW、MPV、P-LCR、PCT及MPR 等指標(biāo)均不相關(guān)(P>0.05)。進(jìn)一步將患者按照性別及年齡分組,通過Spearman相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),HCV RNA 載量與PLT、PDW、MPV、P-LCR、PCT 及MPR 等指標(biāo)均不相關(guān)(P>0.05),見表2。將受試者按照HCV RNA 載量的數(shù)量級(jí)進(jìn)行分組,結(jié)果見表3。在不同病毒載量組中將PLT、PDW、MPV、P-LCR、PCT 及MPR 等指標(biāo)進(jìn)行比較,結(jié)果不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P>0.05。

表1 HCV 患者臨床指標(biāo)

表2 HCV RNA 載量與PLT 及其相關(guān)指標(biāo)間的相關(guān)性分析(按照性別及年齡分組)

表3 不同HCV RNA 載量組間各指標(biāo)比較結(jié)果

圖1 HCV RNA 載量與PLT 及其相關(guān)指標(biāo)間的相關(guān)性分析

3 討論

PLT、PDW、MPV、P-LCR、PCT 及MPR 等PLT 相關(guān)參數(shù)可反應(yīng)PLT 的生成及功能狀態(tài)。PDW 是PLT 體積大小異質(zhì)性的一種度量。MPV描述了平均PLT 體積,可反映PLT 活化和炎癥進(jìn)展。PLT 初期體積較大,在衰老后會(huì)逐步萎縮,且功能下降。P-LCR 是大于12 fL的PLT 的百分比,PCT 可間接反應(yīng)PLT 活性物質(zhì)及所含顆粒的多寡,MPR 是整合了PLT 形態(tài)與數(shù)量的復(fù)合指標(biāo)。關(guān)于PLT 和MPV 的研究較為廣泛,相對(duì)于PLT和MPV,其他PLT 參數(shù)容易被忽視。在慢性HCV感染所致血液系統(tǒng)疾病中PLT 減少癥發(fā)生率較高,隨著HCV 感染者的肝病嚴(yán)重程度增加PLT 減少癥發(fā)病率也明顯增加[3]。PLT 減少癥與PLT 相關(guān)參數(shù)的改變是密切相關(guān)的,因?yàn)镻LT 減少不僅反映了PLT 的破壞,而且反映了PLT 的生成能力[6]。

有研究[3-4,6-7]發(fā)現(xiàn),慢性HCV 感染患者PLT及其相關(guān)參數(shù)與肝纖維化程度密切相關(guān),而肝纖維化程度與HCV RNA 載量并不相關(guān)[8-11],因此我們推測(cè)慢性丙型肝炎患者PLT 及其相關(guān)參數(shù)與HCV RNA 載量不相關(guān)。本研究的目的在于慢性丙型肝炎患者PLT 及其相關(guān)參數(shù)與HCV RNA 載量的相關(guān)性。研究結(jié)果表明,無論是在全部患者群體中還是根據(jù)不同年齡性別分層研究中,PLT 及其相關(guān)參數(shù)與HCV RNA 載量均不相關(guān),而且在不同病毒RNA 載量層組間也未發(fā)現(xiàn)PLT 及其相關(guān)參數(shù)存在顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。說明在慢性HCV 感染患者中PLT 及其相關(guān)參數(shù)與HCV RNA 載量是不相關(guān)的,與上述假設(shè)結(jié)果一致。然而,我們也見到相反結(jié)果的報(bào)道。張夏等[12]發(fā)現(xiàn)在慢性HCV 感染患者中HCV RNA 載量和MPV 呈正相關(guān)性,和PLT 和PCT 呈負(fù)相關(guān)性,和PDW 相關(guān)性分析無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。姜源等[13]發(fā)現(xiàn)HCV 患者M(jìn)PV 與HCV RNA載量有微弱的正相關(guān)關(guān)系。我們的結(jié)果與上述學(xué)者的結(jié)果不一致的原因可能是因?yàn)橐韵聨c(diǎn):①就HCV 感染而言,導(dǎo)致PLT 減少有多種原因,如肝纖維化相關(guān)因素、HCV 肝外復(fù)制,特別是在骨髓中的HCV 復(fù)制、與自身免疫性PLT 減少癥無關(guān)的PLT清除或消耗增加、脾隔離癥、PLT 生成素含量或活性降低都可能在慢性HCV 感染患者的PLT 計(jì)數(shù)中起重要作用[14]。而其他疾病也會(huì)影響PLT 參數(shù),如外周動(dòng)脈疾病、急性冠脈綜合征、自身免疫性疾病、甲狀腺功能異常、局部或全身感染、炎癥性疾病等[15]。因此,患者病情不同或有其他上述并發(fā)癥都會(huì)對(duì)PLT 參數(shù)產(chǎn)生影響,造成抽樣誤差。②檢測(cè)時(shí)限。在EDTA 抗凝管保存過程中,PLT 形態(tài)會(huì)隨著時(shí)間的推移而改變[16],因此分析前的等待時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)影響PLT 參數(shù)的真實(shí)結(jié)果。③樣本數(shù)量相對(duì)較少。

總之,本研究檢測(cè)結(jié)果表明,慢性HCV 感染患者PLT、PDW、MPV、P-LCR、PCT 及MPR 等PLT相關(guān)參數(shù)與HCV RNA 載量不相關(guān)。但后續(xù)研究中還需更嚴(yán)格的患者選擇條件、更精準(zhǔn)的檢測(cè)時(shí)限及更大數(shù)量的樣本加以確認(rèn)。