潮州地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者ALT、HBV及HCV檢測(cè)結(jié)果分析

廣東省潮州市中心血站（521011）陸偉榮 邱英漳 陳松 邱翠燕

丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）是肝臟損傷的靈敏指標(biāo)之一，臨床上主要用于肝臟疾病的診斷。而HBsAg、HBV-DNA、抗-HCV、HCV-RNA則能夠用于檢查人體是否感染了乙型肝炎病毒（HBV）或者丙型肝炎病毒(HCV)。由于HBV和HCV都能夠通過(guò)血液傳播，因此血站的規(guī)程中明確規(guī)定：必須對(duì)獻(xiàn)血者的血液進(jìn)行ALT、HBV和HCV的檢測(cè)。然而，引起ALT升高的因素不僅僅是由于肝炎病毒的感染，還包括其他很多因素，比如肥胖、飲酒、劇烈運(yùn)動(dòng)等因素[1]。目前，在血站血液的報(bào)廢因素中，因ALT不合格而報(bào)廢的比例仍然很大，這一部分血液的報(bào)廢絕大多數(shù)與肝炎病毒感染無(wú)關(guān)，因此浪費(fèi)了大量的血液資源。為探討無(wú)償獻(xiàn)血者ALT與HBV、HCV標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果之間的關(guān)系，我們將潮州地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者的ALT與HBV、HCV的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行研究分析。結(jié)果如下。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 2016年1月1日～2019年12月31日在潮州血站進(jìn)行無(wú)償獻(xiàn)血的35821名獻(xiàn)血者，所有獻(xiàn)血者均符合獻(xiàn)血標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 試劑與設(shè)備

1.2.1 ALT檢測(cè) ALT檢測(cè)試劑為復(fù)星長(zhǎng)征，檢測(cè)儀器為邁瑞B(yǎng)S-400全自動(dòng)生化分析儀。

1.2.2 HBsAg、抗-HCV檢測(cè) HBsAg、抗-HCV試劑盒為英科新創(chuàng)和北京萬(wàn)泰，加樣設(shè)備為MICROLAB STAR和TECAN RSP-100全自動(dòng)加樣系統(tǒng)，酶免后處理為Fane24/20。

1.2.3 HBV-DNA、HCV-RNA檢測(cè) HBVDNA、HCV-RNA檢測(cè)試劑盒為上海浩源，加樣設(shè)備為JANUS 全自動(dòng)加樣儀，提取儀為T(mén)BG EZbead，擴(kuò)增儀為ABI 7500。

1.3 方法

1.3.1 ALT檢測(cè) 采用速率法進(jìn)行檢測(cè)，采用中升北控質(zhì)控品進(jìn)行質(zhì)量控制。

1.3.2 HBsAg、抗-HCV檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），采用英科新創(chuàng)和北京萬(wàn)泰2種試劑同時(shí)進(jìn)行兩遍ELISA檢測(cè)，采用康徹思坦質(zhì)控品進(jìn)行質(zhì)量控制。

1.3.3 HBV-DNA和HCV-RNA檢測(cè) 采用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）。經(jīng)過(guò)ELISA和ALT檢測(cè)的樣本，去除檢測(cè)結(jié)果不合格的樣本后，對(duì)余下檢測(cè)結(jié)果合格的樣本進(jìn)行HBV-DNA和HCV-RNA檢測(cè)。采用浩源公司試劑對(duì)樣本進(jìn)行8混樣檢測(cè)，如有反應(yīng)性再進(jìn)行拆分鑒別檢測(cè)。

1.4 結(jié)果判斷

1.4.1 ALT檢測(cè) ALT檢測(cè)值＞50U/L，判為不合格。

1.4.2 HBsAg、抗-HCV檢測(cè) HBsAg、抗-HCV判定規(guī)則均為：S/CO值≥1為陽(yáng)性；若樣本檢查結(jié)果只有一種試劑的S/CO值≥1，則對(duì)該樣本進(jìn)行雙試劑雙孔復(fù)查，只要其中有一孔S/CO值≥1則判為不合格。

1.4.3 HBV-DNA和HCV-RNA檢測(cè) HBVDNA和HCV-RNA檢測(cè)值ct≤45，判為陽(yáng)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。組間異常率的比較采用x2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ALT、HBsAg、HBV-DNA、抗-HCV、HCV-RNA檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)附表1。

附表1 2016～2019年35821名獻(xiàn)血者標(biāo)本檢測(cè)不合格結(jié)果分布

附表2 ALT合格、不合格獻(xiàn)血者HBsAg、HBV-DNA檢測(cè)結(jié)果

附表3 ALT合格、不合格獻(xiàn)血者抗-HCV檢測(cè)結(jié)果

2.2 ALT合格、不合格獻(xiàn)血者HBsAg、HBV-DNA檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)附表2。

2.3 ALT合格、不合格獻(xiàn)血者抗-HCV檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)附表3。

3 討論

由附表1可以看出，HBsAg檢出陽(yáng)性752份，陽(yáng)性率為2.10%，陽(yáng)性率在所有檢測(cè)項(xiàng)目中最高，比ALT1.62%的不合格率還高，相比于任本春[2][3]等研究的地區(qū)陽(yáng)性率也是偏高，而ALT的不合格率偏低。分析HBsAg高陽(yáng)性率ALT低不合格率的原因，筆者認(rèn)為與工作人員對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行獻(xiàn)血前快速篩查的操作有較大關(guān)系，本單位目前對(duì)獻(xiàn)血者獻(xiàn)血前快速篩查的項(xiàng)目有HBsAg、ALT、血型、Hb四個(gè)項(xiàng)目，HBsAg、ALT快速篩查采用金標(biāo)法。由于初篩工作人員較多；流動(dòng)性較大；操作不夠規(guī)范；采集末梢血血量不夠；項(xiàng)目檢測(cè)順序反應(yīng)時(shí)間太短，ALT金標(biāo)法僅需180s的反應(yīng)時(shí)間，而HBsAg金標(biāo)法最長(zhǎng)需要10min才能判斷結(jié)果；這些原因，使ALT初篩值較高的獻(xiàn)血者更容易被暫時(shí)淘汰，而一些本應(yīng)該是HBsAg陽(yáng)性的血液被采集了，從而導(dǎo)致HBsAg篩查的高陽(yáng)性率，而ALT的不合格率控制得比較好。HBsAg高陽(yáng)性率第二個(gè)原因，筆者認(rèn)為對(duì)于少部分的單試劑陽(yáng)性樣本，不排除假陽(yáng)性的可能。此外，HBsAg高陽(yáng)性率與本地區(qū)衛(wèi)生條件、群眾的飲食習(xí)慣等也有關(guān)系。由于HBV-DNA和HCV-RNA的檢測(cè)是去除ELISA和ALT檢測(cè)陽(yáng)性樣本后進(jìn)行的檢測(cè)，因此HBV-DNA和HCV-RNA的陽(yáng)性率都不算高，HCV-RNA沒(méi)有檢測(cè)出陽(yáng)性。

ALT是肝臟損傷的靈敏指標(biāo)之一，臨床上主要用于肝臟疾病的診斷，肝臟受損，ALT有可能會(huì)升高。但導(dǎo)致ALT升高的影響因素還有很多，并不完全是由于肝臟受到病毒感染引起的，人體肥胖、過(guò)量飲酒、劇烈運(yùn)動(dòng)或重體力勞動(dòng)、過(guò)度勞累、一些特定的藥物或飲食等也會(huì)導(dǎo)致ALT的升高[4]；同時(shí)，血液標(biāo)本的質(zhì)量、重度脂血或溶血、標(biāo)本的處理和保存方式、檢測(cè)人員的操作、質(zhì)量控制、試劑、設(shè)備等也都會(huì)影響ALT的檢測(cè)結(jié)果。因此，ALT升高并不都是由肝臟受損引起的，它只是肝臟受到病毒感染時(shí)能夠檢測(cè)到的靈敏指標(biāo)之一，同時(shí)也還有其他一些指標(biāo)能夠說(shuō)明肝臟受損。HBsAg、抗-HCV是HBV、HCV的病毒標(biāo)志物，檢測(cè)HBsAg、抗-HCV能夠提示人體是否感染了HBV或HCV，采供血機(jī)構(gòu)對(duì)獻(xiàn)血者標(biāo)本進(jìn)行HBsAg、抗-HCV檢測(cè)，能夠最大限度保證血液的安全。而隨著核酸檢測(cè)技術(shù)在血站的全覆蓋，更是能夠進(jìn)一步縮短HBV、HCV的檢測(cè)“窗口期”，檢測(cè)出隱匿性的HBV和HCV。

由附表2、附表3可以看出，2016～2019年在潮州血站參與無(wú)償獻(xiàn)血的35821份獻(xiàn)血者檢測(cè)樣本中，ALT不合格合并HBsAg+或HBV-DNA+樣本數(shù)僅為16份；HCV-RNA沒(méi)有檢測(cè)出陽(yáng)性，ALT不合格合并抗-HCV+樣本數(shù)僅為1份。由此可以看出，ALT不合格合并HBsAg、HBV-DNA、抗-HCV陽(yáng)性樣本份只占了全部ALT不合格樣本的很少的一部分，大量的ALT不合格與HBsAg、HBV-DNA、抗-HCV陽(yáng)性并不存在關(guān)聯(lián)，因此筆者認(rèn)為，很大一部分的ALT升高并不是由HBV、HCV感染所引起的，而是由其他一些因素造成的。這一大部分因?yàn)锳LT不合格的血液最終被報(bào)廢處理，造成了血液的極大浪費(fèi)。此外，ALT不合格組HBsAg、HBV-DNA陽(yáng)性率與ALT合格組HBsAg、HBV-DNA陽(yáng)性率之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），ALT不合格組抗-HCV陽(yáng)性率與ALT合格組抗-HCV陽(yáng)性率之間差異也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），再次說(shuō)明ALT不合格與HBsAg、HBVDNA、抗-HCV并不存在相關(guān)性，把ALT作為一個(gè)指標(biāo)排除HBV、HCV感染的意義并不大。

ALT檢測(cè)值與HBsAg、抗-HCV的檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，因此，ALT與HBV、HCV感染并沒(méi)有必然的相關(guān)性。在當(dāng)前仍然實(shí)施強(qiáng)制性篩查的情況下，只有從其他一些方面入手，保證血液不要過(guò)多的浪費(fèi)。比如做好采血前初篩工作，加強(qiáng)獻(xiàn)血前征詢，加強(qiáng)初篩人員培訓(xùn)，強(qiáng)化采血人員規(guī)范化操作，提高檢驗(yàn)人員的工作技能，做好血液采集后標(biāo)本的運(yùn)輸儲(chǔ)存工作，加強(qiáng)試劑的保存和使用管理，加強(qiáng)儀器的維護(hù)保養(yǎng)校準(zhǔn)工作，盡最大可能避免采集到ALT不合格的血液，保證ALT檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

從本研究可以看出，由于ALT的檢測(cè)，一些本應(yīng)該是合格的血液被報(bào)廢處理，導(dǎo)致了血液資源的浪費(fèi)，因此，筆者建議是否可以重新衡量ALT檢測(cè)的意義，考慮是否可以提高ALT的不合格參考值，以避免血液的過(guò)多浪費(fèi)。同時(shí)，由于本單位的年采血量并不多，因此標(biāo)本數(shù)量有限，數(shù)據(jù)可能缺乏很好的說(shuō)服力，希望有更多的專(zhuān)家和同行能夠從更多更廣的數(shù)據(jù)對(duì)采供血機(jī)構(gòu)檢測(cè)ALT的意義進(jìn)行考究，以利于國(guó)家制定更科學(xué)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。