王立民 呂 品* 于志民 張繼舟
1 黑龍江省科學(xué)院自然與生態(tài)研究所 哈爾濱 150040
2 濕地與生態(tài)保育國家地方聯(lián)合工程實(shí)驗(yàn)室 哈爾濱 150040
中藥赤芍主要來源為毛茛科芍藥(Paeonia lactifolraPall.)野生種群的根,為我國傳統(tǒng)大宗藥材,藥用歷史悠久,具有活血化瘀、清熱涼血、散瘀止痛功效[1]。由于近年來對(duì)野生資源破壞而導(dǎo)致藥材匱乏,國內(nèi)許多地區(qū)開展了栽培赤芍的嘗試和探索。國內(nèi)學(xué)者在芍藥藥效分類、人工栽培及生物性狀、土壤養(yǎng)分環(huán)境評(píng)價(jià)及芍藥成分分析方面進(jìn)行了一系列的研究[2~14]。雖然國內(nèi)對(duì)栽培赤芍研究開展領(lǐng)域較多,但在產(chǎn)量品質(zhì)等關(guān)鍵技術(shù)方面還不夠深入。本研究針對(duì)栽培赤芍產(chǎn)量和芍藥苷含量提升進(jìn)行有機(jī)物料(褐煤)、氮、磷施肥量配比優(yōu)化,以探索達(dá)到產(chǎn)量品質(zhì)俱佳的赤芍優(yōu)化施肥模式,為中藥材規(guī)?;N植提供科技支撐,為中藥產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展提供技術(shù)支持。
試驗(yàn)地點(diǎn)在黑龍江省集賢縣太平鎮(zhèn)三苗圃。
供試土壤類型為黑鈣土,耕層(0 ~20 cm)土壤基本肥力:有機(jī)質(zhì)含量23.68 g/kg,pH 5.74,堿解氮含量178 mg/kg,速效磷含量50.46 mg/kg,速效鉀含量311 mg/kg。
供試肥料,氮肥為尿素(含N 46%);磷肥為過磷酸鈣(含P2O516%);有機(jī)物料為褐煤,產(chǎn)自黑龍江省孫吳縣,在施入前將其粉碎到20 目大小的顆粒,褐煤中的總腐植酸含量28%,黃腐酸含量2.27%,pH 為3.6,有機(jī)質(zhì)含量≥50%,其中含N 1.95 g/kg,P2O50.31 g/kg,K2O 0.25 g/kg(均為干基)。
1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
試驗(yàn)采用氮、磷、有機(jī)物料三因素二次飽和D-最優(yōu)回歸設(shè)計(jì)[15],共設(shè)置10 個(gè)處理,各處理編碼值和實(shí)際施肥量列于表1。
試驗(yàn)用磷肥、有機(jī)物料于播種前整地時(shí)一次施入,氮肥分兩次施用,其中第1 年以基肥施入1/3,第2 年返青時(shí)以追肥施入2/3;赤芍種苗定植時(shí)間2018 年9 月—10 月,將選好的3 年生種苗按株距30 ~45 cm 定植,芽朝上,覆土5 ~8 cm,稍壓,其他為常規(guī)田間管理措施,2019 年9 月—10 月收獲。
表1 試驗(yàn)因素水平設(shè)置Tab.1 Test factor level setting
1.2.2 測(cè)定方法
收獲時(shí)按小區(qū)計(jì)產(chǎn)(鮮重),折算成畝產(chǎn)量,隨機(jī)量取50 株赤芍的根長(zhǎng)、根粗,并測(cè)定根部芍藥苷含量。
芍藥苷含量采用液相色譜法,色譜條件為C18色譜柱;流動(dòng)相為乙腈和0.1%磷酸水溶液,流動(dòng)相梯度洗脫條件為0 min,0%乙腈;0 ~40 min,0 ~50%乙腈;40 ~42 min,50%~0 乙腈;42 ~50 min,0%乙腈;體積流量1.0 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)230 nm;柱溫30 ℃;進(jìn)樣量為10 μL。芍藥苷在230 nm 附近有吸收峰。
采用SPSS 16.0、DPSv 15.10 和Excel 2007 等軟件對(duì)試驗(yàn)測(cè)定數(shù)據(jù)進(jìn)行整理、統(tǒng)計(jì)分析及圖表制作。
表2 為不同處理赤芍根系性狀、產(chǎn)量及芍藥苷含量。由表中數(shù)據(jù)可以看出,不同處理對(duì)赤芍根長(zhǎng)、根粗、產(chǎn)量和芍藥苷含量影響不同。處理4、處理5 的赤芍根長(zhǎng)大于其他處理,與處理1、處理2、處理6、處理7、處理9、處理10 差異顯著,與處理3 和處理8 差異不顯著;處理2、處理5 的赤芍根粗大于其他處理,與處理8 之外的其他處理差異顯著;處理6 的赤芍產(chǎn)量最高,與處理8之外的其他處理差異顯著;處理3、處理7 的芍藥苷含量高于其他處理,與處理9 之外的其他處理差異顯著。
表2 不同處理赤芍根系性狀、產(chǎn)量及芍藥苷含量Tab.2 Root traits, yield and paeonif lorin content of Radix Paeoniae Rubra in different treatments
根據(jù)表2 的試驗(yàn)結(jié)果,通過數(shù)學(xué)模擬[15],建立赤芍產(chǎn)量效應(yīng)函數(shù)和芍藥苷含量效應(yīng)函數(shù)。
赤芍產(chǎn)量(Y)與氮(x1)、磷(x2)、有機(jī)物料(x3)的碼值效應(yīng)函數(shù)為:
對(duì)該方程進(jìn)行F檢驗(yàn),F(xiàn)=36.91**>F0.01(9,1)=5.56,決定系數(shù)R2=0.9999,產(chǎn)量與氮、磷、有機(jī)物料施用量之間存在極顯著的回歸關(guān)系,所獲得施肥的效應(yīng)函數(shù)擬合性好,在指導(dǎo)生產(chǎn)上具有較好的可靠性。
芍藥苷含量(Y)與氮(x1)、磷(x2)、有機(jī)物料(x3)的碼值效應(yīng)函數(shù)為:
對(duì)該方程進(jìn)行F檢驗(yàn),F(xiàn)=39.29**>F0.01(9,1)=5.56,決定系數(shù)R2=0.9999,芍藥苷含量與氮、磷、有機(jī)物料施用量之間也存在極顯著的回歸關(guān)系,所獲得芍藥苷含量效應(yīng)函數(shù)擬合性好,說明能較好地指導(dǎo)實(shí)際施肥情況。
2.2.1 赤芍產(chǎn)量和芍藥苷含量碼值效應(yīng)函數(shù)的單因素效應(yīng)分析
為分別探討氮、磷、有機(jī)物料施用量對(duì)赤芍產(chǎn)量和芍藥苷含量的影響,固定其中任意2 個(gè)碼值自變量為零水平,對(duì)方程(1)和(2)使用徐中儒等[16]提出的降維法,得到兩組單因子效應(yīng)方程(3)、(4)、(5)和(6)、(7)、(8),并分別作圖(圖1、圖2)。
(1)氮、磷、有機(jī)物料與產(chǎn)量的單因子效應(yīng)方程。
圖1 赤芍產(chǎn)量因子效應(yīng)曲線Fig.1 Yield factor effect curve of Radix Paeoniae Rubra
由圖1 中可看出,3 條曲線都是開口朝下的拋物線,說明氮、磷、有機(jī)物料與赤芍產(chǎn)量的關(guān)系符合先上升后下降的E.Mitscherlich 學(xué)說[17],根據(jù)圖1 及方程(3)、(4)、(5)可得出,在低水平(氮0 ~90 kg/hm2、 磷0 ~100 kg/hm2、 褐 煤0 ~3700 kg/hm2)施用量情況下,氮肥、磷肥、有機(jī)物料適量施用促產(chǎn)效果顯著,而過高及超過一定用量(氮>110 kg/hm2、磷>150 kg/hm2、褐煤>4200 kg/hm2)其減產(chǎn)作用也很顯著;施鉀肥對(duì)赤芍產(chǎn)量的影響并不顯著。因此必須注意其合理施用量范圍,否則將會(huì)導(dǎo)致肥料的嚴(yán)重浪費(fèi),并顯著降低經(jīng)濟(jì)效益。
(2)氮、磷、有機(jī)物料與芍藥苷含量的單因子效應(yīng)方程。
圖2 赤芍芍藥苷因子效應(yīng)曲線Fig.2 Paeonif lorin factor effect curve of Radix Paeoniae Rubra
芍藥苷是一種單萜類糖苷化合物,具有多種生物活性,如抗氧化、抗自由基損傷、抗血小板聚集、改善微循環(huán)、免疫調(diào)節(jié)等,且毒副作用?。?8~20]。由圖2 可知,芍藥苷含量隨施氮量的遞增而近乎線性下降,一定量施氮引起的芍藥苷含量下降可能和產(chǎn)量提高引起的“稀釋作用”有關(guān);但芍藥苷含量隨施氮量增加而下降,說明施氮對(duì)其積累有不利影響。由于氮代謝是一切生命活動(dòng)的基礎(chǔ),也是植物體內(nèi)糖類、脂類、氨基酸等物質(zhì)代謝的基礎(chǔ)??赡苁┑^多導(dǎo)致赤芍體內(nèi)某些酶或輔酶的含量發(fā)生較大變化,從而對(duì)其次生代謝產(chǎn)生明顯影響,不利于赤芍芍藥苷積累。隨磷肥和有機(jī)物料施用量增加,芍藥苷含量的變化均為開口向下的拋物線。赤芍芍藥苷含量的極大值點(diǎn)分別出現(xiàn)在磷肥編碼值為0.2312 和有機(jī)物料編碼值為0.3008 時(shí),即過磷酸鈣和有機(jī)肥施用量分別為613 kg/hm2和4650 kg/hm2時(shí),說明對(duì)于赤芍芍藥苷的積累需要一個(gè)最適宜的土壤營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,土壤養(yǎng)分含量不足會(huì)影響其積累,但施肥過量同樣會(huì)導(dǎo)致其含量下降。同時(shí)也說明磷和有機(jī)質(zhì)能夠影響芍藥苷的形成和積累,適量施用對(duì)芍藥苷含量提升有促進(jìn)作用。
2.2.2 施肥模型尋優(yōu)結(jié)果
采用頻率分析法[21]對(duì)赤芍產(chǎn)量-施肥模型進(jìn)行尋優(yōu),在95%的置信區(qū)間內(nèi),當(dāng)x1取-0.4987~-0.2929,x2取-0.7123 ~-0.4169,x3取-0.2564 ~0.0548,對(duì)應(yīng)的優(yōu)化施肥量為尿素174~240 kg/hm2,過磷酸鈣437~687 kg/hm2,褐煤3700 ~4500 kg/hm2時(shí),可以實(shí)現(xiàn)目標(biāo)產(chǎn)量在2800 ~3200 kg/hm2范圍內(nèi)。
同理,在赤芍芍藥苷含量3%~4%的約束條件下,采用頻率分析法[21]對(duì)赤芍苷含量-施肥模型進(jìn)行尋優(yōu),在95%的置信區(qū)間內(nèi),當(dāng)x1取0.7076 ~0.4170;x2取0.6694 ~0.3740;x3取-0.3050 ~0.0718,對(duì)應(yīng)的優(yōu)化施肥量為尿素200 ~350 kg/hm2,過磷酸鈣550 ~750 kg/hm2,褐煤2490 ~4200 kg/hm2。
將上述肥料施用量取交集,得:尿素200 ~240 kg/hm2,過 磷 酸 鈣550 ~687 kg/hm2,褐 煤3700 ~4200 kg/hm2,可以實(shí)現(xiàn)赤芍產(chǎn)量2800 ~3200 kg/hm2,芍藥苷含量3%~4%。
研究結(jié)果表明,氮、磷、有機(jī)物料合理施用能促進(jìn)赤芍的生長(zhǎng)發(fā)育,并對(duì)赤芍的產(chǎn)量和品質(zhì)產(chǎn)生影響。在施用量相對(duì)少的情況下氮肥、有機(jī)物料對(duì)產(chǎn)量的促進(jìn)作用很明顯,但超過一定用量以后,減產(chǎn)作用也很明顯;施磷肥對(duì)赤芍產(chǎn)量的影響不顯著。磷和有機(jī)物料(褐煤)能夠參與單萜類糖苷化合物的形成和積累,一定量的施用對(duì)芍藥苷含量提升有促進(jìn)作用。本結(jié)果同時(shí)證明,有機(jī)物料(褐煤)表現(xiàn)出增產(chǎn)、增質(zhì)的良好效應(yīng)。
結(jié)合試驗(yàn)數(shù)據(jù)及肥效分析,赤芍的施肥應(yīng)在保證充足有機(jī)肥(有機(jī)物料)的基礎(chǔ)上,實(shí)現(xiàn)氮、磷肥的合理配施。為保證栽培赤芍高產(chǎn)優(yōu)質(zhì),建議配方肥合理范圍:尿素200 ~240 kg/hm2,過磷酸鈣550 ~687 kg/hm2,褐煤3700 ~4200 kg/hm2,可實(shí)現(xiàn)產(chǎn)量2800 ~3200 kg/hm2,芍藥苷含量3%~4%。在赤芍的種植過程中,由于赤芍生長(zhǎng)的地理環(huán)境與土壤環(huán)境會(huì)有一些變化,本模型的參數(shù)可根據(jù)土壤肥力狀況進(jìn)行調(diào)整和優(yōu)化,以實(shí)現(xiàn)氮、磷、有機(jī)物料的平衡配施,達(dá)到高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)效果。