慢性腎病各期中血清NGAL、CysC和腎功能指標(biāo)的變化及其臨床意義

王啟茹 陳 志 王朝暉 莊 嚴(yán)

江蘇省興化市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 225700

慢性腎病(CKD)是一種逐漸持續(xù)的腎臟功能惡化綜合征，具有起病隱匿、危害性大、發(fā)病率高、治療成本高等特點(diǎn)。近年來(lái)，慢性腎病已經(jīng)成為我國(guó)乃至全球人類必須面臨的公共健康問題?？茖W(xué)研究表明，CKD的發(fā)生發(fā)展最終會(huì)引發(fā)終末期腎病(ESRD)[1-3]。如果能盡早發(fā)現(xiàn)并及時(shí)有效地治療，CKD患者病情可得到良好控制，因此在人群中篩查CKD刻不容緩。但是目前，臨床上常用的腎功能各項(xiàng)指標(biāo)包括血清肌酐(SCr)、尿素(UREA)和尿酸(UA)不能準(zhǔn)確反映早期腎臟損傷及慢性腎病的進(jìn)程。因此，發(fā)現(xiàn)新的能反映早期腎臟損傷的生物標(biāo)志物迫在眉睫。

近年來(lái)，中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白(NGAL)作為急性腎臟功能損傷(AKI)的早期診斷生物標(biāo)記物已得到大量國(guó)內(nèi)外專家的證實(shí)[4]。最新的研究表明，NGAL和CKD也存在一定的相關(guān)性[5-6]，但其中具體的機(jī)制仍然需要進(jìn)一步的探究。胱抑素C(CysC)是腎臟功能損傷的另一個(gè)重要標(biāo)志物[7]。本研究旨在分析慢性腎病各期中NGAL、CysC及腎功能各項(xiàng)指標(biāo)(SCr、UREA、UA)的表達(dá)變化及其臨床意義，為CKD精細(xì)分期診斷和臨床早期治療提供堅(jiān)定的理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2017年9月—2019年9月106例來(lái)我院就診并確診為慢性腎病的患者作為研究對(duì)象，患者均符合2013 年美國(guó)國(guó)家腎臟基金會(huì)(NKF)腎臟病預(yù)后質(zhì)量指南(K/DOQI)的診斷學(xué)標(biāo)準(zhǔn)[8]。根據(jù)美國(guó)慢性腎臟病教育計(jì)劃協(xié)作組發(fā)布的腎小球?yàn)V過(guò)率(GFR)估算的CKD-EPI新方程[9]，將CKD分為5期：CKD1期18例，其中包括男10例，女8例，平均年齡(55±12)歲；CKD 2期21例，其中包括男10例，女11例，平均年齡(49±16)歲；CKD3期 23例，其中包括男12例，女11例，平均年齡(53±13)歲；CKD4期 16 例，其中包括男8例，女8例，平均年齡(48±16)歲；CKD5期 28例，其中包括男15例，女13例，平均年齡(56±11)歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：炎癥狀態(tài)、甲狀腺疾病、腫瘤、感染性疾病、大量蛋白尿、肝病、白細(xì)胞數(shù)異常，使用大量激素或免疫抑制劑治療等患者。選取同時(shí)期我院體檢中心體檢的健康人群100例作為健康對(duì)照組，男51例，女49例，平均年齡(51±8)歲，排除血糖、血脂、肝腎功能試驗(yàn)及血壓異常，心臟、肝臟、脾臟、腎臟、肺等重要臟器疾病。 健康對(duì)照組與CKD不同期各組性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集： 研究對(duì)象禁食12h后于清晨空腹采集靜脈血，黃色促凝管用于CysC和腎功能各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定，綠色肝素抗凝管用于血液NGAL的檢測(cè)。室溫放置半小時(shí)，3 500r/min離心5min，取血清或血漿用于生化分析。

1.2.2 檢測(cè)儀器與試劑： 采用美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特AU5800全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，檢測(cè)試劑均由貝克曼公司提供。檢測(cè)項(xiàng)目的室內(nèi)質(zhì)控均符合要求，室間質(zhì)評(píng)成績(jī)優(yōu)秀。SCr測(cè)定采用肌氨酸氧化酶法、BUN測(cè)定選用尿素酶—谷氨酸脫氫酶法、UA測(cè)定采用尿酸酶法，CysC和NGAL測(cè)定采用免疫比濁法。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS20.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量數(shù)據(jù)用(平均數(shù)±方差)表示；采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)做組間差異分析；多個(gè)樣本(多于兩個(gè)樣本)比較采用單因素方差分析，相關(guān)性分析采用Pearson分析。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組一般資料的比較 隨著CKD病程的加劇，各分期患者血清中的NGAL、CysC和腎功能各項(xiàng)指標(biāo)(SCr、UREA、UA)也隨之呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，CKD3、4期SCr水平與健康對(duì)照相比均顯著升高(P<0.05)；而CKD1、2期SCr和健康對(duì)照組比，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 健康體檢組和CKD組患者的各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果比較

2.2 NGAL和CysC、腎功能各項(xiàng)指標(biāo)及GFR之間的相關(guān)性分析 采用Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，NGAL與SCr、UREA、UA和CysC呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r分別為0.848、0.792、0.73、0.917，P<0.05。NGAL和GFR之間呈負(fù)相關(guān)，r=-0.728，P<0.05，見圖1～圖5。

3 討論

CKD是一種由各種各樣原因?qū)е碌穆阅I臟結(jié)構(gòu)異常和功能紊亂的綜合性疾病。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外的研究表明，隨著全球人民生活方式的不斷改變，CKD的發(fā)病率日趨上升。伴隨著CKD的發(fā)生發(fā)展，人類的健康和全球經(jīng)濟(jì)也面臨著巨大的挑戰(zhàn)[1-3]。目前臨床上CKD早期腎臟功能損傷并沒有典型的體征和癥狀，所以通常會(huì)漏診。通常檢測(cè)受肌肉含量、飲食、運(yùn)動(dòng)情況、情緒等諸多因素的腎功能各項(xiàng)指標(biāo)和尿蛋白作為篩查CKD的標(biāo)志物。雖然血清SCr、UREA、UA的檢測(cè)簡(jiǎn)便易行，但容易影響，不能反映患者真正的腎臟功能，尤其是不能準(zhǔn)確覺察GFR的早期下降，也不能預(yù)測(cè)腎臟疾病的進(jìn)展，使患者錯(cuò)過(guò)治療的最佳時(shí)機(jī)[3]。NGAL被證明是一種既敏感又特異的急性腎功能損傷的生物標(biāo)志物[4-6]。近十年來(lái)許多科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)腎小管在CKD的發(fā)生、發(fā)展中起到至關(guān)重要的作用，其中的病理機(jī)制涉及周圍組織的缺氧、腎小管萎縮、腎間質(zhì)細(xì)胞纖維化等，最終會(huì)導(dǎo)致終末期腎病[2]。

圖1 NGAL和UREA的相關(guān)性分析

圖2 NGAL和SCr的相關(guān)分析

圖3 NGAL和UA的相關(guān)性分析

圖4 NGAL和CysC的相關(guān)性分析

圖5 NGAL和GFR的相關(guān)性分析

本研究通過(guò)比較各組中血清NGAL、CysC、SCr、UREA、UA以及GFR水平發(fā)現(xiàn)，血清NGAL含量在CKD1期中已經(jīng)開始增加，且和健康組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與此同時(shí)SCr水平也有少許升高，但是和健康對(duì)照組相比，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。表明血清NGAL相比于SCr而言，在腎功能損傷中有較高的敏感性。另外，血清NGAL水平隨著CKD病情加重而逐漸升高，這也進(jìn)一步驗(yàn)證了NGAL可作為CKD早期腎功能損傷的預(yù)測(cè)因子。Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，血清NGAL與腎功能各項(xiàng)指標(biāo)(SCr、UREA、UA)、CysC呈現(xiàn)正相關(guān)(P<0.05)，且與GFR存在負(fù)相關(guān)性(P<0.05)，這與國(guó)外多位學(xué)者進(jìn)行的研究結(jié)果相一致[10-12]。本研究發(fā)現(xiàn)隨著CKD病情的惡化，GFR逐漸減低，患者血清NGAL的水平則逐漸升高，這一現(xiàn)象說(shuō)明NGAL可以反映腎功能損害的嚴(yán)重程度，提示NGAL一定程度上可預(yù)示殘留的GFR，且效果優(yōu)于檢測(cè)SCr的水平。

綜上所述，NGAL可以作為CKD患者早期腎功能損害的一個(gè)即敏感又特異的生物學(xué)標(biāo)志物。在一定程度上，血清NGAL的水平能代替GFR反映腎臟受損的嚴(yán)重性。為進(jìn)一步驗(yàn)證血清NGAL在CKD疾病整個(gè)進(jìn)展過(guò)程中檢測(cè)的效能，需要進(jìn)一步的擴(kuò)大樣本量并對(duì)患者進(jìn)行隨訪監(jiān)測(cè)。