白及提取物乳膏劑的處方篩選研究

趙春麗，申孝靈，晏合呂，李 婷，李秀雅，周永強(qiáng)

(貴州中醫(yī)藥大學(xué)，貴州 貴陽(yáng) 550025)

皮膚具有一定的彈性和韌性，經(jīng)常會(huì)或輕或重地受到損傷，手足皸裂就是最令人煩惱的損傷之一。不僅是可以直接觀察到的皸裂稱為損傷，事實(shí)上，皮膚粗糙也可以認(rèn)為皮膚已受到損傷。近年來(lái)，有報(bào)道在中醫(yī)美容方中加入一種或幾種藥性相容、療效強(qiáng)的外傷中草藥，能夠?qū)Ψ乐纹つw皸裂取得很好的效果。例如“純中藥萃取養(yǎng)膚霜”，其中添加的中草藥(丹參、紅景天等)有清熱活血養(yǎng)膚生肌之效，在皮膚干燥、脫屑、脫皮及皮膚皸裂方面療效顯著[1]。白及為蘭科植物白及BletillaStriata(Thunb.) Reichb. f .的干燥塊莖。具有收斂止血，消腫生肌的作用，多用于咯血，吐血，外傷出血，瘡瘍腫毒，皮膚皸裂[2]?！缎滦薇静荨吩疲骸按宋?，山野人患手足皸拆，嚼以涂之有效[3]?！薄侗静菀鬃x》中也有記載：“除頭面，使皮黑反白，手足皴裂，令澀肌變滑。去腐逐瘀甚速，生肌止痛良效。肺癰膿血未盡者勿用。手足皴裂，水合末塞之。勿犯水[4]?！蹦壳把芯堪l(fā)現(xiàn)白及中主要含有聯(lián)芐類、二氫菲類、聯(lián)菲類、聯(lián)菲醚類、菲并吡喃類、聯(lián)芐葡萄糖苷類、甾體、三萜、脂肪酸、多糖蒽醌、黃酮等多種成分[5]。白及的這些功效與其所含有的藥效成分密切相關(guān)，其塊莖提取物主要成分為白及多糖，化學(xué)組成分為葡甘聚糖[6]。故本研究選用中藥白及作為天然添加劑，通過(guò)制備O/W型乳膏劑，優(yōu)化其制備工藝，并結(jié)合白及中膠狀成分愈合創(chuàng)傷的優(yōu)點(diǎn)，以治療手足皸裂、保持手部肌膚柔嫩細(xì)膩為主要目的，研制含有白及提取物的乳膏劑，以期為進(jìn)一步深度開(kāi)發(fā)白及相關(guān)產(chǎn)品提供參考依據(jù)。

1 材料

1.1 藥材

白及購(gòu)買于施秉縣富民高新農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司。

1.2 主要試劑

硬脂酸，卡波姆、三乙醇胺、司盤(pán)-60等購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；蜂蠟，二甲基硅油、高級(jí)脂肪醇、棕櫚酸異丙酯、尼泊金乙酯等購(gòu)買于天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司。

1.3 主要儀器

電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(101-1AB，天津市泰斯特儀器有限公司)；電子分析天平(XS205DU，瑞士梅特勒公司)，電子恒溫水浴鍋(DKW-4，上?？莆鲗?shí)驗(yàn)儀器廠)；臺(tái)式低速離心機(jī)(L600，湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開(kāi)發(fā)有限公司)。

2 方法

2.1 正交設(shè)計(jì)法篩選白及膠提取工藝

取約50 g白及新鮮藥材切丁，進(jìn)行水煮提取，紗布過(guò)濾，合并濾液，濃縮，取濃縮濾液，加入3倍量醇沉，靜置至無(wú)沉淀生成，計(jì)算白及膠得率。以白及膠的得率為指標(biāo)，設(shè)計(jì)L9(34)正交優(yōu)化試驗(yàn)，以提取次數(shù)(1、2、3)、料液比(1∶5、1∶10、1∶14)及醇沉濃度(95%乙醇、70%乙醇、80%乙醇)為考察因素，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，對(duì)提取時(shí)間(0.5、1、1.5)實(shí)施單因素考察，確定最終白及提取最優(yōu)工藝。

2.2 乳膏劑基質(zhì)處方的考察

2.2.1 單因素考察

以穩(wěn)定性為指標(biāo)，即在離心、耐寒、耐熱測(cè)試時(shí)同時(shí)穩(wěn)定。具體為2000 r/min旋轉(zhuǎn)30 min離心后，觀察其是否分層；進(jìn)行耐寒測(cè)試時(shí)，置于-6～-10℃保持24 h后，恢復(fù)室溫后應(yīng)與試驗(yàn)前相比，觀察是否有明顯性狀差異；進(jìn)行耐熱測(cè)試時(shí)，置于(40±1)℃保持24 h，恢復(fù)至室溫后觀察膏體是否有油水分離現(xiàn)象。具體為只改變一個(gè)因素組成的加入量，其他因素含量固定不變[6]。

2.2.2 多因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)

根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果，設(shè)計(jì)多因素試驗(yàn)考察對(duì)穩(wěn)定性影響較大的硬脂酸、蜂蠟、二甲基硅油、高級(jí)脂肪醇原料的質(zhì)量配比，在符合穩(wěn)定性(耐熱、耐寒、離心)要求，同時(shí)兼顧外觀，細(xì)膩度、粘度、涂展性、吸收性等方面滿足要求。

表1 多因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

2.2.3 考察指標(biāo)及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

參照參考文獻(xiàn)[7]及《中國(guó)藥典》[8]要求乳膏劑應(yīng)均勻、細(xì)膩、具有適當(dāng)?shù)恼吵矶?、易于涂布，故設(shè)計(jì)考察指標(biāo)以穩(wěn)定性和乳膏的外觀性狀進(jìn)行評(píng)分，綜合評(píng)分滿分為100分，每項(xiàng)各占10分。同時(shí)對(duì)乳膏劑的外觀(形態(tài)、色澤、透光度)、細(xì)膩度、粘度、涂展性、吸收性進(jìn)行評(píng)價(jià)，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表2。

表2 處方篩選各項(xiàng)考察指標(biāo)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

2.2.4 乳化時(shí)間和乳化溫度的選擇

乳化時(shí)間和乳化溫度對(duì)乳化體系亦有較大的影響，分別對(duì)乳化溫度及乳化時(shí)間進(jìn)行的單因素考察。參照評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)優(yōu)選最佳乳化時(shí)間及溫度。

2.3 白及膠乳膏的制備及質(zhì)量評(píng)價(jià)

根據(jù)課題組前期研究，發(fā)現(xiàn)白及膠含量為5%時(shí)治療皮膚皸裂效果最好[9]，故最優(yōu)工藝為5%白及膠與空白基質(zhì)制備成白及膠乳膏劑。參照文獻(xiàn)[10]的方法，根據(jù)最優(yōu)工藝制備三批白及膠乳膏劑，對(duì)乳膏劑的外觀性狀、物理穩(wěn)定性進(jìn)行評(píng)價(jià)，并對(duì)其pH值進(jìn)行測(cè)定。

3 結(jié)果與分析

3.1 白及膠的最佳提取工藝確定

以水提次數(shù)(A)、水提料液比(B)、醇沉?xí)r醇的濃度(C)為影響因素，以白及膠得率為測(cè)定指標(biāo)，設(shè)計(jì)L9(34)正交優(yōu)化試驗(yàn)，優(yōu)選白及的提取工藝，正交實(shí)驗(yàn)因素水平見(jiàn)表3，正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4，方差分析結(jié)果見(jiàn)表5。

表3 正交試驗(yàn)因素水平

表4 白及提取正交試驗(yàn)結(jié)果

表5 方差結(jié)果分析

由表3和表4可知，影響白及膠得率的先后順序依次為A>B>C，即水提次數(shù)>水提料液比>醇沉濃度。其中，水提取次數(shù)和料液比有顯著影響，醇沉濃度也有一定影響，結(jié)合極差分析，最佳提取方案確定為A3B2C1，即加10倍量的水，提取3次，并用95%乙醇進(jìn)行醇沉。

3.2 單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

表6(續(xù))

由單因素實(shí)驗(yàn)可知，硬脂酸、蜂蠟、二甲基硅油、高級(jí)脂肪酸醇對(duì)乳膏穩(wěn)定性影響較大，硬脂酸的穩(wěn)定范圍為4%～6%，蜂蠟的穩(wěn)定范圍為3%～5%，二甲基硅油穩(wěn)定范圍為1%或3%，高級(jí)脂肪醇為1%～2%。

3.3 多因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果

對(duì)上述指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)分，結(jié)果見(jiàn)表7。

表7 綜合得分表

由表7中數(shù)據(jù)可知，油相的比例會(huì)對(duì)穩(wěn)定性的各指標(biāo)具有極大影響，尤其是硬脂酸、蜂蠟、高級(jí)脂肪醇和二甲基硅油的比例對(duì)乳膏劑的耐寒、耐熱、離心穩(wěn)定性影響較大，當(dāng)上述四者比例發(fā)生變化時(shí)，護(hù)手霜在耐寒、耐熱、離心方面的穩(wěn)定性也發(fā)生了較為明顯的變化。尤其在實(shí)驗(yàn)6～8中，不僅在穩(wěn)定性上出現(xiàn)了某方面或某幾方面明顯較差的情況，而且乳膏劑的其他性能也受到了不同程度的影響。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，白及乳膏劑的最佳油相基質(zhì)的組成為添加5%硬脂酸、1%高級(jí)脂肪醇、4%蜂蠟、1%二甲基硅油及1%棕櫚酸異丙酯；最佳水相基質(zhì)的組成為添加0.2%尼泊金乙酯、0.2%卡波姆、1%三乙醇胺及1%司盤(pán)-60。

3.4 乳化溫度及時(shí)間的篩選結(jié)果

將所述油相、水相混合后，在60～80℃下乳化5～25 min。根據(jù)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)優(yōu)選乳化溫度為80℃，乳化時(shí)間為15 min。故空白乳膏的最佳制備工藝為最佳油相組成與最佳水相組成混合，加入適量蒸餾水在80℃攪勻、乳化15 min。

3.5 白及膠乳膏劑的制備及質(zhì)量檢查的結(jié)果

制備的三批白及膠乳膏，呈現(xiàn)均勻的乳白色、細(xì)膩無(wú)顆粒感、涂展性良好，粘稠度良好，pH適宜，且耐熱、耐寒、離心穩(wěn)定性良好。結(jié)果見(jiàn)表8。

表8 外觀性狀、物理穩(wěn)定性及pH值測(cè)定結(jié)果

4 討論與結(jié)論

根據(jù)《中國(guó)藥典》對(duì)于乳膏劑的要求，達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)的乳膏劑需要滿足膏體均勻，細(xì)膩，應(yīng)具有適當(dāng)?shù)恼吵矶?，同時(shí)在穩(wěn)定性(耐熱、耐寒、離心考驗(yàn))等方面滿足要求。本研究發(fā)現(xiàn)，將硬脂酸、蜂蠟、二甲基硅油、高級(jí)脂肪醇以重量比為5∶4∶1∶1復(fù)配，可以達(dá)到很好的穩(wěn)定性。在添加劑可以進(jìn)一步改善乳膏劑的各方面性能考察時(shí)，僅添加氮酮或同時(shí)添加氮酮、羊毛脂、棕櫚酸異丙酯、甘油時(shí)，對(duì)乳膏劑的耐熱穩(wěn)定性較為不利。而相較于其他單一組分或復(fù)配添加劑，在僅使用棕櫚酸異丙酯時(shí)，對(duì)乳膏劑的各方面性能改善效果最好。三乙醇胺和司盤(pán)-60可以改善乳膏劑的乳化效果，且其合用比任一單用效果更好，尤其在重量比2∶1比例時(shí)，乳化效果最佳。相較于現(xiàn)有技術(shù)中的其他防腐劑(如苯甲酸)，尼泊金乙酯對(duì)乳膏劑的各方面性能無(wú)不利影響，同時(shí)具有很好的防腐效果。充分考察以上處方各組成因素特征后確定該工藝。制備工藝簡(jiǎn)單，質(zhì)量易控，可實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)，具有較大的經(jīng)濟(jì)效益。