反復(fù)呼吸道感染兒童的免疫狀態(tài)與維生素A/E缺乏情況▲

陳潔琳 覃 敏 楊曉祥 譚 杰 莫榮浩 龐夏玲 馮燕華 黃麗蓮 李英喬 江蕙蕓

(廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院/廣西壯族自治區(qū)兒童醫(yī)院1 呼吸內(nèi)科，2 兒童保健科，南寧市 530002，電子郵箱：313372046@qq.com)

反復(fù)呼吸道感染是兒童常見的呼吸道疾病，占我國兒科呼吸道疾病就診原因的10%～20%[1]，其發(fā)病率較高且有逐年上升的趨勢[2]。兒童呼吸道反復(fù)感染的原因除與兒童時期呼吸道特殊解剖結(jié)構(gòu)及生理功能有關(guān)外，可以還與營養(yǎng)狀況及免疫狀態(tài)有關(guān)。脂溶性維生素是人體代謝必不可少的營養(yǎng)素，其中維生素A、E對兒童的氣道發(fā)育、免疫系統(tǒng)、呼吸道感染等均有一定影響[3]。本研究分析反復(fù)呼吸道感染兒童的免疫狀態(tài)與維生素A、E缺乏情況，探討維生素A、E缺乏與兒童發(fā)生反復(fù)呼吸道感染的關(guān)系，為反復(fù)呼吸道感染兒童的治療及生活保健提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017年1月至2019年12月在我院就診的100例反復(fù)呼吸道感染患兒作為觀察組，其中87例有咳嗽表現(xiàn)，64例有喘息，47例有鼻塞、流涕。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡在6個月至14歲之間；(2)符合反復(fù)呼吸道感染診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，且兩次感染間隔時間大于7 d；(3)近1月內(nèi)未服用過維生素A、E制劑，未使用免疫球蛋白及激素等藥物。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并有其他先天性臟器發(fā)育畸形的患兒；合并免疫缺陷的患兒；早產(chǎn)兒；中重度營養(yǎng)不良、重度貧血的患兒；合并腫瘤、結(jié)核的患兒；有重大手術(shù)史的患兒。另外選取同期在門診進行體檢的80例兒童作為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡在6個月至14歲之間；(2)近1月內(nèi)無呼吸道感染癥狀，否認(rèn)合并其他系統(tǒng)感染；(3)近1個月內(nèi)未服用過維生素A、E制劑，未使用免疫球蛋白及激素等藥物。排除標(biāo)準(zhǔn)同觀察組。觀察組中男童65例、女童35例，年齡7個月至9歲7個月[1.96(1.81)歲]；對照組中男童49例、女童31例，年齡8個月至9歲5個月[2.10(1.57)歲]。兩組的年齡及性別差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。所有兒童家屬均對本研究知情并簽署知情同意書，本研究獲得醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 相關(guān)指標(biāo)的檢測方法 所有入組兒童均采集外周靜脈血2 mL，放置于普通生化管中，室溫避光保存，1 h后離心(3 500 r/min，10 min)，取上清液(至少300 μL)放置于干凈EP管中，4℃避光保存。使用安捷倫1290高效液相色譜儀(購自北京和合醫(yī)學(xué)診斷技術(shù)股份有限公司)，利用高效液相色譜法檢測維生素A、E含量；使用Cobas 8000全自動生化分析儀(購于上海羅氏公司)，利用免疫比濁法測定IgA、IgM、IgG水平；使用貝克曼FC500流式細(xì)胞分析儀，利用流式細(xì)胞技術(shù)測定T淋巴細(xì)胞亞群。

1.3 相關(guān)判斷標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 維生素A的分級標(biāo)準(zhǔn)[5]：0.3 mg/L≤血清維生素 A含量≤0.5 mg/L為正常；0.2 mg/L≤血清維生素A水平<0.3 mg/L為可疑亞臨床缺乏； 0.1 mg/L≤血清維生素A水平<0.2 mg/L為亞臨床缺乏；血清維生素A水平<0.1 mg/L，同時伴有干眼，為臨床型缺乏。本研究中的維生素A缺乏包括上述可疑亞臨床缺乏、亞臨床缺乏、臨床型缺乏3種類型。

1.3.2 維生素E的分級標(biāo)準(zhǔn)[5]：血清維生素E含量<5 mg/L為缺乏，5 mg/L≤維生素E含量≤7 mg/L為不足，7 mg/L<維生素E含量≤20 mg/L為正常，維生素E含量>20 mg/L為過量。本研究中的維生素E缺乏包含缺乏和不足。

1.3.3 細(xì)胞免疫功能異常：CD4+/CD8+<1.0提示細(xì)胞免疫抑制；我院檢驗科CD3+T淋巴細(xì)胞水平正常范圍為65%～79%，以<65%判定為CD3+T淋巴細(xì)胞下降。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 18.0軟件進行統(tǒng)計分析。符合正態(tài)分布的計量資料以(x±s)表示，組間比較采用兩獨立樣本t檢驗，如不服從正態(tài)分布則以M(Q)表示，組間比較采用秩和檢驗；計數(shù)資料以例數(shù)(構(gòu)成比)表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組血清維生素A、E含量和T淋巴細(xì)胞亞群及免疫球蛋白水平的比較 觀察組血清維生素A水平以及IgA、IgG、IgM、CD3+T淋巴細(xì)胞水平均低于對照組(均P<0.05)，而兩組血清維生素E含量、CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞水平、CD4+/CD8+比值比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。見表1。

表1 兩組兒童血清維生素A、E水平和T淋巴細(xì)胞亞群及免疫球蛋白水平的比較(x±s)

2.2 兩組維生素缺乏和細(xì)胞免疫功能異常的發(fā)生率的比較 觀察組維生素A缺乏、細(xì)胞免疫抑制、CD3+T淋巴細(xì)胞下降的發(fā)生率均高于對照組(均P<0.05)。見表2。

表2 兩組維生素缺乏及細(xì)胞免疫功能異常的發(fā)生率的比較[n(%)]

3 討 論

在機體的免疫功能中，T淋巴細(xì)胞及免疫球蛋白均對人體的免疫狀態(tài)具有重要影響，其中CD3+T淋巴細(xì)胞代表外周血成熟T細(xì)胞總數(shù)，其可以反映細(xì)胞免疫功能水平[6]；CD4+T淋巴細(xì)胞為輔助性T細(xì)胞(helper T cell,Th)，可分為Th1、Th2、Th17、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞等；在Th2的輔助作用下，B細(xì)胞合成并分泌免疫球蛋白及抗體，參與免疫應(yīng)答。CD4+/CD8+比值是反映機體免疫平衡狀態(tài)的指標(biāo)， 當(dāng)CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)值下降明顯大于CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)值時兩者比值<1.0，則提示機體處于免疫抑制狀態(tài)；當(dāng)CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)值下降時，其轉(zhuǎn)化為各亞型細(xì)胞可能會受阻，其中Th2受到影響時，會累及產(chǎn)生免疫球蛋白的B細(xì)胞，從而導(dǎo)致IgA、IgG、IgM水平降低。 本研究中，觀察組血清IgA、IgG、IgM、CD3+T淋巴細(xì)胞水平均低于對照組，細(xì)胞免疫抑制、CD3+T淋巴細(xì)胞下降的發(fā)生率均高于對照組(均P<0.05)，提示與普通兒童相比，反復(fù)呼吸道感染兒童存在免疫失衡，機體處于免疫抑制狀態(tài)更為常見。

維生素A在胚胎發(fā)育、視力、基因表達(dá)、生殖和免疫功能中都占據(jù)重要地位，通過補充維生素A可降低發(fā)展中國家嬰幼兒的死亡風(fēng)險[7]。國內(nèi)研究表明，維生素A缺乏與兒童反復(fù)呼吸道感染有相關(guān)性[8-9]。本研究中，觀察組血清維生素A水平低于對照組，且維生素A缺乏發(fā)生率高于對照組(P<0.05)，這提示維生素A缺乏可能與兒童反復(fù)呼吸道感染有關(guān)，與上述研究結(jié)果相似。結(jié)合維生素A在維持正常免疫功能中的作用，以及反復(fù)呼吸道感染兒童存在免疫失衡的情況，我們推測維生素A缺乏或可引起機體免疫功能異常，而這或為導(dǎo)致兒童發(fā)生反復(fù)呼吸道感染的可能機制之一。有學(xué)者也發(fā)現(xiàn)，補充維生素A可降低呼吸道感染率，并改善反復(fù)呼吸道感染兒童的免疫功能[10]。然而本研究未能進一步分析各分型Th變化與維生素A水平的關(guān)系，今后可通過分析維生素A的缺乏對Th分型的轉(zhuǎn)化有無影響，從而更進一步探討維生素A缺乏與免疫應(yīng)答的關(guān)聯(lián)點。

抗氧化是維生素E最具代表性的功能，其還通過參與紅細(xì)胞完整性的維持、血紅蛋白的合成，以及影響細(xì)胞因子的分泌及多種免疫細(xì)胞的增殖分化等，而參與免疫應(yīng)答[11]。本研究中，兩組兒童的維生素E含量及維生素E缺乏發(fā)生率差異并無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。分析原因主要為：維生素E缺乏的發(fā)生率在人工喂養(yǎng)的早產(chǎn)兒及低出生體重兒較高[11-12]；維生素E廣泛存在于自然界中，隨著攝入食物種類的豐富，維生素E缺乏率相對下降；本研究排除早產(chǎn)兒及營養(yǎng)不良等兒童，納入的研究對象為6月齡以上的兒童，而大于該年齡段兒童的膳食攝入種類較廣泛，故而對大部分出生發(fā)育正常兒童來說，維生素E缺乏較少見。今后在關(guān)于維生素E的研究中，建議放寬納入對象的年齡段，擴大樣本量，進一步研究維生素E攝入量與免疫功能的相關(guān)性。

綜上所述，反復(fù)呼吸道感染兒童血清維生素A水平降低且機體免疫狀態(tài)失衡，更易出現(xiàn)維生素A缺乏與免疫抑制；維生素A缺乏或通過影響機體的免疫狀態(tài)而導(dǎo)致反復(fù)呼吸道感染的發(fā)生。反復(fù)呼吸道感染為兒科常見的臨床現(xiàn)象，其在兒科門診就診原因中的占比逐漸增高。而根據(jù)世界衛(wèi)生組織提供的數(shù)據(jù)，全球5歲以下兒童中近30%的兒童存在維生素A缺乏[13]，而挑食及偏食使兒童更容易出現(xiàn)維生素A缺乏，其影響機體生長發(fā)育的同時可導(dǎo)致免疫功能下降，進而使機體陷入反復(fù)感染的循環(huán)中。由此可見，補充維生素A對于反復(fù)呼吸道感染兒童來說刻不容緩。