豬冷凍精液的生產(chǎn)制作與應(yīng)用
——生豬中小規(guī)模養(yǎng)殖實(shí)用技術(shù)大講堂直播實(shí)錄

文│北京田園奧瑞生物科技有限公司

2020年年初的新冠肺炎疫情，讓還沒有完全從非洲豬瘟疫情中恢復(fù)過來的中國(guó)養(yǎng)豬業(yè)又遭遇重創(chuàng)，物資運(yùn)輸、人員交流受限，很多工作難以開展，特別是對(duì)中小規(guī)模豬場(chǎng)影響較大。中小規(guī)模生豬養(yǎng)殖是我國(guó)生豬產(chǎn)業(yè)的重要組成部分，中小規(guī)模豬場(chǎng)的復(fù)養(yǎng)增養(yǎng)，既關(guān)系生豬生產(chǎn)恢復(fù)發(fā)展，又關(guān)系貧困地區(qū)通過發(fā)展生豬產(chǎn)業(yè)帶動(dòng)貧困群眾增收致富。當(dāng)前，中小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)戶迫切需要技術(shù)幫扶，提升生豬養(yǎng)殖水平和生產(chǎn)效率，提振復(fù)養(yǎng)增養(yǎng)信心。

為貫徹落實(shí)全國(guó)畜牧業(yè)工作會(huì)議和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部黨組會(huì)議精神，按照農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《加快生豬生產(chǎn)恢復(fù)發(fā)展三年行動(dòng)方案》安排部署，加強(qiáng)科技支撐與指導(dǎo)服務(wù)，進(jìn)一步提高中小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)戶生豬飼養(yǎng)管理水平和疫病防控水平，全國(guó)畜牧總站近期開展了“生豬中小規(guī)模養(yǎng)殖實(shí)用技術(shù)大講堂”（以下簡(jiǎn)稱“大講堂”）線上直播。大講堂結(jié)合中小規(guī)模豬場(chǎng)需求特點(diǎn)，授課專家全部來自生豬生產(chǎn)一線，授課內(nèi)容涉及生物安全防控管理、選種選配與公母豬飼養(yǎng)管理、增養(yǎng)復(fù)養(yǎng)案例介紹、豬場(chǎng)人員管理等。專家們用事實(shí)說話、用案例講解，突出了經(jīng)驗(yàn)、做法的可借鑒性，生動(dòng)且接地氣，受到了廣大生豬養(yǎng)殖場(chǎng)戶的一致好評(píng)。

2020年6月9日下午3點(diǎn)，大講堂第七期線上直播如期開始，全國(guó)畜牧總站邀請(qǐng)了北京田園奧瑞生物科技有限公司王相國(guó)就當(dāng)前熱門的“豬冷凍精液技術(shù)”展開詳細(xì)講解，引發(fā)了養(yǎng)豬界同仁強(qiáng)烈關(guān)注，在線觀看人數(shù)最高時(shí)達(dá)6萬余人。

一、豬冷凍精液的歷史與現(xiàn)狀

1.國(guó)外。18世紀(jì)七八十年代，意大利學(xué)者開始研究哺乳動(dòng)物的精液冷凍保存技術(shù)。1956年英國(guó)Ploge開始利用牛精液冷凍的方法進(jìn)行豬冷凍精液保存技術(shù)的研究，其解凍后的精子具有活力，但是缺乏授精能力。1976年P(guān)loge利用外科腹腔授精法將解凍后的精子直接注入輸卵管，獲得了83%的受精率，并且得到了凍精人工授精仔豬。1971年P(guān)ursel研究小組以常規(guī)的子宮頸輸精法得到仔豬，并用干冰制作顆粒凍精。1975年P(guān)ursel和Westendorf分別以顆粒狀和細(xì)管冷凍方法，成功冷凍并保存了種公豬的精液。1977—1979年，美國(guó)、瑞士、法國(guó)、匈牙利、西班牙利用凍精配種母豬達(dá)800～1000頭，英國(guó)、澳大利亞利用凍精配種母豬50～200頭。2002年，瑞典用5毫升平管冷凍豬精液并出口，凍后精子的質(zhì)膜完整率平均為60%，精子活力為49%～53%，受胎率達(dá)73%，平均窩產(chǎn)仔數(shù)達(dá)10.7頭。

2.國(guó)內(nèi)。我國(guó)從1950年開始對(duì)豬冷凍精液技術(shù)進(jìn)行探索。1975年在陜西省西安市草灘農(nóng)場(chǎng)試配了8頭母豬，其中4頭產(chǎn)仔，平均每窩產(chǎn)仔8.9頭。1975—1978年，全國(guó)范圍內(nèi)利用豬冷凍精液進(jìn)行人工授精累計(jì)配種母豬6079頭，情期受胎率為42.1%～61.3%。截止到1986年，全國(guó)范圍內(nèi)利用豬冷凍精液累計(jì)配種母豬6萬余頭，情期受胎率達(dá)到70%以上，至此之后豬冷凍精液一直沒有實(shí)現(xiàn)較大的技術(shù)突破。

豬冷凍精液技術(shù)的研究方興未艾。從2000年以來，西北農(nóng)林科技大學(xué)教授李青旺、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)教授黃瑞華、北京農(nóng)學(xué)院教授倪和民、重慶市畜牧科學(xué)院教授潘紅梅等科研院所團(tuán)隊(duì)持續(xù)進(jìn)行豬冷凍精液技術(shù)體系和試劑的研究，為我國(guó)培養(yǎng)了大量的豬冷凍精液方面的技術(shù)人才。

廣東溫氏食品集團(tuán)股份有限公司較早自建凍精實(shí)驗(yàn)室，四川天兆豬業(yè)股份有限公司、河南省鑫欣牧業(yè)有限公司等企業(yè)先后采用進(jìn)口豬冷凍精液進(jìn)行了育種工作。2016年，百鈞達(dá)科技發(fā)展（北京）有限公司發(fā)布其豬冷凍精液解凍后的活力能夠達(dá)到74%～87%，實(shí)現(xiàn)了“豬冷凍精液的技術(shù)突破”，并且率先進(jìn)行商品化生產(chǎn)和應(yīng)用。北京田園奧瑞生物科技有限公司與北京農(nóng)學(xué)院倪和民團(tuán)隊(duì)自主研發(fā)的凍精設(shè)備以及試劑相繼取得了成功，構(gòu)建了完善的精液冷凍保存技術(shù)體系，實(shí)現(xiàn)了80%以上的種公豬的冷凍精液在解凍后精子活力≥70%，為豬冷凍精液商品化推廣和應(yīng)用奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

近年來，上海祥欣畜禽有限公司、河南精旺豬種改良有限公司、湖北襄大實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司等種豬企業(yè)和大型養(yǎng)豬企業(yè)均開始自主生產(chǎn)應(yīng)用豬冷凍精液。2018年，上海祥欣畜禽有限公司將豬冷凍精液推廣至國(guó)內(nèi)16個(gè)省市，合計(jì)推廣銷售豬冷凍精液112440支，配種1萬余窩，平均受胎率達(dá)到85%左右，并首次將國(guó)產(chǎn)的豬冷凍精液出口遠(yuǎn)銷到俄羅斯。2018年，湖北襄大實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司先后采用豬冷凍精液配種4000余頭母豬，情期受胎率達(dá)到90%以上，產(chǎn)仔數(shù)達(dá)到12頭/窩，接近常溫精液繁殖水平。2019年10月，湖北襄大實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司建立了凍精實(shí)驗(yàn)室，并自主生產(chǎn)豬冷凍精液。

南京農(nóng)業(yè)大學(xué)黃瑞華團(tuán)隊(duì)與北京田園奧瑞生物科技有限公司合作建立了豬凍精實(shí)驗(yàn)室，開展地方品種豬冷凍精液研究，2019年搶救性地制作完成了金華兩頭烏豬、二花臉豬、蘇淮豬等十多個(gè)品種120多頭地方品種豬約4萬支合格的冷凍精液，為避免個(gè)別地方品種豬遭受非洲豬瘟疫情的滅頂之災(zāi)發(fā)揮了重要作用。貴州省納雍縣畜牧工作站2018年、2019年連續(xù)兩年舉辦豬冷凍精液技術(shù)講座，并引入河南精旺豬種改良有限公司優(yōu)秀的種公豬冷凍精液與當(dāng)?shù)氐胤狡贩N豬進(jìn)行雜交配種試驗(yàn)，成功受孕并產(chǎn)仔。使用豬冷凍精液較大地降低了市縣畜牧工作站的引種成本，同時(shí)也極大地減少了非洲豬瘟等疫情期間病毒傳播的風(fēng)險(xiǎn)。

二、豬冷凍精液的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)

豬冷凍精液技術(shù)是指利用液氮霧等作為冷卻源，將精液特殊處理后，保存在超低溫的液氮（-196℃）狀態(tài)下，達(dá)到長(zhǎng)期保存的一種技術(shù)。目前，豬的鮮精保存技術(shù)已經(jīng)廣泛地應(yīng)用到養(yǎng)豬生產(chǎn)實(shí)踐中，該項(xiàng)技術(shù)為豬冷凍精液技術(shù)推廣和應(yīng)用奠定了堅(jiān)實(shí)的前期基礎(chǔ)。

目前，我國(guó)生豬繁育依然以常溫精液輸精為主，占87%，冷凍精液使用率偏低，僅占0.83%。近年來，豬冷凍精液技術(shù)取得了突破性進(jìn)展，冷凍精液配套技術(shù)體系日趨完善，其推廣應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)大。

豬冷凍精液有其特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)，可以彌補(bǔ)常溫精液繁殖短板。首先，常溫精液在15～17℃的環(huán)境中只能保存5～10天，而且它會(huì)由于種公豬的飼養(yǎng)量以及疫情的影響造成大面積的供求差異。如果使用冷凍精液，就可以實(shí)現(xiàn)在液氮中長(zhǎng)期保存，而且沒有時(shí)間限制，精液解凍后的活力不會(huì)受到太大影響，同時(shí)還不受季節(jié)的影響，可有效平衡繁殖淡旺季的精液需求，保障母豬情期的受精。

使用常溫精液育種，會(huì)發(fā)生隨著優(yōu)秀種公豬繁殖能力下降和淘汰，育種水平也同時(shí)出現(xiàn)降低和停滯的現(xiàn)象，導(dǎo)致育種水平發(fā)展緩慢。如果使用冷凍精液，就可以持續(xù)高效地生產(chǎn)、保存、運(yùn)輸，充分挖掘優(yōu)良種豬的繁殖潛力，擴(kuò)大種公豬精液的覆蓋范圍?？捎行岣哂N水平以及優(yōu)秀種公豬利用率。

常溫精液在保存過程中容易受到不同的條件、氣溫、地域差異的影響。而冷凍精液在液氮中儲(chǔ)存，則避免了冷、熱應(yīng)激對(duì)精子的傷害且不受季節(jié)、交通等因素影響。

常溫精液在保存、運(yùn)輸過程中受到地域的限制，較大地限制了使用率。而如果使用冷凍精液，則可避免在保存、運(yùn)輸過程中所受的時(shí)間、地域以及季節(jié)的影響，可以抵達(dá)我國(guó)各個(gè)地域進(jìn)行使用。

在生豬養(yǎng)殖過程當(dāng)中，養(yǎng)殖場(chǎng)戶特別擔(dān)心疫病的問題，尤其是自非洲豬瘟疫情在我國(guó)發(fā)生以來，這種病毒可以伴隨著常溫精液輸精進(jìn)行傳播。如果使用冷凍精液，在種公豬的選擇、采精以及精液的制作過程和精液保存期間，會(huì)有多個(gè)檢測(cè)的窗口期，可以進(jìn)行多項(xiàng)安全性檢測(cè)以及遺傳性能的測(cè)定，充分隔絕疫病的傳播風(fēng)險(xiǎn)。

同時(shí)，使用常溫精液還有一個(gè)非常重要的因素，就是種公豬的飼養(yǎng)成本。一頭種公豬的飼養(yǎng)成本大約每年在1萬元左右，如果使用冷凍精液就可以較大地降低種公豬的飼養(yǎng)數(shù)量，擴(kuò)大種公豬的選擇基礎(chǔ)數(shù)量。隨著種公豬飼養(yǎng)群體數(shù)量的變小，更利于實(shí)現(xiàn)飼養(yǎng)管理精細(xì)化和疫病有效防控，降低種公豬引種和飼養(yǎng)管理成本，這對(duì)中小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)來說至關(guān)重要。

三、豬冷凍精液制作技術(shù)

豬冷凍精液制作需要一定的技術(shù)、設(shè)備和冷凍精液試劑，同時(shí)還要按照一定的操作流程來實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期保存。在豬冷凍精液的生產(chǎn)制作過程中，采精、預(yù)稀釋、離心、稀釋平衡、灌裝、冷凍和保存等各個(gè)關(guān)鍵步驟都有其操作規(guī)范。

1.主要儀器設(shè)備。

（1）精子質(zhì)量分析系統(tǒng)。用于檢測(cè)分析精液質(zhì)量，包含精子密度、精子活力、精子畸形率等，評(píng)估精子質(zhì)量是否達(dá)到制作冷凍精液標(biāo)準(zhǔn)，以及冷凍后的精液質(zhì)量是否達(dá)到繁殖配種要求。

（2）離心機(jī)。用于分離精液中的精子和精清，以達(dá)到冷凍精液所需要的密度。由于豬的精液量比較多，建議使用豬精液專用大容量離心機(jī)。

（4）細(xì)管灌裝機(jī)。用于把精液灌裝于0.5毫升細(xì)管內(nèi)，通常為全自動(dòng)細(xì)管灌裝封口一體機(jī)（圖1）。

（5）細(xì)管噴碼機(jī)。用于精液細(xì)管噴碼，標(biāo)記豬冷凍精液的相關(guān)品種、來源和生產(chǎn)日期等商品參數(shù)。

（6）程控冷凍儀。用于設(shè)置降溫溫度、速度、時(shí)間等程序，精準(zhǔn)控制降溫速率，最大程度保護(hù)精子在冷凍過程中免受損傷。

2.豬凍精試劑。豬冷凍精液質(zhì)量的好與壞，豬凍精試劑的配置是非常重要的一個(gè)因素。凍精試劑一般包含預(yù)稀釋劑、冷藏保護(hù)劑（通常稱為Ⅰ液）、冷凍保護(hù)劑（通常稱為Ⅱ液）和解凍劑四大組成部分。以TYP-5田園奧瑞豬凍精試劑為例，TYP-5田園奧瑞豬凍精試劑含有5組成分，分別是：試劑A-預(yù)稀釋劑、試劑B-基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)液、試劑C-冷凍輔助劑I、試劑D-冷凍輔助劑II、試劑E-解凍劑。配制使用方法如下。

（1）預(yù)稀釋劑。使用試劑A-預(yù)稀釋劑溶于1升雙蒸水中，預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?。種公豬精液采集完之后，按照1∶1的比例進(jìn)行預(yù)稀釋，為精子的儲(chǔ)能做準(zhǔn)備。

（2）冷藏保護(hù)劑（Ⅰ液）：將試劑B-基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)液用400毫升雙蒸水進(jìn)行充分的溶解，按照4∶1的比例加入蛋黃，制作成冷藏保護(hù)劑（Ⅰ液），放置在17℃恒溫冰箱備用。

在梁體混凝土澆筑過程中，現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)員除按規(guī)范要求的取樣頻次隨機(jī)對(duì)混凝土進(jìn)行取樣外，還應(yīng)根據(jù)情況至少多取5～10組同條件養(yǎng)護(hù)抗壓試件，將試件放置在構(gòu)件上或旁邊隨構(gòu)件一起養(yǎng)護(hù)并逐日記錄同條件養(yǎng)護(hù)溫度；混凝土澆筑完成一天后每隔12h取一組同條件養(yǎng)護(hù)試件在商品混凝土公司試驗(yàn)室進(jìn)行試壓，測(cè)出的混凝土強(qiáng)度滿足張拉或拆模要求后再送檢測(cè)機(jī)構(gòu)檢測(cè)并及時(shí)取得檢測(cè)報(bào)告，根據(jù)檢測(cè)報(bào)告的結(jié)果決定拆?；蜻M(jìn)行預(yù)應(yīng)力張拉壓漿，全部工序完成并經(jīng)驗(yàn)收后再進(jìn)行下一節(jié)段的施工。

（3）冷凍保護(hù)劑（Ⅱ液）：將試劑C-冷凍輔助劑I、試劑D-冷凍輔助劑II分別加入276毫升冷藏保護(hù)劑（Ⅰ液），制成冷凍保護(hù)劑（Ⅱ液），放置在4℃恒溫冰箱備用。

（4）解凍劑：使用試劑E-解凍劑1克，溶于20毫升雙蒸水中，4℃?zhèn)溆谩?/p>

3.豬冷凍精液生產(chǎn)制作操作流程。豬冷凍精液生產(chǎn)制作幾個(gè)關(guān)鍵的步驟包括：精液采集、精液質(zhì)量分析檢測(cè)、精液預(yù)稀釋、17℃平衡、精液離心、4℃平衡，然后加入冷凍保護(hù)劑灌裝封口進(jìn)行冷凍和保存。保存前需要進(jìn)行冷凍精液的質(zhì)量檢測(cè)。

（1）精液采集。首先，按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)選擇經(jīng)過鑒定并列入正式名錄的種公豬。在精液采集過程中要佩戴一次性手套，并采集富含精子的射精中段部分75～125毫升，前后兩段的精液部分應(yīng)舍棄。整個(gè)采集過程要規(guī)范操作，采精頻率要合理，同時(shí)要避免更換采精員，確保精液品質(zhì)優(yōu)良。

（2）精液質(zhì)量檢測(cè)。對(duì)采集到的精液首先要進(jìn)行精液質(zhì)量檢測(cè)，包括精子的活力、精子的密度以及精子畸形率等。對(duì)于制作冷凍精液的精液質(zhì)量要求要比常規(guī)的精液質(zhì)量要求略高，要求精子的活力≥80%、精子密度≥1億/毫升、精子畸形率≤10%。

（3）精液預(yù)稀釋。精液采集完成后，經(jīng)過質(zhì)量檢驗(yàn)合格適宜進(jìn)行冷凍的精液，使用經(jīng)過預(yù)熱的預(yù)稀釋液（35℃）與精液按照1∶1的比例進(jìn)行稀釋混合搖勻。在混合之前要先做測(cè)溫，精液與預(yù)稀釋液溫度差異不能超過1℃。預(yù)稀釋后的精液在室溫（25℃）環(huán)境下靜置約1小時(shí)，以避免精子快速降溫導(dǎo)致?lián)p傷。精液預(yù)稀釋過程大部分是在豬場(chǎng)進(jìn)行，精液采集并完成預(yù)稀釋后，應(yīng)盡快用泡沫箱將精液運(yùn)送到凍精實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行后期處理。

（4）17℃平衡。預(yù)稀釋的精液在室溫環(huán)境下靜置1小時(shí)后，要轉(zhuǎn)入到17℃恒溫冰箱中進(jìn)行平衡降溫，平衡時(shí)間2～3個(gè)小時(shí)，最長(zhǎng)不超過24個(gè)小時(shí)。如果有平衡儀，精液稀釋后可直接放入準(zhǔn)備好的平衡儀里進(jìn)行降溫，按照設(shè)置好的曲線從精液當(dāng)前溫度（34℃）平衡到17℃。

（5）精液離心。精液離心之前的準(zhǔn)備工作：首先對(duì)離心瓶稱重并記錄數(shù)據(jù)為W0，然后把離心瓶進(jìn)行17℃預(yù)冷。精液經(jīng)過17℃平衡2～3小時(shí)后，再裝入已經(jīng)預(yù)冷好的離心瓶進(jìn)行稱重配平，17℃條件下800克離心10分鐘。離心完畢，將離心瓶從離心機(jī)中取出，用精液抽吸泵祛除上清液。抽吸祛除完上清液，對(duì)裝有沉淀精子的離心瓶稱重，記錄數(shù)據(jù)為W1，減去原來空離心瓶的質(zhì)量W0，得出精液的體積并記錄數(shù)據(jù)為V1。

（6）4℃平衡。將預(yù)冷至17℃的冷藏保護(hù)劑（Ⅰ液）加注到離心之后的精子進(jìn)行重懸。加Ⅰ液的體積，要根據(jù)采精時(shí)測(cè)算的總精子數(shù)和所要做成的每支細(xì)管的目標(biāo)精子數(shù)進(jìn)行計(jì)算，其公式為：V2＝總精子數(shù)（億）/目標(biāo)精子數(shù)（億/毫升）－V1（毫升）。加完Ⅰ液之后，把精液放入有水（17℃）的燒杯中，再與燒杯一起置入4℃恒溫冰箱降溫平衡2.5～3小時(shí)至4～5℃，有程控平衡儀的放程控平衡儀降溫，降溫到4～5℃后繼續(xù)平衡0.5～1個(gè)小時(shí)。

（7）細(xì)管灌裝。精液在4℃平衡后，加入冷凍保護(hù)劑（II液），稀釋一倍，其體積V3＝V1＋V2，達(dá)到分裝的精子密度10億/毫升。加入II液稀釋混勻后，立即在低溫操作柜中進(jìn)行0.5毫升細(xì)管灌裝，細(xì)管噴碼要準(zhǔn)確標(biāo)記精液的品種、來源豬場(chǎng)、公豬耳號(hào)、生產(chǎn)日期等信息。灌裝完成后，按不同豬號(hào)分類碼放在細(xì)管托架。

（8）精液冷凍。精液在冷凍前要全面檢查液氮增壓罐和程控冷凍儀運(yùn)行情況，確保液氮充足、壓力正常，然后設(shè)置或調(diào)用豬冷凍精液專用冷凍降溫曲線，參考曲線為：

在精液灌裝的同時(shí)要開啟程序冷凍儀，將冷凍室溫度降到初始溫度4～5℃。待冷凍儀溫度穩(wěn)定在初始溫度后，再打開冷凍室蓋子，迅速將碼好的冷凍精液細(xì)管托架放入冷凍腔室中，開始冷凍程序。待冷凍曲線走完后，將冷凍精液細(xì)管托架迅速取出放入裝有液氮的泡沫箱中，液氮深度至少浸沒所有細(xì)管。注意，不同豬號(hào)的凍精，要放入不同的泡沫箱，以避免混淆。一般公豬一次采精量可制作0.5毫升細(xì)管的冷凍精液100余支，常用的程控冷凍儀一般每批次可冷凍1000支左右，如果緊接著進(jìn)行第二批次冷凍，必須把程控冷凍儀腔室烘干，并再次檢查增壓罐里的液氮是否充足。

（9）凍精檢測(cè)。豬冷凍精液在凍存前需要進(jìn)行解凍檢測(cè)，確保冷凍精液的質(zhì)量達(dá)到保存要求。常用的解凍方式為50℃的水溫中解凍16秒，解凍后加入預(yù)熱至37℃的解凍劑中，搖勻后取中段精液進(jìn)行觀察檢測(cè)。要求解凍后精子活力≥60%，精子畸形率≤20%。

（10）凍精保存。解凍檢測(cè)合格的豬冷凍精液需分裝到無菌紗布袋種，并核對(duì)冷凍精液細(xì)管標(biāo)記信息，同一個(gè)紗布袋不能混裝不同豬號(hào)的冷凍精液。分裝完成后，要給每一個(gè)紗布袋做好標(biāo)簽標(biāo)記。液氮罐里的豬冷凍精液紗布袋應(yīng)完全浸沒在液氮中，并定期檢查液氮罐保存情況，適時(shí)加注液氮。

四、豬冷凍精液的應(yīng)用

1.解凍與輸精。

（1）設(shè)備試劑準(zhǔn)備。準(zhǔn)備兩個(gè)水浴鍋預(yù)熱，50℃用于解凍、30℃用于預(yù)熱解凍劑。解凍劑配制好后充分混勻，再分裝到輸精瓶中預(yù)熱至32℃?zhèn)溆谩?/p>

（2）根據(jù)豬場(chǎng)發(fā)情母豬的數(shù)量和配種的需求量，從液氮中快速取出所需要凍精的品種和數(shù)量，在空氣中停留不超過5秒，然后快速移入50℃水浴鍋中解凍16秒，解凍取出后迅速擦干凍精細(xì)管上粘留的水分。

（3）將解凍好的精液兩端剪掉，注入到提前預(yù)熱的輸精瓶中，輕輕地上下?lián)u晃至少兩次，充分混勻，不留沉淀，以備輸精。

（4）解凍好的冷凍精液要在30分鐘內(nèi)進(jìn)行子宮深部輸精，建議一個(gè)輸精劑量有效精子總數(shù)不低于同等條件下的常溫精液。

2.冷凍精液在中小規(guī)模豬場(chǎng)中的應(yīng)用。中小規(guī)模生豬養(yǎng)殖是我國(guó)生豬產(chǎn)業(yè)的重要組成部分，但在實(shí)際生產(chǎn)實(shí)踐中面臨較多問題：如自己育種不現(xiàn)實(shí)，引種麻煩；種公豬引種昂貴；種公豬圈舍建設(shè)、飼喂、管理成本較高；頻繁進(jìn)出豬場(chǎng)帶來了生物安全隱患。

應(yīng)用豬冷凍精液可以解決以上的問題。從降本增效上來講，可以有效提高種公豬的利用率，降低引種和飼養(yǎng)管理成本，提高生產(chǎn)效率；從使用的范圍上來說，由于冷凍精液的運(yùn)輸較為方便，同時(shí)不受地域、季節(jié)、交通等因素的限制，可以擴(kuò)大優(yōu)秀種公豬的使用范圍；使用豬冷凍精液還可以解決優(yōu)良種公豬的衰老、淘汰所導(dǎo)致的育種強(qiáng)度的緩慢和停滯，使優(yōu)良基因的選擇更多元化，育種強(qiáng)度更高；豬冷凍精液購(gòu)買后可隨時(shí)解凍、隨時(shí)使用，以平衡供需不同步的矛盾；豬冷凍精液在種公豬選擇、精液制作過程以及保存期間會(huì)有多個(gè)檢測(cè)窗口，可有效減少疫病傳播的風(fēng)險(xiǎn)。

3.展望。目前，豬發(fā)情鑒定和深部輸精等人工授精配套技術(shù)體系日趨完善，在保證受胎率和產(chǎn)仔數(shù)量的前提下，使用豬冷凍精液一次輸精量有望減少到10億～15億/次，甚至減少到4億～8億/次，進(jìn)一步提高優(yōu)秀種公豬的使用效率，減少種公豬的飼養(yǎng)數(shù)量和管理成本。

豬冷凍精液使用方便、經(jīng)濟(jì)高效，未來將進(jìn)一步得到推廣和普及，現(xiàn)如今牛冷凍精液的景象，就是豬冷凍精液的明天！