山西地區(qū)2017年手足口病住院患者病原學(xué)分析

周向紅,賈辰亮,黃 瑞,朱 鐳

(山西省兒童醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心,太原 030013;*通訊作者,E-mail:zhlrm@sina.com)

手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)由腸道病毒引起,多發(fā)生于5歲以下的嬰幼兒,臨床表現(xiàn)主要為發(fā)熱,手、足以及口腔黏膜等部位出現(xiàn)斑丘疹或皰疹,少數(shù)患兒可引發(fā)腦膜炎、腦炎、腦脊髓炎、肺水腫等嚴(yán)重并發(fā)癥[1],個別重癥患兒病情進(jìn)展迅速,可以導(dǎo)致死亡。該病傳染性強(qiáng),傳播途徑復(fù)雜,在短時間內(nèi)可發(fā)生大規(guī)模暴發(fā),是全球廣泛流行的傳染病,尤其是在亞太地區(qū)。近年來,在中國大陸也頻繁發(fā)生區(qū)域性爆發(fā)[2,3]。研究顯示,在2013年以前,中國大部分地區(qū)的手足口病病原體以EV71病毒和CAl6病毒為主[4]。但近幾年來,非EV71和非CAl6病毒感染相關(guān)手足口病例逐漸增多,如CA6型和CA10型病毒已成為國內(nèi)手足口病感染的優(yōu)勢株。手足口病嚴(yán)重危害著公眾的健康,僅2019年1年間,全國就報(bào)告了手足口病1 918 830例,死亡20例[5]。因此,掌握手足口病在全國各地區(qū)流行的病原特征和分布情況十分必要,以便采取適當(dāng)?shù)拇胧?更好地控制該病的流行。山西省兒童醫(yī)院消化隔離科是全省最大的手足口病診治中心,本研究對2017年1月至12月該中心的手足口病住院患者進(jìn)行了病原學(xué)檢測和流行病學(xué)分析,以了解山西地區(qū)手足口病患兒的感染情況。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本采集

收集2017年1月至12月山西省兒童醫(yī)院消化隔離科收治的956例HFMD住院患兒的咽拭子標(biāo)本,診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《手足口病診療指南(2013年版)》。其中男564例(59.0%),女392例(41.0%),男女比例為1.44 ∶1;患兒年齡從45 d到15歲,發(fā)病年齡主要集中在1-3歲(729例,占76.26%)。采集患兒發(fā)病3 d內(nèi)的咽拭子標(biāo)本,立即放入裝有病毒保存液的采樣管中保存送檢。

1.2 腸道病毒分型檢測

首先用默樂生物科技股份有限公司的病毒DNA/RNA核酸提取試劑盒提取咽拭子樣本中的病毒RNA,之后用美國ABI-7500型熒光定量PCR儀和默樂公司的EV71、CA16及通用型腸道病毒核酸檢測試劑盒進(jìn)行熒光定量RT-PCR反應(yīng),該試劑盒能分型鑒定出腸道病毒通用型、EV71和CA16。嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作,反應(yīng)條件為45 ℃ 15 min,1個循環(huán);95 ℃ 2 min,1個循環(huán);94 ℃ 10 s,58 ℃ 40 s,40個循環(huán)。

1.3 結(jié)果判定

EV通用型和EV71型檢測陽性標(biāo)本判為EV71型;EV通用型和CA16型檢測陽性標(biāo)本判為CA16型;EV通用型陽性,而EV71型、CA16型均為陰性的標(biāo)本則判為非EV71非CA16型。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

分別統(tǒng)計(jì)不同年齡、性別和不同月份間各種腸道病毒型陽性例數(shù)并進(jìn)行比較。用SPSS13.0軟件進(jìn)行分析,組間比較采用卡方檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 熒光定量PCR法檢測腸道病毒核酸結(jié)果

2017年住院的956例手足口病患兒中,共檢測出腸道病毒陽性812例,總陽性率為84.94%,其中EV71陽性349例(36.51%)、CAl6陽性49例(5.13%)、非EV71非CA16腸道病毒陽性414例(43.31%)。手足口病病原以非EV71非CA16腸道病毒和EV71為主,占檢測陽性病例的93.97%。

2.2 手足口病流行時間分布

2017年全年每個月都有手足口病患兒入院治療,從4月份開始患兒明顯增多,主要集中在6-8月,6月達(dá)到最高峰,9月和10月迅速減少,并于11月反彈產(chǎn)生一個次高峰。2017年不同月份手足口病流行趨勢見圖1。

圖1 2017年12個月手足口病流行趨勢Figure 1 Epidemic trend of HFMD from January 2017 to December 2017

從病原體的檢出情況來看,CA16、非EV71非CA16腸道病毒和EV71在不同月份陽性檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=113.82,P<0.05,見表1)。非EV71非CA16腸道病毒陽性率分布與手足口病流行趨勢相一致,在6月最高,達(dá)到了64.71%,而同期CAl6病毒陽性率則遠(yuǎn)低于此,只有3.43%;到10月和12月,隨著手足口病流行高峰結(jié)束,非EV71非CA16腸道病毒陽性率迅速降低,和EV71持平,這提示非EV71非CA16腸道病毒感染與手足口病的爆發(fā)強(qiáng)度相關(guān)。結(jié)果還顯示,各月份腸道病毒陽性檢出率中,非EV71非CA16腸道病毒和EV71陽性率較高,CA16病毒陽性率最低,說明2017年山西地區(qū)手足口病以非EV71非CA16腸道病毒和EV71感染為主。

表1 2017年不同月份手足口病病原學(xué)分布特征 例(%)

2.3 手足口病流行人群分布

956例手足口病患兒中,男564例(占59.0%),

女392例(占41.0%),男女比例為1.44 ∶1。發(fā)病年齡最大的15歲,最小的兩個月。不同年齡組間手足口病病原分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=85.93,P<0.05,見表2)。病例主要集中在3歲以下年齡組(541例,占56.59%),其中1歲組發(fā)病數(shù)最多,為280例,占29.29%。812例確診腸道病毒陽性感染病例中,男485例(占59.73%),女327例(占40.27%),男女比例為1.48 ∶1。其中0-1歲患兒73例,占8.99%,1-3歲患兒最多,達(dá)550例(占67.73%)。結(jié)果提示1-3歲兒童為最易感人群。不同性別患兒間腸道病毒EV7l、CAl6及非EV71非CA16腸道病毒的陽性檢出率差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.58,P>0.05,見表3)。

表2 不同年齡組手足口病病原學(xué)分布 例(%)

表3 不同性別手足口病病原學(xué)分布 例(%)

3 討論

手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)是全球性的傳染病,在很多國家和地區(qū)都引起過爆發(fā)流行,且有大量致死病例。近幾年來,越來越多的研究顯示,非EV7l非CAl6腸道病毒陽性率和EV71持平甚至超過了EV71[6,7]。手足口病原體的不同毒株所引起的臨床癥狀差別不明顯。如EV71和CAl6病毒在基因序列上非常接近,且引起的HFMD臨床癥狀相似,難以區(qū)分,但由EV7l引起的HFMD會進(jìn)一步發(fā)展為無菌性腦膜炎、重癥腦膜炎,甚至死亡[8]。因此對引起HFMD的主要病原進(jìn)行快速診斷極為重要。

在本研究中,為了解山西地區(qū)HFMD的病原分布情況,協(xié)助臨床及時地診斷和治療,我們利用實(shí)時熒光PCR技術(shù)對2017年間到本院就診的HFMD患兒的咽拭子標(biāo)本進(jìn)行腸道病毒屬、EV71型和CAl6檢測。結(jié)果顯示2017年山西地區(qū)引起HFMD的主要病原有非EV7l非CAl6腸道病毒和EV71,二者共占腸道病毒陽性的93.97%,其中又以非EV7l非CAl6腸道病毒為主,占50.99%,EV71陽性349例,占42.98%,并有小部分CA16病毒感染,沒有發(fā)現(xiàn)混合感染情況。該結(jié)果與白江濤等[9]的研究結(jié)果相似。

研究發(fā)現(xiàn)山西地區(qū)2017年自4月開始出現(xiàn)病例,主要集中在6-8月,6月份為最高峰,9月和10月迅速減少,但流行持續(xù)時間長,到12月份仍有病例發(fā)生。在956例手足口病患兒中,男孩手足口病的發(fā)病率略高于女孩,可能與男孩喜好運(yùn)動、接觸密切頻繁、相互傳染的機(jī)會大有關(guān)?？ǚ綑z驗(yàn)結(jié)果顯示不同性別與EV71所致的手足口病之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián),說明男孩不是重癥手足口病的危險(xiǎn)因素。年齡分布主要集中在1-3歲的嬰幼兒,占全年發(fā)病總數(shù)的67.73%,與華北一些地區(qū)調(diào)查結(jié)果相同[10],主要原因可能為該年齡段兒童抵抗力低、易引起交叉感染,隨著兒童年齡的增長,逐漸受到腸道病毒隱性感染,而獲得自然免疫。

本研究對手足口病病例的調(diào)查分析發(fā)現(xiàn),山西地區(qū)手足口病病例的病原以非EV7l非CAl6腸道病毒和EV71為主,臨床需要加強(qiáng)對手足口病的實(shí)驗(yàn)室檢測,為手足口病的預(yù)防及控制提供保證。