MP-DNA 檢測(cè)對(duì)兒童EB 病毒相關(guān)傳染性單核細(xì)胞增多癥患者是否合并肺炎支原體感染的診斷價(jià)值分析

王麗瓊

（杭州市兒童醫(yī)院 浙江 杭州 310014）

傳染性單核細(xì)胞增多癥（Infectious Mononucleosis,IM）是常見于兒童的主要由EB 病毒（EBV）病毒感染誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增生性的急性感染性疾病，是以侵犯淋巴系統(tǒng)為主的急性感染性疾病，血液中可出現(xiàn)大量異常形態(tài)淋巴細(xì)胞。典型臨床表現(xiàn)有發(fā)熱、咽峽炎、淋巴結(jié)腫大、肝脾腫大及皮疹，部分不典型患兒可僅表現(xiàn)其中幾項(xiàng)，部分患兒有肝功能損傷[1]。肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae，MP）是兒童呼吸道感染最常見的病原之一[2]。近年來有文獻(xiàn)報(bào)道，兩種病原體的感染率有逐漸增加的趨勢(shì)，常存在混合性感染[3-4]。因EBV 和MP 感染后可導(dǎo)致多臟器損傷，臨床表現(xiàn)多樣，目前實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)是診斷兩者混合感染及鑒別的重要參考。既往報(bào)道中對(duì)判斷IM 患兒是否合并MP 混合感染多以MP 抗體檢測(cè)為依據(jù)，但筆者在工作中發(fā)現(xiàn)近年來IM 患兒中MP 抗體陽性檢出率較高，單純以MP 抗體檢測(cè)結(jié)果作為參考依據(jù)可能導(dǎo)致混合感染誤診及過度治療。本研究旨在探討MP-PCR 檢測(cè)在兒童EB 病毒相關(guān)IM 患兒中的臨床應(yīng)用，比較IM 患兒的MP抗體檢測(cè)與MP-DNA 檢測(cè)結(jié)果，以期為IM 患兒的混合感染狀態(tài)的判斷及為抗感染方案的合理制定提供一定的參考。

1.資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析我院2019 年1—12 月收治的112 例EB 病毒相關(guān)IM 的患兒臨床資料。其中男67 例，女57 例；年齡1 ～11 歲（中位數(shù)5.5 歲）。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)

符合EB 相關(guān)性IM 的診斷標(biāo)準(zhǔn)：（1）具備下列臨床表現(xiàn)中的3 項(xiàng)以上：①發(fā)熱，②咽扁桃體炎，③頸淋巴結(jié)腫大，④肝臟腫大，⑤脾臟腫大，眼瞼水腫。（2）外周血異型淋巴細(xì)胞比例＞0.10 和（或）淋巴細(xì)胞增多≥5.0×109/L。（3）下列實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)中的任意1 項(xiàng)：①抗EBV-VCA-IgM 和抗EBV—VCAIgG 抗體陽性，且抗EBV-NA—IgG 陰性；②抗EBV-VCA-IgM 陰性，但抗EBV-VCA-IgG 抗體陽性，且為低親和力抗體；③雙份血清抗EBV-VCA-IgG 抗體滴度4 倍以上升高[5]。

1.3 實(shí)驗(yàn)室方法

用滅菌棉簽采集受試者咽部樣本行MP-DNA 檢測(cè)，采用MPPCR 法，試劑盒選自達(dá)安基因檢測(cè)公司。同時(shí)采集患兒靜脈全血，常規(guī)分離血清后進(jìn)行肺炎支原體抗體（MP-IgM）測(cè)定，采用酶聯(lián)免疫吸附法，試劑盒為EUROIMMUN，操作方法均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4 觀察指標(biāo)

記錄MP 抗體、MP-DNA 的檢測(cè)結(jié)果，并對(duì)其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析處理，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

EB 病毒相關(guān)IM 患兒的MP 抗體檢出率較高，為48.21%，MP-DNA 檢出率2.68%,兩種方法在IM 患者中檢出率有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），見表1。

表1 兩種MP 檢測(cè)方式在IM 患兒中的檢出率比較

3.討論

兒童傳染性單核細(xì)胞增多癥（IM）的臨床表現(xiàn)多樣，3 ～6 歲年齡兒童是高發(fā)人群[6]，臨床過程也不盡相同，部分患兒可呈自限性疾病過程，僅需要對(duì)癥支持治療，部分患兒可呈進(jìn)展性疾病過程，甚至進(jìn)展為嗜血細(xì)胞增多癥危及生命[7]。EB 病毒是引起IM 的重要病原，但巨細(xì)胞病毒、腺病毒、細(xì)小病毒及MP 感染亦可誘發(fā)IM 樣表現(xiàn)。臨床治療的抗感染方案需根據(jù)不同病原個(gè)體化合理制定，故準(zhǔn)確判斷病原及是否存在混合感染意義重大。近年來關(guān)于EBV 與MP 混合感染的文獻(xiàn)報(bào)道不斷增多，提示混合感染對(duì)病情進(jìn)展的影響[8]。肺炎支原體是兒童呼吸道常見的感染病原體之一，其侵入人體呼吸道后黏附于上皮細(xì)胞而造成黏膜上皮細(xì)胞破壞，除肺部感染表現(xiàn)外，可出現(xiàn)多器官損害。兒童MP 感染及IM 臨床表現(xiàn)多樣，因此實(shí)驗(yàn)室病原學(xué)診斷對(duì)于臨床治療起著重要作用。

痰液或咽拭洗液進(jìn)行MP 培養(yǎng)被認(rèn)為是MP 感染診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但常需要2 ～3 周對(duì)臨床幫助不大[9]。隨著檢測(cè)手段進(jìn)步，MP 抗體血清學(xué)檢測(cè)、MP-PCR 檢測(cè)等方法被廣泛應(yīng)用?，F(xiàn)有報(bào)道中關(guān)于E B V 與M P 混合感染的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)多以M P 抗體檢測(cè)結(jié)果為依據(jù)，但由于M P 與人體多種組織細(xì)胞膜及某些細(xì)菌、其他支原體有相同的糖脂成分,易引起非特異性交叉反應(yīng),加上抗體出現(xiàn)的時(shí)機(jī)易受機(jī)體免疫條件、年齡和反復(fù)感染等因素的影響不易掌握,可導(dǎo)致M P 感染的過度診斷或漏診,因此不能僅靠單份血清陽性即確診M P 感染[10]。在臨床工作中觀察到I M 患兒常檢測(cè)到多種病原抗體陽性，可能與患兒免疫狀態(tài)被激活，產(chǎn)生多種非特異性抗體甚至自身抗體，影響血清學(xué)檢測(cè)有關(guān)。本結(jié)果顯示，在112 例E B 病毒相關(guān)I M 的患兒中，54 例M P 抗體陽性，檢測(cè)陽性率較高。但M PPCR 感染檢出率僅2.68%，二者具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。同時(shí)參照李少麗等[10]對(duì)M P 檢測(cè)方法的對(duì)比研究，I M 患兒中M P 抗體陽性率明顯升高。除上述機(jī)體免疫狀態(tài)、抗體交叉反應(yīng)等原因外，分析其可能與近年來M P 感染率升高，M P 感染后抗體在體內(nèi)持續(xù)存在有一定關(guān)系。另結(jié)合臨床治療轉(zhuǎn)歸，對(duì)于MP-IgM 陽性但MP-DNA 陰性IM 患兒，予單純抗病毒或者對(duì)癥治療臨床癥狀亦好轉(zhuǎn)，提示對(duì)I M 患兒如將M P 抗體檢測(cè)作為單一標(biāo)準(zhǔn)來判斷是否存在混合感染，可能導(dǎo)致陽性率過高造成過度治療。M P-P C R 檢測(cè)方法特異性、靈敏度較高，可作為判斷I M患兒是否混合MP 感染的參考依據(jù)。

綜上所述，臨床上對(duì)于傳染性細(xì)胞增多癥是否存在混合肺炎支原體感染可根據(jù)支原體抗體檢測(cè)聯(lián)合肺炎支原體PCR 檢測(cè)結(jié)果，同時(shí)結(jié)合臨床表現(xiàn)綜合判斷，以合理制定抗感染治療方案。