惠州市門(mén)診流感患者病毒抗原流行特征分析*

張衛(wèi)平， 鄧慧怡， 周仕丹， 彭莉利， 劉春來(lái)

惠州市中心人民醫(yī)院醫(yī)院感染管理部(廣東惠州 516001)

流行性感冒簡(jiǎn)稱(chēng)流感，是由流感病毒引起的傳染性強(qiáng)、蔓延快的急性呼吸道傳染病，通過(guò)飛沫、氣溶膠等空氣途徑進(jìn)行傳播[1]，潛伏期短，發(fā)病率高，是首個(gè)全球監(jiān)測(cè)的傳染性疾病[2]，屬我國(guó)法定丙類(lèi)傳染病[3]?；颊咭晕泛?、高熱、頭疼、全身酸痛、乏力和呼吸道癥狀為主[4]，人群普遍易感，尤其是兒童、老年人及機(jī)體免疫力低下的人有較高的發(fā)病率及致死率,部分因出現(xiàn)肺炎等并發(fā)癥導(dǎo)致急性呼吸窘迫綜合征或多臟器衰竭而死亡[5]。由于流感抗原容易發(fā)生漂移，逃避人體免疫系統(tǒng)的監(jiān)視，常在世界范圍內(nèi)引起暴發(fā)和流行[6-7]。膠體金免疫層析法以膠體金作為示蹤標(biāo)志物，應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)的一種新型免疫標(biāo)記技術(shù)。本研究通過(guò)對(duì)醫(yī)院門(mén)診患者流感病毒抗原快速檢測(cè)結(jié)果結(jié)合流感流行特征進(jìn)行分析，為流感患者治療、流感疫情及時(shí)和準(zhǔn)確的報(bào)疫、院內(nèi)流感傳播風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警信號(hào)和醫(yī)院感染防控提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 資料來(lái)源 收集國(guó)家流感監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)醫(yī)院惠州市中心人民醫(yī)院2016年1月至2018年12月門(mén)診50 131份流感樣病例抗原快速檢測(cè)結(jié)果和國(guó)家傳染病信息管理系統(tǒng)上報(bào)的流感病例。流感樣病例檢測(cè)樣本納入標(biāo)準(zhǔn)[9]：發(fā)熱(體溫≥38℃)，伴咳嗽或咽痛之一者，同時(shí)缺乏其他實(shí)驗(yàn)室診斷依據(jù)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)無(wú)呼吸道急性感染癥狀的發(fā)熱病例；(2)有呼吸道癥狀但未出現(xiàn)體溫≥38℃；(3)合并其他感染性疾病；(4)7 d內(nèi)重復(fù)進(jìn)行抗原檢測(cè)。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 采集流感樣癥狀病例的咽拭子標(biāo)本，用無(wú)菌采樣棉簽適度用力抹拭咽后壁和兩側(cè)扁桃體后，將棉簽插入采樣管中，旋緊管蓋并密封，15 min內(nèi)送檢驗(yàn)科進(jìn)行膠體金免疫層析法流感病毒抗原檢測(cè)。

1.2.2 檢測(cè)方法 甲型/乙型流感病毒抗原抗原快速檢測(cè)采用膠體金免疫層析法進(jìn)行，檢測(cè)樣本為咽拭子，操作和結(jié)果判讀按照流感病毒抗原檢測(cè)試劑盒(膠體金法)說(shuō)明書(shū)(STANDARD DIAGNOSTICS,Inc.)進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 運(yùn)用Excel 2007建立數(shù)據(jù)庫(kù)并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)圖繪制，采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)各變量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)描述和分析，計(jì)數(shù)(頻數(shù))資料以率或百分比表示，α為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，Df為自由度，取α=0.05。餅圖描述數(shù)據(jù)構(gòu)成，折線(xiàn)圖描述數(shù)據(jù)動(dòng)態(tài)分布，樣本率比較采用2檢驗(yàn)。多組間兩兩比較進(jìn)行行×列表的分割，分割后的檢驗(yàn)水準(zhǔn)校正為α′=α/n,n=m(m-1)/2,m為分割前參加檢驗(yàn)的組數(shù)。分析兩變量相關(guān)程度采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析方法。

2 結(jié)果

2.1 流感抗原檢測(cè)及各類(lèi)型流感構(gòu)成結(jié)果 經(jīng)質(zhì)控審核，納入流感病毒抗原檢測(cè)結(jié)果49 401份，流感病毒抗原陽(yáng)性檢出9 651份，陽(yáng)性率為19.54%，各類(lèi)型流感病毒抗原檢出情況見(jiàn)表1，陽(yáng)性檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。流感病毒抗原陽(yáng)性構(gòu)成中，甲型病毒流感抗原構(gòu)成比最高，為55.52%，見(jiàn)圖1。結(jié)果顯示流感病毒抗原以甲型流感檢出為主。

表1 不同類(lèi)型流感病毒抗原檢出率的比較

圖1 流感抗原陽(yáng)性總體構(gòu)成

2.2 不同性別流感病毒抗原檢出及各類(lèi)型抗原構(gòu)成結(jié)果 不同性別流感病毒抗原陽(yáng)性檢出率見(jiàn)表2，陽(yáng)性檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.560)。

不同性別各類(lèi)型流感病毒抗原陽(yáng)性構(gòu)成情況見(jiàn)表3，陽(yáng)性構(gòu)成差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.3 不同年齡段流感病毒抗原陽(yáng)性檢出及構(gòu)成結(jié)果 不同年齡段流感病毒抗原陽(yáng)性檢出情況見(jiàn)表4，經(jīng)2檢驗(yàn)結(jié)果表明，陽(yáng)性檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),檢出率最高的為年齡段5～歲：24.46%，其次為25～歲：21.66%。作兩兩比較，年齡段15～歲與25～歲流感病毒抗原陽(yáng)性檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.02>0.005),年齡段5～歲、15～歲和25～歲均高于年齡段0～歲和≥60歲(P<0.005)。

表3 不同性別不同類(lèi)別流感病毒抗原陽(yáng)性構(gòu)成(%)

不同年齡段流感病毒抗原陽(yáng)性構(gòu)成情況見(jiàn)表5，陽(yáng)性構(gòu)成分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，作兩兩比較，除年齡段15～歲與25～歲(P=0.29)、15～歲與≥60歲(P=0.51)、25～歲與≥60歲(P=0.90)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，其余構(gòu)成分布差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.005)；每個(gè)年齡段均以甲型流感抗原檢出為主；混合流感抗原構(gòu)成占比以年齡段0～最高，并隨著年齡的增加，檢出率下降。

表4 不同年齡組流感病毒抗原陽(yáng)性檢出率的比較

表5 不同年齡段流感病毒抗原構(gòu)成的比較

2.4 不同年份流感病毒抗原檢出及給類(lèi)型抗原構(gòu)成結(jié)果 2016—2018年各年份流感病毒抗原陽(yáng)性檢出情況見(jiàn)表6，抗原陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2016年流感病毒抗原陽(yáng)性檢出率最高，為22.57%，并呈現(xiàn)逐年下降。

2016—2018年各類(lèi)型流感病毒抗原陽(yáng)性構(gòu)成情況見(jiàn)表7，抗原構(gòu)成差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表6 不同年份流感病毒抗原陽(yáng)性檢出率的比較

表7 不同年份不同類(lèi)型流感病毒抗原陽(yáng)性構(gòu)成的比較(%)

從流感病毒抗原陽(yáng)性檢出率的時(shí)間分布看，各年份呈現(xiàn)不同分布趨勢(shì)，2016年、2018年流感病毒抗原陽(yáng)性檢出高峰在冬春季節(jié)，而2017年檢出高峰在夏季。2016年流感病毒抗原陽(yáng)性檢出分布呈M型，延續(xù)上一年冬季流感的趨勢(shì)，在春季出現(xiàn)檢出高峰，5月回落至低點(diǎn)，整個(gè)夏季檢出處于低流行水平，秋季出現(xiàn)一波檢出高峰后回落，在冬季再次上升；2017年流感病毒抗原陽(yáng)性檢出分布呈W型，在春、夏和冬季均出現(xiàn)流行狀態(tài)，高峰期出現(xiàn)在夏季；2018年流感病毒抗原陽(yáng)性檢出分布呈U型走勢(shì)，春季延續(xù)上一年冬季流行趨勢(shì)，在1月份后回落后在夏秋季節(jié)一直處于低流行狀態(tài)，在冬季10月份再次恢復(fù)上升狀態(tài)至12月達(dá)到全年最高峰；見(jiàn)圖2。

從各類(lèi)型流感病毒抗原檢出數(shù)的時(shí)間分布看，各個(gè)時(shí)段均能檢出各類(lèi)型流感病毒抗原，但展現(xiàn)不同形式的流行特征，呈現(xiàn)季節(jié)性和周期性，既可以交叉流行又存在共同流行。2016年春季，甲流和乙流抗原共同流行，1月檢出數(shù)大幅上漲，在3月達(dá)到高峰隨后回落，到5月到達(dá)低谷后各類(lèi)型流感病毒抗原一直處于低流行狀態(tài)，甲流抗原在10月、12月陸續(xù)有個(gè)小高峰；2017年1—4月各類(lèi)型流感抗原一直處于低流行狀態(tài)，到夏季5月份后，甲型流感抗原檢出數(shù)大幅上漲，形成上升趨勢(shì)，在6月份達(dá)到流行高峰，隨后9月份回落低點(diǎn)，冬季11月份，乙型流感抗原檢出數(shù)大幅上漲，形成上升趨勢(shì)，到次年1月份月份達(dá)到流行高峰，隨后3月份回落低點(diǎn)；2018年春季乙型流感抗原流行后，各類(lèi)型流感抗原均處于低水平流行，到冬季10月份，甲型流感抗原檢出數(shù)大幅上漲，其余類(lèi)型流感抗原處于低水平，甲型流感抗原每隔一年流行一次，乙型流感抗原每隔兩年流行一次，見(jiàn)圖3。

圖2 不同年份流感病毒抗原陽(yáng)性檢出率的時(shí)間分布曲線(xiàn)

圖3 不同類(lèi)型流感病毒抗原檢出數(shù)的時(shí)間分布曲線(xiàn)

2.5 流感病毒抗原陽(yáng)性檢出率、流感樣病例就診率和流感病例診斷結(jié)果的時(shí)間分布 以1個(gè)月為1個(gè)觀察期，描述周期為2016年1月至2018年12月，共36個(gè)觀察期，結(jié)果顯示流感病毒抗原陽(yáng)性檢出率與流感樣就診比例和流感診斷病例數(shù)變化趨勢(shì)一致，波浪震蕩走向，具有季節(jié)交替現(xiàn)象，主要在冬春季節(jié)高發(fā)。將流感病毒抗原陽(yáng)性檢出率與流感樣病例就診比例按月進(jìn)行Spearman秩相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析，兩變量存相關(guān)性(r=0.599，P<0.05),見(jiàn)圖4。

3 討論

流感病毒潛伏期短，易傳染、擴(kuò)散快，容易導(dǎo)致暴發(fā)流行，至今仍然是嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康的傳染病[8]。流感病毒可通過(guò)氣溶膠途徑感染傳播，醫(yī)院是人員密集場(chǎng)所，楊鵬飛等[9]研究表明，醫(yī)院環(huán)境中存在流感病毒氣溶膠污染，容易造成流感的院內(nèi)暴發(fā)，有資料顯示一家精神病院因新入院患者，未及時(shí)診斷、治療和及時(shí)采取隔離措施，而引發(fā)一起人與人之間連續(xù)傳播的院內(nèi)流感暴發(fā)[10]。當(dāng)前奧司他韋作為針對(duì)流感病毒的首選藥物，早期使用可以提高流感治愈率，降低病死率[11]，研究表明對(duì)兒童、甲型流感、重癥患者的治療價(jià)值更為明顯[12-13]。毛愛(ài)華[14]對(duì)流行性感冒患者使用國(guó)產(chǎn)奧司他韋，67例患者中有57例(85.07%)在服藥24 h體溫顯著下降，均無(wú)并發(fā)癥出現(xiàn)。早期發(fā)現(xiàn)、快速準(zhǔn)確診斷并進(jìn)行抗病毒治療，降低流感病死率，并減少合并細(xì)菌感染的發(fā)生，從而減少抗生素的使用[15]。

膠體金免疫層析法具有檢測(cè)速度快、靈敏度高、特異度好、操作簡(jiǎn)單、無(wú)污染、成本低等特點(diǎn)，適合現(xiàn)場(chǎng)快速篩查，為臨床診斷和早期抗病毒治療提供參考依據(jù)。石漢振等[16]利用膠體金免疫層析法對(duì)醫(yī)院甲型H1N1流感病毒抗原的靈敏度為96.7%，特異度為95.8%，診斷優(yōu)勢(shì)比為382.50。本研究基于流感病毒抗原膠體金檢測(cè)方法，探討門(mén)診流感樣病例抗原的流行分布。

圖4 流感病例診斷、流感病毒抗原陽(yáng)性檢出率及流感樣病例就診率的時(shí)間分布曲線(xiàn)

本研究中，醫(yī)院門(mén)診流感病毒抗原陽(yáng)性檢出率為19.54%，以甲型流感抗原檢出為主，與惠州市2014—2016年流感病毒病原學(xué)監(jiān)測(cè)情況相近[17]，呈現(xiàn)逐年下降趨勢(shì)，這與流感病毒流行后，人群中獲得免疫力有關(guān)。不同性別流感病毒抗原檢出率差異不顯著，提示流感病毒對(duì)性別并無(wú)選擇性，與文獻(xiàn)[4]研究一致，進(jìn)一步驗(yàn)證人群對(duì)流感病毒普遍易感，但不同類(lèi)型抗原構(gòu)成存在差異，與武澗松等[6]研究略有差異，與王仕蘭等[8]研究一致，流感病毒分布存在性別差異。

不同年齡段流感病毒抗原檢出率存在差異，5～年齡段檢出率(24.46%)最高與顏玉炳等[18]發(fā)現(xiàn)6～14歲ILI陽(yáng)性率最高的報(bào)道一致，同時(shí)本研究15～年齡段也具有較高的檢出率(24.66%)，提示青少年和青年陽(yáng)性檢出率較高，而后隨年齡的升高呈下降趨勢(shì)，與國(guó)內(nèi)外報(bào)道[16，19]流感患者以青年人為主一致,進(jìn)一步佐證年齡影響流感病毒表達(dá)，年青人比兒童和老人可能更易感，這與這類(lèi)群體的活動(dòng)范圍大，社會(huì)交際廣泛，增加接觸流感病毒的機(jī)會(huì)。不同年齡段流感陽(yáng)性抗原構(gòu)成差異顯著，其中0～年齡段混合流感抗原陽(yáng)性構(gòu)成比明顯比其它年段要高，并隨年齡升高呈下降趨勢(shì)，混合流感由于不同類(lèi)型流感之間不存在交叉免疫的一種甲、乙流共病的現(xiàn)場(chǎng)[20]，這可能與兒童免疫系統(tǒng)發(fā)育不全，尚未建立有效的免疫屏障導(dǎo)致。

流感病毒的流行呈現(xiàn)季節(jié)性和周期性，本研究顯示，惠州市地區(qū)流感病毒抗原檢出高峰均出現(xiàn)在2016年和2018年冬春季，在2017年則出現(xiàn)夏季，與國(guó)家流感監(jiān)測(cè)[21]南方片區(qū)流行高峰主要是冬、春和夏季一致，符合廣東省流感流行規(guī)律[22]。各類(lèi)型流感抗原檢出情況形式多樣化，可見(jiàn)季節(jié)性流感病毒抗原在不同年份呈現(xiàn)流行水平波動(dòng)的特點(diǎn)，既可能單一流感病毒抗原檢出優(yōu)勢(shì)明顯，如本研究中2017年夏季以甲型流感抗原檢出為主，與胡麗雅等[23]研究報(bào)道廣州大學(xué)城2017年夏季甲型流感抗原陽(yáng)性檢出率為36.5%一致，2017年冬季和2018年春季以乙型流感抗原檢出為主；也會(huì)以多種流感病毒抗原共同流行，如本研究中，2016年春節(jié)甲乙流感抗原共同流行，符合惠州市當(dāng)年流感病原學(xué)監(jiān)測(cè)情況[17]?？傮w而言，本研究流感病毒抗原檢出率及甲乙流感病毒抗原與流感樣就診比例(ILI%)分布曲線(xiàn)高度一致和相似性，分布與優(yōu)勢(shì)流感抗原以甲型流感為主，這與國(guó)家流感監(jiān)測(cè)[21]病原學(xué)情況一致。

綜上所述，流感病毒的膠體金免疫層析法適合用于流感流行和高風(fēng)險(xiǎn)季節(jié)流感篩查，為早期診斷提供臨床依據(jù)，及時(shí)進(jìn)行抗病毒治療，為醫(yī)院流感疫情提供流行病學(xué)資料，及時(shí)、準(zhǔn)確地進(jìn)行疫情報(bào)疫，為醫(yī)院流感傳播風(fēng)險(xiǎn)提供預(yù)警信號(hào)，為流行季節(jié)醫(yī)院控制疫情的傳播蔓延決策提供依據(jù)。本研究為下一步建立流感抗原自回歸求和移動(dòng)平均(ARIMA)模型提供數(shù)據(jù)支持。但是鑒于膠體金免疫層析法局限性，無(wú)法對(duì)流感病毒作進(jìn)一步亞型分類(lèi)，僅適用于初篩，而最終的確診結(jié)果應(yīng)以核酸檢測(cè)結(jié)果為準(zhǔn)。