子癇前期病人血清相關炎性因子及胎盤生長因子的變化及意義

楊亞文，林小滿，孫禮強，張洪文，韓秋峪

作者單位：1徐州醫(yī)科大學研究生學院，江蘇 徐州221004；2徐州醫(yī)科大學附屬醫(yī)院婦產科，江蘇 徐州221004

子癇前期是妊娠期特發(fā)性疾病之一，其病因及發(fā)病機制尚未完全闡明，主要觀點包括：子宮螺旋小動脈重鑄不足，炎癥免疫過度激活，血管內皮細胞受損，遺傳因素，營養(yǎng)缺乏等［1］。臨床上將孕34周前發(fā)病者稱為早發(fā)型子癇前期，其具有發(fā)病早、病情重、母兒結局差等特點［2］。孕34周及以后發(fā)病者稱為晚發(fā)型子癇前期，其母兒結局相對較好［3］。有研究表明正常妊娠依賴于母胎免疫平衡的建立及維持［4］。在正常妊娠時，母體的Th1/Th2免疫狀態(tài)向Th2 漂移，而子癇前期孕婦的免疫狀態(tài)向Th1 漂移。本研究旨在通過研究子癇前期病人血清中Th1及Th2相關的細胞因子白細胞介素12（IL-12），白細胞介素4（IL-4）含量及胎盤生長因子（PLGF）的含量與子癇前期的病情進展的關系，為臨床中子癇前期的早發(fā)現，早診療提供依據。

1 資料與方法

1.1一般資料選取2019年1—5月于徐州醫(yī)科大學附屬醫(yī)院產科住院分娩的子癇前期病人70例，診斷標準參照第9版《婦產科學》［1］。其中早發(fā)型子癇前期33 例作為早發(fā)組；晚發(fā)型子癇前期37 例作為晚發(fā)組；同期住院分娩的正常妊娠孕婦30例作為對照組。納入病人均為單胎，既往無子癇前期及其他不良孕產史，平素身體健康、無基礎疾病、且排除其他內、外科合并癥。本研究符合《世界醫(yī)學協(xié)會赫爾辛基宣言》相關要求，研究對象知情且同意。

1.2研究方法樣本采集：抽取入組孕婦入院時空腹肘靜脈血3～5 mL，室溫下血液自然凝固30 min，在4 ℃恒溫離心機中，以1 000g離心15 min 取上清，標本皆清澈透明，排除溶血污染。置于-80 ℃超低溫冰箱內保存待用。實驗方法：采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）測定各樣本中IL-4，IL-12，PLGF 的水平。本研究所用試劑盒均為Bioswamp產品（批號201905），操作步驟嚴格按照試劑盒說明書。

1.3統(tǒng)計學方法所有數據均采用SPSS 25.0統(tǒng)計軟件進行分析，近似正態(tài)分布的計量資料的描述采用xˉ±s表示；多組間比較用單因素方差分析，其中多組間的兩兩比較采用LSD 法；相關性分析采用Pearson相關分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1各組一般情況比較三組間孕婦孕次及產次差異無統(tǒng)計學意義（均P＞0.05）。早發(fā)組分娩時孕周明顯低于晚發(fā)組及對照組，晚發(fā)組亦低于對照組（均P＜0.05）。早發(fā)組及晚發(fā)組分娩時年齡較對照組均差異有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05），早發(fā)組與晚發(fā)組兩組之間差異無統(tǒng)計學意義（均P＞0.05）。見表1。

2.2各組血清中細胞因子IL-12，IL-4及PLGF比較早發(fā)型子癇前期組血清中PLGF含量低于晚發(fā)型子癇前期組，兩組均低于對照組，均差異有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）；早發(fā)型子癇前期組血清中IL-12 含量高于晚發(fā)型子癇前期組，兩組均高于對照組，均差異有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）；早發(fā)型子癇前期組及晚發(fā)型子癇前期組血清中IL-4 含量均低于對照組（P＜0.05）。但早發(fā)組血清中IL-4 含量與晚發(fā)組之間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表2。

表1 早發(fā)型、晚發(fā)型子癇前期與正常妊娠對照一般情況比較/xˉ± s

表2 早發(fā)型、晚發(fā)型子癇前期與正常妊娠對照血清中白細胞介素12（IL-12），白細胞介素4（IL-4）及胎盤生長因子（PLGF）結果比較/（pg/mL，xˉ±s）

2.3相關性分析結果顯示血清中PLGF 含量與IL-12呈負相關（r＝-0.729，P＜0.001），與IL-4 呈正相關（r＝0.329，P＝0.022）。

3 討論

子癇前期是妊娠期高血壓疾病的一種，其平均發(fā)病率占孕產婦的2%～8%，是嚴重威脅母兒健康的特發(fā)性疾病［5］。正常妊娠時，母胎之間免疫平衡的建立與維持至關重要。呂英璞等［6］研究發(fā)現Th1型細胞因子對子癇前期的病情進展有促進作用，不利于妊娠的維持。IL-12作為一種前炎性因子，它可誘導免疫平衡向Th1方向極化，增強細胞免疫的作用，影響胎盤功能，從而促進子癇前期一系列癥狀的發(fā)生。而Th2型細胞因子所產生的體液免疫反應對妊娠的維持有保護作用。IL-4是典型的由Th2類細胞產生的細胞因子［7］，IL-4 可促進巨噬細胞分泌抗炎因子，促進血管生成及組織重構，且有利于胎盤血管形成，增強胎盤的著床能力，改善胎盤淺著床。同時在IL-4的作用下，Th0細胞向Th2細胞分化，進一步增強體液免疫，從而保護母體的妊娠過程。本研究中，早發(fā)型子癇前期病人血清中IL-12 含量高于晚發(fā)組及對照組，晚發(fā)組高于對照組（均P＜0.05），說明病情發(fā)生越早，細胞免疫向Th1 偏移越明顯，提示病情越重。而對于血清中IL-4 含量，早發(fā)組及晚發(fā)組相較于對照組均降低（P＜0.05），但早發(fā)組雖然低于晚發(fā)組，但二者之間差異無統(tǒng)計學意義。這可能與妊娠本身所致的免疫平衡向Th2偏移有關。

Benton等［8］認為，外周血中PLGF水平是反映胎盤功能的一項重要指標。PLGF 是血管內皮生長因子家族的成員之一，是胎盤血管生成的重要旁分泌因子，是滋養(yǎng)層細胞的重要調節(jié)物，適量的PLGF有益于胎盤血管網絡的形成，保證胎兒生長所需［9］。杜軍華等［10］研究顯示PLGF 在早孕期（孕5～15 周）呈現低水平表達，而在孕15 周左右急劇上升，到孕30周左右達到高峰，隨后由于胎盤成熟老化，PLGF水平明顯下降。結合各組孕周，在正常妊娠情況下，早發(fā)組血清中PLGF濃度應高于晚發(fā)組，且高于對照組。而本研究中，早發(fā)型子癇前期組孕婦血清中PLGF 含量低于晚發(fā)組及對照組，晚發(fā)組低于對照組，均差異有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05），這與生理性變化相反，提示病情出現越早，胎盤功能下降程度越嚴重，病情越重，母兒預后越差。這與馮鑫等［11］研究結果一致。

有學者認為，子癇前期的危險因素包括年齡，既往有子癇前期病史，多胎，心血管疾病及糖尿病，結締組織病等［12］。并認為年齡是子癇前期的獨立危險因素。本研究顯示，子癇前期的發(fā)生與年齡有關，年齡越大發(fā)生子癇前期的風險升高，這與王明輝等［13］研究結果一致，但本研究中，早發(fā)組及晚發(fā)組子癇前期孕婦年齡差無統(tǒng)計學意義。Li 等［14］研究發(fā)現，當年齡＞35 歲時，妊娠所患子癇前期的風險明顯升高。本研究只證實隨著年齡增大，妊娠患病風險增高，而不能證明35歲作為疾病發(fā)生的重要界限，這可能與本研究樣本量較少有關，需進一步擴大樣本量研究。

通過本研究可以發(fā)現，子癇前期病人血清中Th1類細胞因子IL-12含量明顯升高，且病情發(fā)展越早，變化越明顯。而對于血清中Th2類細胞因子IL-4 含量，子癇前期發(fā)病越早，IL-4 含量越低，提示病情越重。血清中PLGF與IL-12負相關，與IL-4正相關，提示可能存在免疫平衡向Th1的偏移改變，并影響了胎盤功能。且發(fā)病越早，提示免疫平衡可能向Th1 偏移越明顯，病情越重。本研究進行了差異分析，我們發(fā)現免疫平衡偏移所致血清中的細胞因子含量改變，可較好地體現病情進展情況，我們將進一步擴大研究，確定不同孕周相關指標的參考值范圍，以期為臨床早診斷、早治療子癇前期提供可靠依據。